林 靜 羅偉波

廣東省東莞市橋頭醫(yī)院，廣東東莞 523520

乙型病毒性肝炎由具有傳染性的乙肝病毒感染引起，患者的常見(jiàn)癥狀主要有惡心、食欲減退、肝大、乏力、肝功能異常等，部分患者伴有黃疸和發(fā)熱現(xiàn)象；少數(shù)乙肝病毒攜帶者無(wú)明顯癥狀；少數(shù)患者由于治療不及時(shí)，病情不斷緩慢發(fā)展，可導(dǎo)致患者肝硬化，甚至發(fā)展為肝臟惡性腫瘤；病情嚴(yán)重的患者可在較短的時(shí)間內(nèi)發(fā)展為重型肝炎，對(duì)患者的生命和健康造成嚴(yán)重的威脅和影響[1-2]。由于乙型肝炎病毒的傳播途徑包括母嬰傳播、輸血傳播、醫(yī)源性傳染、性傳播、密切生活接觸傳播等，為了控制病毒的傳播和擴(kuò)散，降低病毒的感染率，控制患者病情的發(fā)展，應(yīng)及時(shí)給予疑似乙型肝炎患者進(jìn)行早期檢查和診斷[3]。對(duì)乙肝病毒的血清學(xué)檢測(cè)主要有酶聯(lián)免疫法和化學(xué)發(fā)光法，兩者均在乙型肝炎的診斷中具有積極作用，但不同的檢驗(yàn)方法檢驗(yàn)的效果存在一定的差異[4]。為了對(duì)比兩種檢驗(yàn)方法在乙肝診斷中的價(jià)值，本研究將90例疑似乙肝患者平均分為兩組，分別采用酶聯(lián)免疫法、化學(xué)發(fā)光法進(jìn)行乙肝病毒血清學(xué)檢驗(yàn)，分析如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

本次的研究對(duì)象為2016年7月～2017年12月于我院接受診斷檢查的乙型肝炎疑似患者90例，根據(jù)乙肝病毒血清學(xué)檢驗(yàn)方法的不同將研究對(duì)象分為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組，各45例。其中，實(shí)驗(yàn)組男25例，女20例；年齡19～62歲，平均（35.4±3.1）歲；對(duì)照組女22例，男23例；年齡20～61歲，平均（35.2±3.3）歲。將兩組患者的一般資料運(yùn)用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行對(duì)比分析，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 方法

為保證檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，要求患者在檢驗(yàn)的前一天晚上8點(diǎn)后禁止進(jìn)食。乙肝病毒血清學(xué)檢驗(yàn)當(dāng)日清晨，取5mL患者的空腹靜脈血，并進(jìn)行血清分離，血樣品的離心頻率為每分鐘3000轉(zhuǎn)，共離心10min。

待血清分離完畢后，給予對(duì)照組采用酶聯(lián)免疫法進(jìn)行血清學(xué)檢測(cè)，方法具體如下：按照酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒（上?？迫A生物工程股份有限公司）的詳細(xì)說(shuō)明書(shū)進(jìn)行仔細(xì)操作，將試劑盒置于室溫中30min，設(shè)置陽(yáng)性、陰性以及空白對(duì)照孔，分別按照各試劑操作，將相應(yīng)量的標(biāo)準(zhǔn)液注入陰性和陽(yáng)性對(duì)照孔中，之后再按要求分別加注相應(yīng)量的特異酶（其中乙肝表面抗原加樣后應(yīng)先在37℃的水浴箱中孵育60 min后再加入相應(yīng)量的特異酶），隨后進(jìn)行混勻以及封膜操作。將樣本放置于37℃的水浴箱中孵育30 min，注意避免光照。洗板，顯色后，加入終止液。對(duì)血清中的HBsAg、HBsAb、HBeAg、抗HBeAb以及抗HBcAb 5項(xiàng)指標(biāo)進(jìn)行酶標(biāo)儀比色，記錄結(jié)果。

實(shí)驗(yàn)組采用化學(xué)發(fā)光法進(jìn)行檢驗(yàn)，方法：使用羅氏Cobas e411全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀，試劑為產(chǎn)自德國(guó)羅氏診斷有限公司的配套試劑。按照操作說(shuō)明放置配套的吸頭、反應(yīng)杯、洗液等，檢測(cè)5項(xiàng)乙型肝炎指標(biāo)。

1.3 觀察指標(biāo)與判定標(biāo)準(zhǔn)

觀察兩組患者的乙肝病毒陽(yáng)性檢出率，陽(yáng)性檢出判定標(biāo)準(zhǔn)：所得測(cè)量值小于參考值，則判斷為陰性，若測(cè)量值大于參考值，則可判斷為陽(yáng)性。各項(xiàng)檢查指標(biāo)的參考值：（1）HBsAg（乙肝表面抗原），0～ 0.05IU/mL；（2）HBsAb（乙 肝 表 面 抗 體），0～10.00mIU/mL；（3）HBeAg（乙肝e抗原），S/CO：＜1；（4）HBeAb（乙肝 e抗體），S/CO：＞1；（5）HBcAb（乙肝核心抗體），S/CO：＞ 1[5]。用兩種方法對(duì)不同濃度下患者血清中的乙肝表面抗原進(jìn)行測(cè)定，進(jìn)而對(duì)比兩種檢測(cè)方法在乙肝表面抗原中的檢測(cè)靈敏度。對(duì)兩組結(jié)果進(jìn)行分析，當(dāng)HBeAg≥1.0 S/CO為陽(yáng)性，HBsAg濃度＞0.05IU/mL為陽(yáng)性，HBsAb濃度＞10.00mIU/mL為陽(yáng)性，HBcAb＜1.0 S/CO為陽(yáng)性，HBeAb＜1.0S/CO時(shí)為陽(yáng)性[6]。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS20.0版對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料以（±s）表示，采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料以百分?jǐn)?shù)（%）表示，采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者檢測(cè)靈敏度比較

在濃度為 1.5、3.0、9.0、12.0ng/mL 時(shí)，實(shí)驗(yàn)組檢測(cè)血清乙肝表面抗原的靈敏度分別為22.22%、28.89%、35.56%、55.56%，而對(duì)照組分別為6.67%，11.11%、15.56%、26.67%，實(shí)驗(yàn)組在不同濃度下對(duì)血清乙肝表面抗原的檢測(cè)靈敏度均明顯高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見(jiàn)表1。

表1 不同濃度下兩組患者的檢測(cè)靈敏度比較[n（%）]

2.2 兩組患者陽(yáng)性檢出率比較

實(shí)驗(yàn)組的陽(yáng)性檢出率為84.44%，對(duì)照組為62.22%，兩組數(shù)據(jù)相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見(jiàn)表2。

表2 兩組患者的陽(yáng)性檢出率比較

表3 兩組患者的乙肝病毒血清定性和定量檢測(cè)結(jié)果比較[n（%）]

2.3 兩組患者乙肝病毒血清定性和定量檢測(cè)結(jié)果比較

實(shí)驗(yàn)組的血清檢測(cè)數(shù)據(jù)均顯著高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見(jiàn)表3。

3 討論

乙肝為傳染性疾病，可發(fā)展為肝硬化和肝癌，對(duì)患者的危害性極大，早期檢測(cè)和診斷對(duì)臨床的預(yù)防和療效具有重要意義。HBsAg（乙肝表面抗原）為乙肝病毒中不存在傳染性的外殼蛋白，但該蛋白的出現(xiàn)通常是因?yàn)橐腋尾《镜某霈F(xiàn)，因而乙肝表面抗原成為機(jī)體已經(jīng)感染乙肝病毒的一個(gè)標(biāo)志[7]。被乙肝感染的患者的血液、鼻咽分泌物、生殖器官分泌物中隨處可見(jiàn)HBsAg。在機(jī)體感染病毒后2～6個(gè)月，可在患者的血清中檢出陽(yáng)性。大部分急性乙肝患者的HBsAg可在疾病早期由陽(yáng)性轉(zhuǎn)為陰性，而慢性乙肝患者則繼續(xù)呈陽(yáng)性。HBsAb（乙肝表面抗體）是一種保護(hù)性抗體，在機(jī)體感染乙肝病毒后，機(jī)體對(duì)HBsAg蛋白產(chǎn)生的一種免疫反應(yīng)性抗體[8]。HBsAb通常在機(jī)體初次感染乙型肝炎病毒后的6 ～ 23周內(nèi)出現(xiàn)，并且持續(xù)出現(xiàn)的時(shí)間可長(zhǎng)達(dá)數(shù)年，當(dāng)HBsAb呈陽(yáng)性時(shí)則表明機(jī)體已經(jīng)獲得免疫。

在機(jī)體感染乙型肝炎病毒后，大多數(shù)受檢者的血清中均可以檢測(cè)出HBcAb（乙肝核心抗體），因此HBcAb成為具有較高的敏感性的血清學(xué)標(biāo)志。此外，HBcAb屬于急性乙肝病毒感染的早期標(biāo)志，在患者的血清中可長(zhǎng)時(shí)間存在，且部分患者的滴度相當(dāng)高，在HBsAg呈陰性時(shí)，可以從受檢者的血清中檢出HBcAb，因此乙肝核心抗體滴度高也是機(jī)體感染乙肝病毒的一種標(biāo)志[9]。HBeAb（乙肝e抗體）是乙肝病毒感染后機(jī)體出現(xiàn)的抗體，屬于機(jī)體感染乙肝病毒的又一種標(biāo)志性物質(zhì)。HBeAb不屬于保護(hù)性抗體，HBeAb的出現(xiàn)通常意味著機(jī)體中的乙肝病毒的復(fù)制數(shù)量已經(jīng)明顯減少或者趨于停止。在HBeAb呈陽(yáng)性的患者中，若HBV-DNA的檢測(cè)結(jié)果呈陰性，則表明機(jī)體內(nèi)的乙肝病毒復(fù)制正在減少，傳染性較弱；但若HBV-DNA的檢驗(yàn)結(jié)果顯示是陽(yáng)性，則表明患者體中的病毒正在大量復(fù)制，這些不斷復(fù)制的病毒可能由病毒變異所致，因此需要接受抗病毒治療[10]。當(dāng)前對(duì)乙肝標(biāo)志物進(jìn)行檢測(cè)的主要方法有酶聯(lián)免疫法和化學(xué)發(fā)光法。但酶聯(lián)免疫法因操作簡(jiǎn)單且價(jià)格相對(duì)低廉，常被用于大批量標(biāo)本的檢測(cè)中，但其容易受到各種因素的影響從而導(dǎo)致操作時(shí)發(fā)生污染，檢測(cè)的準(zhǔn)確率和靈敏度較低[11-12]。在乙肝病毒的化學(xué)發(fā)光法檢驗(yàn)中，全自動(dòng)儀器和配套試劑的使用使得檢測(cè)更加自動(dòng)化和標(biāo)準(zhǔn)化。該檢驗(yàn)方法的靈敏度明顯較高，可減少操作和檢測(cè)誤差，分析較準(zhǔn)確，降低假陰性的可能性，從而提高檢測(cè)的準(zhǔn)確性[13]。此外，該檢驗(yàn)方法還具有消耗量少、穩(wěn)定性大的優(yōu)點(diǎn)，因而成為當(dāng)前臨床上較為先進(jìn)的血清學(xué)檢測(cè)系統(tǒng)[14]。本次研究分別給予實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組采用化學(xué)發(fā)光法和酶聯(lián)免疫法進(jìn)行乙肝病毒檢驗(yàn)，經(jīng)研究，發(fā)現(xiàn)在采用化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)的實(shí)驗(yàn)組中陽(yáng)性乙肝患者的檢出例數(shù)為38例，陽(yáng)性檢出率為84.44%（38/45），明顯高于采用酶聯(lián)免疫法檢測(cè)對(duì)照組的陽(yáng)性檢出率62.22%（28/45），兩組對(duì)比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），由此可見(jiàn)化學(xué)發(fā)光法對(duì)乙肝病毒的陽(yáng)性檢出率較高。不同濃度條件下實(shí)驗(yàn)組血清乙肝表面抗原的靈敏度（分別為 22.22%、28.89%、35.56%、55.56%）均顯著高于對(duì)照組的靈敏度（分別為6.67%、11.11%、15.56%、26.67%），此外，和對(duì)照組相比，實(shí)驗(yàn)組的血清檢測(cè)結(jié)果數(shù)據(jù)均較高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。本次研究與李蘭英[15]的研究結(jié)果具有相似之處，可見(jiàn)酶聯(lián)免疫法的陽(yáng)性檢測(cè)率和血清乙肝表面抗原的靈敏度均明顯低于化學(xué)發(fā)光法。

綜上所述，在乙肝病毒血清學(xué)檢驗(yàn)中化學(xué)發(fā)光法的優(yōu)越性更高，檢測(cè)血清乙肝表面抗原的靈敏度以及乙肝病毒的陽(yáng)性檢出率均較高，檢測(cè)較為精確，可提高診斷的準(zhǔn)確性，為臨床控制乙肝病毒的傳播提供有利的參考價(jià)值。