林 蔚 肖 平 吳祖常

婦科腫瘤中卵巢癌、宮頸癌、子宮內(nèi)膜癌是最常見的三大惡性腫瘤，已成為嚴(yán)重威脅婦女生命的主要頑癥，其主要原因是早期診斷困難及高復(fù)發(fā)率[1]。因此，提高腫瘤早期診斷率對于提高腫瘤患者的生存率至關(guān)重要。C12多腫瘤標(biāo)志物蛋白芯片檢測技術(shù)是目前常用的腫瘤診斷方法之一，該技術(shù)具有創(chuàng)傷性小、高通量、高靈敏度、高特異性、多變量分析、微型化、操作簡單快速、價格合理等特點(diǎn)，對腫瘤早期診斷有輔助作用[2]。本文通過對95例婦科腫瘤患者和167例婦科良性疾病患者以及149例健康體檢女性血清中12種腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合檢測，對其臨床資料進(jìn)行回顧性分析，探討腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合檢測在婦科腫瘤臨床診斷中的應(yīng)用價值。

1 資料與方法

1.1 研究對象

選取2013年1月—2015年12月在我院體檢的149例健康女性，平均年齡(42.1±12.3)歲，均無常見婦科疾??；住院治療的婦科良性疾病患者167例，平均年齡(39±9.1)歲，包括子宮肌瘤、子宮內(nèi)膜異位、宮頸息肉、卵巢囊腫等，均已排除炎癥、感染及其它婦科疾病；婦科惡性腫瘤患者95例，平均年齡(35.9±11.9)歲，包括卵巢癌36例，宮頸癌33例，子宮內(nèi)膜癌26例，均經(jīng)病理確診。

1.2 方法

待檢者空腹抽血2 mL，分離血清，-20℃保存。儀器：HD-2001 A生物芯片檢測儀，試劑盒：多腫瘤標(biāo)志物蛋白芯片檢測試劑盒，均由上海數(shù)康生物科技公司研制生產(chǎn)，嚴(yán)格按照所提供的試劑說明書進(jìn)行操作。正常參考值：CA125<35 u/mL, CA199<35 u/mL, CA242 <20 u/mL, CEA<5 ng/mL。超過參考值為陽性，在正常參考值范圍內(nèi)為陰性[3]。此四項中任何一項指標(biāo)陽性則認(rèn)為聯(lián)合檢測陽性。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 各組間血清12種腫瘤標(biāo)志物測定值比較

惡性腫瘤組血清CA125、CA199、CA242和CEA水平顯著高于良性疾病組和對照組，組間比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；良性疾病組的CA125、CA199、CA242也明顯高于對照組，組間比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，而CEA水平則僅略高于對照組，組間比較無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)；提示CA125、CA199、CA242和CEA項腫瘤標(biāo)志物測定對婦科腫瘤具有診斷意義，而婦科腫瘤良、惡性之間的甄別診斷則有待進(jìn)一步研究；見表1。HGH、f-PSA、PSA、NSE、Ferritin、AFP、β-HCG、CA153水平組間比較差異不大(P>0.05)。

組別例數(shù)CA125CA199 CA242CEA惡性腫瘤組95166.5±195.41)2)51.7±1041)2)12.4±26.51)2)3.9±11.81)2)良性疾病組16733.2±52.714.8±29.55.4±7.11.2±1.4對照組1498.36±4.39.3±5.33.71±2.81.05±0.72

注：與良性疾病組比較，1)P<0.05；與對照組比較，2)P<0.05

2.2 各組四種腫瘤標(biāo)志物陽性率比較

血清CA125、CA199、CA242和CEA單獨(dú)檢測中， 以CA125檢出陽性率最高。組間比較，各腫瘤標(biāo)志物在惡性腫瘤組陽性檢測率均高于良性疾病組和對照組(P<0.05)；良性疾病組陽性檢測率均高于對照組(P<0.05)；惡性腫瘤組與良性疾病組的聯(lián)合檢測陽性率分別為54.7%和29.9%，均高于CA199、CA242、CEA單獨(dú)檢測陽性率(P<0.05)；惡性腫瘤組與良性疾病組的聯(lián)合檢測陽性率與CA125單獨(dú)檢測陽性率比較相差不大(P>0.05)。見表2。

表2 各組血清中四種腫瘤標(biāo)志物陽性率比較 n(%)

注：與良性組比較，1)P<0.05；與正常組比較，2)P<0.05；與聯(lián)合檢測陽性率比較，3)P<0.05

2.3 CA125單獨(dú)檢測與四種標(biāo)志物聯(lián)合檢測在婦科腫瘤患者中的敏感性和特異性比較

在惡性腫瘤組CA125單獨(dú)檢測的敏感性是52.63%，特異性是73.65%，四種標(biāo)志物聯(lián)合檢測的敏感性是54.74%，特異性是70.06%，相差不大(P>0.05)；與良性疾病組比較，惡性腫瘤組CA125單獨(dú)檢測與聯(lián)合檢測其敏感性與特異性均明顯高于良性疾病組(P<0.05)。而在卵巢癌患者方面CA125單獨(dú)檢測的敏感性是100%，特異性是76.27%，四種標(biāo)志物聯(lián)合檢測敏感性也是100%，特異性是76.27%，CA125單獨(dú)檢測跟聯(lián)合檢測敏感性和特異性都差不多(P>0.05)，但在卵巢癌患者的檢測中無論是CA125單獨(dú)檢測還是聯(lián)合檢測，敏感性都比惡性腫瘤患者的高(P<0.05)，特異性兩者相差不大(P>0.05)。與良性疾病組比較，卵巢癌患者CA125單獨(dú)檢測與聯(lián)合檢測其敏感性與特異性均明顯高于良性疾病組(P<0.05)。見表3。

表3 CA125單獨(dú)檢測與四種標(biāo)志物聯(lián)合檢測在婦科腫瘤患者中的敏感性和特異性 (%)

注：與良性疾病組比較，1)P<0.05；與惡性腫瘤組比較，2)P<0.05

3 討論

腫瘤標(biāo)志物(Tumor Marker,TM)是指存在于腫瘤細(xì)胞內(nèi)或腫瘤細(xì)胞表達(dá)及脫落的物質(zhì)，或是宿主對體內(nèi)腫瘤反應(yīng)而產(chǎn)生的物質(zhì)，常見于細(xì)胞內(nèi)或細(xì)胞表面[4]。其并非腫瘤細(xì)胞所特有，而是腫瘤細(xì)胞的表達(dá)量明顯增加，與正常細(xì)胞存在量的差異，可以明確反映出腫瘤的存在與生長[5]。糖類抗原125(CA125)是目前臨床上用來診斷和檢測卵巢上皮性惡性腫瘤的主要指標(biāo)，但CA125在良性疾病或者其它腫瘤也有高表達(dá)[6-7]。本文研究結(jié)果也提示CA125在婦科惡性腫瘤(及卵巢癌)中的陽性檢出率及敏感性、特異性，均明顯高于良性腫瘤組。糖類抗原199(CA199)廣泛用于消化系統(tǒng)腫瘤的診斷及治療監(jiān)測[8]，在上皮性卵巢癌，尤其是卵巢粘液性囊腫腺癌中有較高表達(dá)[9]。癌胚抗原(CEA)在判斷惡性腫瘤術(shù)后復(fù)發(fā)與否中有十分重要的臨床價值。CA242是一種唾液酸化的糖類抗原, 是一種存在于多器官惡性腫瘤中呈粘蛋白類型的糖蛋白, 近年來應(yīng)用于臨床較新的一種腫瘤標(biāo)志物，是胰腺癌和結(jié)腸癌較好的腫瘤標(biāo)志物。以往檢測腫瘤標(biāo)志物一般使用ELISA、放射免疫分析法(RIA)，這二種檢測方法存在單一性(即一次只能檢測一項標(biāo)志物)，操作時間也比較長等缺點(diǎn)，鑒于單項檢測存在含量﹑方法﹑特異性的限制，具有一定局限性，為提高婦科腫瘤早期診斷的準(zhǔn)確性，減少漏診和誤診，及時為患者解除病痛，縮短了診病時間，節(jié)省醫(yī)療成本，因此，聯(lián)合檢測TM在臨床中受到了臨床工作者的重視并開始廣泛應(yīng)用。多腫瘤標(biāo)志物蛋白芯片技術(shù)，即采用微量點(diǎn)樣技術(shù)將12種腫瘤標(biāo)志物抗體集成在一張芯片上，一次檢測12種TM抗原。該技術(shù)是一種高通量、高靈敏度、高特異性且微量化的蛋白質(zhì)分析技術(shù)，使原來需要進(jìn)行12次實驗的操作一次完成，大大縮短診病時間，節(jié)省醫(yī)療成本[10]。多腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合檢測可為婦科惡性腫瘤診斷建立幾種相關(guān)性較高的腫瘤標(biāo)志物，提高診斷的靈敏性和準(zhǔn)確性，有助于指導(dǎo)臨床治療[11-12]。

本研究中以婦科腫瘤患者為研究對象，采用C-12多腫瘤標(biāo)志物蛋白芯片檢測系統(tǒng)聯(lián)合定量檢測患者血清中12種腫瘤標(biāo)志物(包括HGH、f-PSA、PSA、NSE、CA125、Ferritin、CA199、AFP、CEA、CA242、β-HCG、CA153)水平，根據(jù)病理診斷結(jié)果分為良性和惡性腫瘤兩組，以健康體檢女性作為正常對照組，分析腫瘤標(biāo)志物CA125、CA199、CA242和CEA等在不同分組人群中的陽性率及與婦科腫瘤良惡性質(zhì)的相關(guān)性，計算聯(lián)合檢測多腫瘤標(biāo)志物對婦科腫瘤診斷的敏感性和特異性，探討C-12多腫瘤標(biāo)志物蛋白芯片檢測系統(tǒng)對鑒別婦科良惡性腫瘤的價值。血清12種腫瘤標(biāo)志物測定結(jié)果提示，惡性腫瘤組血清CA125、CA199、CA242和CEA水平在婦科惡性腫瘤與良性腫瘤和正常健康人之間存在顯著差異(P<0.05)，這四項腫瘤標(biāo)記物的單獨(dú)檢測與聯(lián)合檢測均提示，惡性腫瘤組陽性檢出率均高于良性疾病組和對照組(P<0.05)，良性疾病組陽性檢測率均高于對照組(P<0.05)；提示這四項腫瘤標(biāo)記物對婦科惡性腫瘤有重要的診斷意義。本研究中CA125陽性率在婦科惡性腫瘤中遠(yuǎn)高于其他標(biāo)記物，這與目前臨床中關(guān)于婦科惡性腫瘤報道最多的腫瘤標(biāo)記物說法一致[13-14]；正常人血清中的CA125水平較低，而一但出現(xiàn)浸潤性腫瘤，細(xì)胞間連接與基底膜被破壞，CA125則被釋放到血液中，因此，在婦科惡性腫瘤中檢出率極高。在腫瘤標(biāo)志物與婦科腫瘤患者中的敏感性和特異性觀察中，我們也發(fā)現(xiàn)， CA125單獨(dú)檢測與四種標(biāo)志物聯(lián)合檢測在婦科腫瘤患者中的敏感性和特異性，均明顯高于良性疾病組(P<0.05)；而其中卵巢癌患者CA125單獨(dú)檢測與聯(lián)合檢測的敏感性都高達(dá)100%，這一結(jié)果提示CA125可作為區(qū)分卵巢癌與其他婦科腫瘤的標(biāo)記物。

綜上所述，婦科惡性腫瘤患者血清中CA125、CA199、CA242和CEA的陽性率高于良性疾病患者和健康人群，多腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合檢測在婦科腫瘤患者中陽性檢出率比單獨(dú)檢測明顯提高，說明多腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合檢測是輔助鑒別婦科腫瘤良惡性質(zhì)的有效方法之一，可有效提高婦科惡性腫瘤診斷的靈敏性和準(zhǔn)確性，減少漏診和誤診，有助于指導(dǎo)臨床治療。