宮燕偉 郭梅 梁晨 趙洪海 李寶篤

摘要：

為了解藍(lán)莓品種對(duì)枝枯病的抗性和育種價(jià)值，本研究選取18個(gè)藍(lán)莓品種，采用枝條刺傷法接種4種藍(lán)莓枝枯病病原（假可可毛色二胞、烏飯樹(shù)擬莖點(diǎn)霉、葡萄座腔菌、棒狀擬盤多毛孢）用于抗性鑒定。結(jié)果顯示，藍(lán)莓品種對(duì)枝枯病的4種病原抗性差異明顯。在對(duì)假可可毛色二胞枝枯病的抗性上，貴藍(lán)、陽(yáng)光藍(lán)、安娜、杰兔、奧斯汀為中抗，薄霧為高抗；18個(gè)品種中除布里吉塔是中感外，其余品種均抗烏飯樹(shù)擬莖點(diǎn)霉枝枯病，其中14個(gè)品種為高抗；18個(gè)品種除雷格西、布里吉塔、燦爛對(duì)葡萄座腔菌表現(xiàn)中抗外，其余15個(gè)品種均表現(xiàn)高抗；在對(duì)擬盤多毛孢枝枯病的抗病表現(xiàn)上，除了雷格西和奧尼爾是高感，布里吉塔和安娜是中感之外，其余均為高抗品種。綜合來(lái)看，供試藍(lán)莓抗假可可毛色二胞枝枯病的品種較少，抗其它三種枝枯病的品種較多。

關(guān)鍵詞：藍(lán)莓枝枯病；品種；抗性

中圖分類號(hào)：S436.639 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)號(hào)：A 文章編號(hào)：1001-4942（2018）08-0120-04

Resistance Identification of Blueberry Varieties to Twig Blight

Gong Yanwei1， Guo Mei1， Liang Chen1，2， Zhao Honghai1， Li Baodu1

（1. College of Plant Health and Medicine， Qingdao Agricultural University/Key Laboratory of

Integrated Crop Pest Management of Shandong Province， Qingdao 266109， China；

2. Shandong Provincial Key Laboratory of Applied Mycology， Qingdao 266109， China）

Abstract Four pathogens of blueberry twig blight （Lasiodiplodia pseudotheobromae， Phomopsis vaccinii， Botryosphaeria dothidea， Pestalotipsis clavispora） were inoculated on eighteen varieties of blueberry in order to understand their twig blight resistance and breeding value. The results showed that there were significant differences in resistance to four twig blight pathogens of blueberry varieties. On the resistance to Lasiodiplodia pseudotheobromae twig blight， the varieties of Nobleblue， Sunshineblue， Dianna， Primier and Austin had moderate resistance，and Misty had high resistance. All of the 18 varieties were resistant to Phomopsis vaccinii twig blight except that Brigitta was moderately susceptible， and 14 of them were highly resistant. The 18 varieties except Legacy， Brigitta and Brightwell were moderotely resistant to Botryosphaeria dothidea twig blight， and the other 15 varieties were highly resistant. In term of resistance to Pestalotipsis clavispora twig blight， except the high-susceptible varieties of ONeal and Legacy， and the moderate-susceptible varieties of Brigitta and Dianna， the others were all high-resistant varieties. On the whole， there were fewer varieties resistant to L. pseudotheobromae in blueberry， and more varieties resistant to the other three kinds of twig blight.

Keywords Blueberry twig blight； Variety； Resistance

藍(lán)莓（Vaccinium spp.） 是杜鵑花科（Ericaceae） 越橘屬（Vaccinium） 的一類多年生小漿果類果樹(shù)，廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥、保健、化妝品和環(huán)境保護(hù)等各方面，聯(lián)合國(guó)糧農(nóng)組織將其果實(shí)列為人類世界五大健康食品之一。2008年以來(lái)，我國(guó)藍(lán)莓栽培面積迅速增加，到2015年規(guī)?；N植的省份達(dá)到27個(gè)，栽培面積達(dá)31 210 hm2，總產(chǎn)量達(dá)43 244 t[1]。隨著種植面積的不斷擴(kuò)大和產(chǎn)量持續(xù)增加，各種藍(lán)莓病害頻繁發(fā)生，尤其是藍(lán)莓枝枯病，成為危害最嚴(yán)重、發(fā)生最普遍的一類病害[2-7]。目前用于防治藍(lán)莓枝枯病的登記藥劑幾乎為空白，大多處于試驗(yàn)階段[8-10]；抗病品種對(duì)于藍(lán)莓枝枯病的防治是較好措施，然而關(guān)于藍(lán)莓品種抗病性研究不多。本研究就藍(lán)莓品種對(duì)4種主要枝枯病抗性進(jìn)行鑒定，明確品種間的抗性差異，篩選抗病品種，為藍(lán)莓生產(chǎn)提供參考。

1 材料與方法

1.1 供試材料

試驗(yàn)于2017年在青島農(nóng)業(yè)大學(xué)真菌學(xué)研究室進(jìn)行。供試藍(lán)莓有三大系列共18個(gè)品種，分別為：北高叢系列（公爵Duck、雷格西Legacy、貴藍(lán)Nobleblue、布里吉塔Brigitta、藍(lán)金B(yǎng)luegold、比洛克西Biloxi、藍(lán)豐Bluecrop）、南高叢系列（珠寶Jewel、綠寶石Emerald、陽(yáng)光藍(lán)Sunshineblue、夏普藍(lán)Sharpblue、安娜Dianna、奧尼爾ONeal、薄霧Misty）、兔眼系列（杰兔Primier、錢德勒Chandler、奧斯汀Austin、燦爛Brightwell）。供試材料均采自立地條件一致的同一果園內(nèi)當(dāng)年生枝條。

病原菌：假可可毛色二胞（Lasiodiplodia pseudotheobromae）HMQAU140073、烏飯樹(shù)擬莖點(diǎn)霉（Phomopsis vaccinii）HMQAU150030、葡萄座腔菌（Botryosphaeria dothidea）HMQAU150053 、棒狀擬盤多毛孢（Pestalotipsis clavispora）HMQAU160064，由本課題組提供，于接種前活化并轉(zhuǎn)接到PDA平板上25℃培養(yǎng)5 d。

1.2 接種方法

通過(guò)預(yù)試驗(yàn)確定8月份進(jìn)行接種鑒定。選用當(dāng)年生無(wú)病藍(lán)莓枝條，用清水沖洗后晾干，采用枝條刺傷法，在接種部位用75%乙醇消毒并用無(wú)菌昆蟲(chóng)針刺傷，用直徑5 mm打孔器在培養(yǎng)5 d的病原菌菌落邊緣打取菌餅，有菌絲面朝下貼覆于刺傷處，保鮮膜纏繞固定并保濕，置于一次性紙杯中水培，48 h后去掉菌餅并繼續(xù)培養(yǎng)。每個(gè)品種選擇 3個(gè)枝條，每個(gè)枝條接種一個(gè)點(diǎn)，以接種無(wú)菌的PDA餅為對(duì)照。培養(yǎng)條件為25℃、12 h光暗交替。

1.3 病情調(diào)查

分別于接種后第3 d和第5 d進(jìn)行病情調(diào)查，以每個(gè)枝條為單位，測(cè)量病斑的長(zhǎng)和寬并計(jì)算病斑面積。根據(jù)病斑面積大小劃分病原菌在不同品種的致病力強(qiáng)度，按下述標(biāo)準(zhǔn)分級(jí)并計(jì)算病情指數(shù)：0級(jí)，未發(fā)?。?級(jí)，病斑面積<2%；2級(jí)，2%≤病斑面積<5%；3級(jí)，5%≤病斑面積<10%；4級(jí)，10%≤病斑面積<20%；5級(jí)，20%≤病斑面積<50%；6級(jí)，病斑面積≥50%。病情指數(shù)（DI）=∑（各級(jí)病斑數(shù)×各級(jí)代表值）調(diào)查總病斑數(shù)×最高級(jí)代表值×100。根據(jù)病情指數(shù)判斷藍(lán)莓品種對(duì)枝枯病的抗性：0≤DI<20，高抗（HR）； 20≤DI<40，中抗（MR）；40≤DI<60，中感（MS）；DI≥60，高感（HS）。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同藍(lán)莓品種對(duì)假可可毛色二胞的抗性

接種3 d后，18個(gè)藍(lán)莓品種枝條全部發(fā)病，主要癥狀表現(xiàn)為病斑初期呈水漬狀、紅褐色，后期病部凹陷；接種5 d后，不同寄主品種的癥狀以及發(fā)病程度出現(xiàn)差異。供試北高叢系列藍(lán)莓品種的病斑面積在3.63～76.43 cm2之間，病情指數(shù)在33～100之間，平均病情指數(shù)為81.3，除了貴藍(lán)是中抗品種，其余6個(gè)品種均高感假可可毛色二胞。供試南高叢系列藍(lán)莓品種的病斑面積在1.23～45.87 cm2之間，病情指數(shù)在17～94之間，平均病情指數(shù)為54.7，其中薄霧是高抗品種，陽(yáng)光藍(lán)和安娜是中抗品種，其余4個(gè)品種均為高感。供試兔眼系列藍(lán)莓品種的病斑面積在2.47～33.53 cm2之間，病情指數(shù)在28～88之間，平均病情指數(shù)為59.2，杰兔和奧斯汀是中抗品種，錢德勒和燦爛是高感品種（表1）。

2.2 不同藍(lán)莓品種對(duì)烏飯樹(shù)擬莖點(diǎn)霉的抗性

接種3 d后，18個(gè)藍(lán)莓品種枝條全部發(fā)病，主要癥狀表現(xiàn)為病斑初期呈水漬狀、褐色，后期病斑環(huán)繞莖，并沿上下擴(kuò)展；接種5 d后，不同藍(lán)莓品種的癥狀以及發(fā)病程度稍有差異。供試北高叢系列藍(lán)莓品種的病斑面積在0.10～7.00 cm2之間，病情指數(shù)在17～44之間，平均病情指數(shù)為24.0，除了布里吉塔是中感品種、雷格西是中抗品種之外，其余5個(gè)品種均高抗烏飯樹(shù)擬莖點(diǎn)霉。供試南高叢系列藍(lán)莓品種的病斑面積在0.10～4.27 cm2之間，病情指數(shù)在17～39之間，平均病情指數(shù)為20.1，除了安娜是中抗品種之外，其余6個(gè)藍(lán)莓品種均為高抗。供試兔眼系列藍(lán)莓品種的病斑面積在0.17～2.63 cm2之間，病情指數(shù)分布在17～28之間，平均病情指數(shù)為19.8，杰兔、錢德勒、奧斯汀均為高抗品種，燦爛為中抗品種（表1）。

2.3 不同藍(lán)莓品種對(duì)葡萄座腔菌的抗性

接種3 d后，18個(gè)藍(lán)莓品種枝條全部發(fā)病，主要癥狀表現(xiàn)為病斑初期呈水漬狀、褐色，后期病斑環(huán)繞莖，并沿上下擴(kuò)展；接種5 d后，不同藍(lán)莓品種的癥狀以及發(fā)病程度稍有差異。供試北高叢系列藍(lán)莓品種的病斑面積在0.03～4.10 cm2之間，病情指數(shù)分布在17～33之間，平均病情指數(shù)為20.0，除了布里吉塔和雷格西是中抗之外，其余5個(gè)品種均高抗葡萄座腔菌。供試南高叢系列藍(lán)莓品種的病斑面積在0.13～0.53 cm2之間，病情指數(shù)均為17，7個(gè)品種均為高抗。供試兔眼系列藍(lán)莓品種的病斑面積在0.13～1.67 cm2之間，病情指數(shù)分布在17～22之間，平均病情指數(shù)為18.2，其中燦爛是中抗品種，其余三個(gè)品種均表現(xiàn)高抗（表1）。

2.4 不同藍(lán)莓品種對(duì)棒狀擬盤多毛孢的抗性

接種3 d后，18個(gè)藍(lán)莓品種枝條全部發(fā)病，主要癥狀表現(xiàn)為病斑初期呈紅褐色，后期病斑中央漸變白色，并產(chǎn)生一圈紅褐色壞死斑，外圍有水漬狀黃色暈圈；接種5 d后，不同藍(lán)莓品種的癥狀特點(diǎn)以及發(fā)病程度稍有差異。供試北高叢系列品種的病斑面積在0.23～31.4 cm2之間，病情指數(shù)分布在17～83之間，平均病情指數(shù)為31.1，除布里吉塔中感、雷格西高感外，其余5個(gè)品種均高抗棒狀擬盤多毛孢。供試南高叢系列藍(lán)莓品種的病斑面積在0.23～20.43 cm2之間，病情指數(shù)分布在17～61之間，平均病情指數(shù)為28.0，除奧尼爾高感、安娜中感之外，其余品種均為高抗。供試兔眼系列藍(lán)莓品種的病斑面積在0.30～0.77 cm2之間，病情指數(shù)均為17，4個(gè)品種均為高抗（表1）。

3 討論與結(jié)論

目前對(duì)藍(lán)莓品種枝枯病抗性缺少研究。本研究通過(guò)田間調(diào)查，從主栽品種和種質(zhì)資源中選擇3個(gè)系列共18個(gè)藍(lán)莓品種，采用枝條刺傷法，對(duì)山東地區(qū)藍(lán)莓生產(chǎn)上4個(gè)主要枝枯病的抗性進(jìn)行了鑒定。結(jié)果表明，北高叢系列的公爵、貴藍(lán)、藍(lán)金、比洛克西、藍(lán)豐和南高叢系列的珠寶、綠寶石、陽(yáng)光藍(lán)、夏普藍(lán)、薄霧及兔眼系列的杰兔、錢德勒、奧斯汀對(duì)葡萄座腔菌、烏飯樹(shù)擬莖點(diǎn)霉、棒狀擬盤多毛孢引起的枝枯病均表現(xiàn)高抗。此外南高叢系列的安娜、奧尼爾高抗葡萄座腔菌枝枯病，南高叢系列的奧尼爾高抗烏飯樹(shù)擬莖點(diǎn)霉枝枯病，兔眼系列的燦爛高抗棒狀擬盤多毛孢枝枯病。而對(duì)于假可可毛色二胞枝枯病，只有南高叢系列的薄霧是高抗品種，北高叢系列的貴藍(lán)、南高叢系列的陽(yáng)光藍(lán)和安娜、兔眼系列的杰兔和奧斯汀是中抗品種，其余品種均為高感。通過(guò)抗病性鑒定可以篩選出抵抗當(dāng)?shù)夭≡目共∑贩N，為藍(lán)莓的品種選擇和生產(chǎn)管理提供參考。

藍(lán)莓枝枯病的發(fā)病程度受樹(shù)勢(shì)、環(huán)境的影響。通過(guò)室內(nèi)接種鑒定試驗(yàn)可以避免田間接種時(shí)環(huán)境條件不適宜導(dǎo)致接種結(jié)果不能代表品種真實(shí)抗病性的問(wèn)題。發(fā)病率可以簡(jiǎn)單反映枝干發(fā)病情況，而病情指數(shù)則是綜合反映病害程度的指標(biāo)，本試驗(yàn)選用發(fā)病面積作為藍(lán)莓枝枯病抗性評(píng)價(jià)的形態(tài)指標(biāo)[11]并對(duì)其抗性進(jìn)行了評(píng)價(jià)，為今后的藍(lán)莓抗病性研究奠定了基礎(chǔ)。

參 考 文 獻(xiàn)：

[1]

李亞?wèn)|， 孫海悅， 陳麗. 我國(guó)藍(lán)莓產(chǎn)業(yè)發(fā)展報(bào)告[J]. 中國(guó)果樹(shù)， 2016（5）：1-10.

[2] 余磊， 趙建榮， Rarisara Impaprasert， 等. 藍(lán)莓枝枯病病原菌鑒定[J]. 植物病理學(xué)報(bào)， 2013， 43（4）： 421-425.

[3] 趙洪海， 岳清華， 梁晨. 藍(lán)莓?dāng)M盤多毛孢枝枯病的病原菌[J]. 菌物學(xué)報(bào)， 2014， 33（3）： 577-583.

[4] 王佳寧， 趙洪海， 尉瑩瑩， 等. 藍(lán)莓毛色二胞枝枯病的病原菌[J]. 菌物學(xué)報(bào)， 2016， 35（6）： 657-665.

[5] 岳清華， 趙洪海， 梁晨， 等. 藍(lán)莓?dāng)M莖點(diǎn)枝枯病的病原[J]. 菌物學(xué)報(bào)， 2013， 32（6）： 959-966.

[6] 徐成楠， 張紅軍， 遲福梅， 等. 藍(lán)莓枝枯病菌Botryosphaeria dothidea 的寄主范圍研究[J]. 中國(guó)果樹(shù)， 2015（2）： 43-45.

[7] 費(fèi)諾亞， 李媛， 石凌波， 等. 藍(lán)莓帚梗柱孢枝枯病病原菌鑒定及生物學(xué)特性[J]. 西南農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)， 2017， 30（10）： 2251-2255.

[8] 岳清華， 高勇， 廖甜甜， 等. 6種殺菌劑對(duì)5種藍(lán)莓枝枯病原菌的室內(nèi)毒力測(cè)定[J]. 山東農(nóng)業(yè)科學(xué)，2015，47（6）：101-103.

[9] 徐成楠， 遲福梅， 冀志蕊， 等. 5種殺菌劑對(duì)藍(lán)莓枝枯病菌Neofusicoccum parvum的毒力測(cè)定及對(duì)病害的防效研究[J]. 中國(guó)果樹(shù)，2016（3）：42-46.

[10]董克鋒， 岳清華， 高勇， 等. 藍(lán)莓枝枯病枝剪口涂抹藥劑效果試驗(yàn)[J]. 北方園藝， 2016（4）：118-119.

[11]方中達(dá). 植病研究方法[M]. 第三版.北京： 中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社， 1998.