孫國(guó)生 于勝波 姜文斌 孫靜嫻 丁帥文 馬國(guó)軍 鄭 楠# 隋鴻錦△

(1 沈陽(yáng)體育學(xué)院實(shí)驗(yàn)室管理中心， 沈陽(yáng) 110102； 2 大連醫(yī)科大學(xué)解剖學(xué)教研室, 大連 116044； 3 大連海洋大學(xué)水產(chǎn)與生命學(xué)院, 大連 116023； 4 大連理工大學(xué)工程力學(xué)系, 大連 116024)

人枕下區(qū)包含寰枕及寰樞兩個(gè)間隙及由淺入深的枕下肌及硬脊膜。Pernkopf和Fick等[1-3]認(rèn)為封閉寰枕間隙的寰枕后膜與封閉其他間隙的黃韌帶組織學(xué)性質(zhì)不同,甚至有時(shí)會(huì)缺如。1995年,Hack等[4]詳細(xì)描述了寰枕間隙的纖維穿行情況,并首次提出了肌硬膜橋的概念。他發(fā)現(xiàn)頭后小直肌、寰枕后膜、硬脊膜3者通過(guò)纖維緊密地連接在一起。肌硬膜橋中的“肌”即頭后小直肌,“膜”為硬脊膜,“橋”即為存在于肌與膜之間的纖維樣的致密連接結(jié)構(gòu)。寰枕后膜的結(jié)構(gòu)特殊性為枕下肌穿行其內(nèi)形成。隨后的研究顯示[5-14],肌硬膜橋不僅僅存在于寰枕間隙的頭后小直肌與硬脊膜之間。枕下其他結(jié)構(gòu)包括頭后大直肌、頭下斜肌,甚至由淺入深的項(xiàng)韌帶也有部分纖維穿過(guò)寰枕及寰樞間隙,與硬脊膜相連。研究顯示[15-17]肌硬膜橋這一結(jié)構(gòu)也存在于在動(dòng)物體內(nèi),肌硬膜橋這一結(jié)構(gòu)的普遍存在間接證明了其應(yīng)該具有重要的生理功能。目前對(duì)于肌硬膜橋與寰枕后膜及硬脊膜連接形式的研究還局限于大體和組織學(xué)研究層面,本研究利用電子掃描顯微鏡觀察人寰枕及寰樞間隙的肌硬膜橋纖維與寰枕后膜及硬脊膜的連接,分析其連接形式,補(bǔ)充肌硬膜橋連接形式微觀研究的空白。

1 材料和方法

1.1 取材

人頭頸部標(biāo)本4例,于項(xiàng)部正中逐層切開(kāi),暴露枕下三角。從枕骨附著點(diǎn)將頭后大直肌、頭后小直肌游離。于枕骨大孔下緣切開(kāi)寰枕后膜,進(jìn)入椎管,沿枕骨大孔下緣、樞椎下緣及兩側(cè)離斷枕下肌及硬脊膜,取頭后大直肌、頭后小直肌、頭下斜肌,寰椎后弓,樞椎椎弓板后部,寰枕后膜,硬脊膜及其連接。于游離組織塊中,分別取右側(cè)寰枕間隙及寰樞間隙的肌,肌硬膜橋及其連接,生理鹽水沖洗,置于2.5%戊二醛固定液。

1.2 固定

2.5%戊二醛固定2h以上。

1.3 脫水

50%、70%、80%、90%的叔丁醇上行梯度脫水,每級(jí)10～15min。100%叔丁醇脫水3次,每次10min。

1.4 干燥

將樣品置于純叔丁醇中,于冰盒中待叔丁醇結(jié)晶后,用真空抽濾瓶抽真空,使結(jié)晶狀態(tài)的叔丁醇升華,樣品被真空干燥。

1.5 噴金

樣品黏臺(tái),置于離子濺射儀(ION SPUTTER JFC-1100)中噴金。

1.6 觀察

掃描電鏡觀察(FEI QUANTA 200,荷蘭FEI公司)。記錄并拍攝寰枕間隙頭后小直肌與寰枕后膜,寰枕后膜與硬脊膜之間；寰樞間隙頭后大直肌、頭下斜肌與硬脊膜之間的纖維連接。分析肌硬膜橋與寰枕后膜及硬脊膜的纖維連接形式。

2 結(jié)果

2.1 硬脊膜形態(tài)

在低倍鏡下,硬脊膜表面并不光滑,存在褶皺(圖1A)。高倍鏡下可見(jiàn)硬脊膜主要由膠原纖維構(gòu)成。粗大的膠原纖維沿硬脊膜長(zhǎng)軸走行,整齊且排列緊密。各膠原纖維束粗細(xì)不等,構(gòu)成眾多索狀隆起(圖1B)。

2.2 寰枕后膜形態(tài)

可見(jiàn)寰枕后膜斷面成層狀,每層厚度約為23μm。層與層之間存在間隙,間隙間有網(wǎng)狀纖維相連(圖2)。

2.3 寰枕間隙肌硬膜橋

頭后小直肌與寰枕后膜及硬脊膜的連接寰枕間隙內(nèi),寰枕后膜位于頭后小直肌與硬脊膜之間。寰枕后膜結(jié)構(gòu)較疏松,內(nèi)有血管分布。來(lái)自頭后小直肌下端的纖維向腹側(cè)融入寰枕后膜,在寰枕后膜內(nèi)此纖維索分成數(shù)條,向腹側(cè)及尾側(cè)于寰枕后膜內(nèi)部走行(圖3,圖4A)。

硬脊膜斷面顯示其結(jié)構(gòu)致密,厚度約為1.5～2.0mm。寰枕后膜尾側(cè)有數(shù)條索狀,直徑約50～100μm的致密纖維結(jié)締組織穿行其間,為頭后小直肌肌硬膜橋纖維(圖4)。此數(shù)條纖維結(jié)締組織索走向一致,向腹尾側(cè)斜行,逐漸匯入硬脊膜,形成硬脊膜背面淺層纖維。

2.4 寰樞間隙肌硬膜橋

寰樞間隙內(nèi),來(lái)自頭后大直肌及下斜肌的肌硬膜橋纖維融合,形成條帶狀肌硬膜橋,由背向腹,斜行走行,逐漸靠近硬脊膜,并匯入硬脊膜(圖5A)。寰樞間隙肌硬膜橋呈條帶狀,與硬脊膜連接范圍廣(圖5B)。在此過(guò)程中,肌硬膜橋還向腹側(cè)發(fā)出數(shù)條粗大纖維,縱行,近乎垂直,穿入硬脊膜,并與硬脊膜交織融合(圖5C)。寰樞間隙內(nèi),肌硬膜橋纖維與硬脊膜的連接形式多樣。

2.5 肌硬膜橋形態(tài)

肌硬膜橋纖維由多束平行排列、走向一致的膠原纖維束組成。膠原纖維束間有眾多網(wǎng)狀纖維相連。單個(gè)膠原纖維直徑5～20μm不等(圖6)。

3 討論

以人為代表的哺乳動(dòng)物及爬行綱、鳥(niǎo)綱的枕下區(qū)(枕后區(qū))的解剖學(xué)、組織學(xué)等研究,已經(jīng)證實(shí)在寰枕及寰樞間隙、枕下肌與硬脊膜之間存在著肌硬膜橋樣的纖維連接結(jié)構(gòu)[1-17]。肌硬膜橋這一結(jié)構(gòu)存在的普遍性也間接證明了其功能的重要性。目前有關(guān)肌硬膜橋功能的研究還處于推測(cè)階段,包括防止硬脊膜打折,傳遞本體感覺(jué),保持姿勢(shì),保持蛛網(wǎng)膜下隙及小腦延髓池的通暢,肌硬膜橋病變可能誘發(fā)頸源性頭痛,參與影響腦脊液循環(huán)等[2,4,18-22]。肌硬膜橋兩端的連接點(diǎn)、肌端和硬脊膜端是否均發(fā)生了直接的連接,是目前推測(cè)其幾大重要功能的強(qiáng)有力的形態(tài)支持。本研究結(jié)果顯示,寰枕間隙內(nèi),來(lái)自頭后小直肌下端的纖維向腹側(cè)融入寰枕后膜,在寰枕后膜內(nèi)此纖維索分成數(shù)條,向腹側(cè)及尾側(cè)于寰枕后膜內(nèi)部走行,并逐漸匯入硬脊膜,形成硬脊膜背面淺層纖維。寰樞間隙內(nèi),來(lái)自頭后大直肌和頭下斜肌的纖維融合,形成條帶狀,由背側(cè)向腹側(cè),逐漸靠近硬脊膜,并在此過(guò)程中與硬脊膜發(fā)生廣泛連接。同時(shí)此部分條帶狀纖維還在走行過(guò)程中,發(fā)出垂直的直接穿入硬脊膜的纖維。寰樞間隙內(nèi),肌硬膜橋纖維與硬脊膜的連接形式多樣。于寰枕及寰樞間隙、肌硬膜橋兩連接端、肌端及硬脊膜端均存在明顯的直接連接,肌硬膜橋纖維融入硬脊膜,并成為硬脊膜一部分。在枕下肌群收縮或舒張過(guò)程中,可實(shí)現(xiàn)有效的傳遞張力和牽拉硬脊膜的作用。

人枕下區(qū)肌硬膜橋及其連接形式的掃描電鏡觀察結(jié)果,揭示了寰枕及寰樞間隙、肌硬膜橋兩連接端、肌端及硬脊膜端均存在明顯的直接連接。該研究結(jié)果為肌硬膜橋的功能推測(cè)提供了強(qiáng)有力的形態(tài)支持。

圖1 硬脊膜背側(cè)面形態(tài)。A： ×400； B： A 圖的放大圖,×2400；▲： 膠原纖維；↑： 膠原纖維束；SDM： 硬脊膜。

圖2 寰枕后膜形態(tài)。A： ×1200；↑： 硬脊膜斷面；B： A圖白色框內(nèi)的放大,×5000；☆： 硬脊膜層與層之間的空隙.

圖3 寰枕間隙內(nèi)頭后小直肌和寰枕后膜的連接。A： 寰枕間隙結(jié)構(gòu)矢狀切面；B： A圖白色框內(nèi)的放大；↑： 頭后小直肌與寰枕后膜之間的纖維連接；RCPmi： 頭后小直肌；PAOM： 寰枕后膜；MDB： 頭后小直肌肌硬膜橋.

圖4 寰枕間隙內(nèi)寰枕后膜與硬脊膜的連接。A： 寰枕間隙結(jié)構(gòu)矢狀切面；B,C： A圖白色框內(nèi)的放大；↑： 寰枕后膜內(nèi)匯入硬脊膜(…)的纖維束；PAOM： 寰枕后膜；SDM： 硬脊膜.

圖5 寰樞間隙頭后大直肌、頭下斜肌和硬脊膜的連接。A： 頭后大直肌及下斜肌的肌硬膜橋纖維融合,匯入硬脊膜；B： A圖白色框內(nèi)的放大；C： 肌硬膜橋向腹側(cè)發(fā)出數(shù)條粗大纖維(↑),近乎垂直穿入硬脊膜；PAOM： 寰枕后膜；SDM： 硬脊膜.

圖6 肌硬膜橋的形態(tài)。A,B： ×5000，肌硬膜橋纖維,膠原纖維束間有眾多網(wǎng)狀纖維(↑)相連.

Fig 1 Morphology of dorsal surface of spinal dura mater. A： ×400； B： Enlargement of figure A, ×2400, ▲： Collagen fiber; ↑： Bundle of collagen fibers; SDM： Spinal dura mater.

Fig 2 Morphology of posterior atlanto-occipital membrane. A： ×1200； ↑： Sagittal section of spinal dura mater； B： Enlargement of figure A, ×5000; ☆： Space between each layer of spinal dura mater.

Fig 3 Connection tissue between rectus capitis posterior minor and posterior atlanto-occipital membrane in atlanto-occipital intersapce. A： Sagittal section of structures in atlanto-occipital interspace; B： Enlargement of figure A; ↑： connection tissue between rectus capitis posterior minor and posterior atlanto-occipital membrane; RCPmi： Rectus capitis posterior minor; PAOM： Posterior atlanto-occipital membrane; MDB： Myodural bridge of RCPmi.

Fig 4 Connective tissue between posterior atlanto-occipital membrane and spinal dura mater in atlanto-occipital interspace. A： Sagittal section of structures in atlanto-occipital interspace; B,C： Enlargement of figure A；↑： Bundles of fiber fused with spinal dura mater from posterior atlanto-occipital membrane (…); PAOM： Posterior atlanto-occipital membrane; SDM： Spinal dura mater.

Fig 5 Connective tissue between rectus capitis posterior major, obliquus capitis inferior muscle and spinal dura mater in atlanto-axial interspace. A： Myodural bridge fibers from RCPma and OCI fused and connected with spinal dural mater; B： Enlargement of figure A; C： Lots of myodural bridge fibers (↑) ran ventrally and penetrated into spinal dura mater vertically; PAOM： Posterior atlanto-occipital membrane; SDM： Spinal dura mater.

Fig 6 Morphology of myodural bridge. A,B： ×5000， myodural bridge fibers. There were many reticular fibers (→) connected between the myodural bridge fibers.