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喀什地區(qū)食品藥品檢驗所，新疆 喀什 844000

西帕依麥孜彼子口服液，收載于《中華人民共和國衛(wèi)生部藥品標準》(維吾爾藥分冊)，標準編號:WS3-BW-0122-98，具有增強機體營養(yǎng)力、攝住力及排泄力，清濁利尿的功效[1]。用于前列腺炎和前列腺增生所致小便頻數、余瀝不盡、腰膝酸軟、頭暈目眩、寐差耳鳴、早泄夢遺等。西帕依麥孜彼子口服液為傳統維藥合劑，現行質量標準過于落后，僅有鑒別項和檢查項，未確定主要成分含量測定指標，難以保證制劑質量的均一、穩(wěn)定。本研究參照相關文獻[2-6]，首次采用高效液相色譜法[7-11](HPLC法)，對西帕依麥孜彼子口服液中梔子苷的含量進行了測定，為維藥西帕依麥孜彼子口服液的質量標準研究奠定基礎。

1 儀器與試藥

島津LC-2030C 3D高效液相色譜儀(島津公司)；Sepax HP-C18(250mm×4.6mm，5μm；填料：十八烷基硅烷鍵合硅膠)。

西帕依麥孜彼子口服液，規(guī)格：10 mL，批號：170328、160838、160439，由新疆齊康哈博維藥股份有限公司生產。對照品梔子苷(批號110749-201316，含量97.5%，中國食品藥品檢定研究院)，乙腈為色譜純，供貨商：賽默飛世爾科技(中國)有限公司，水為超純化水，其它試劑均為分析純。

2 方法與結果

2.1 色譜條件 色譜柱：Sepax HP-C18；流動相：乙腈-0.1%磷酸(14∶86)；流速：1 mL·min-1檢測波長：238 nm；柱溫：30 ℃；進樣量：10 μL。

2.2 溶液制備

2.2.1 對照品儲備液：精密稱取梔子苷對照品11.32 mg，置100 mL量瓶中，加甲醇適量，超聲至充分溶解，放冷，加甲醇至刻度，搖勻，制成含梔子苷0.1132 mg·mL-1)的對照品儲備液。

2.2.2 對照品溶液：精密量取梔子苷對照品儲備液2 mL，置10 mL量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，得梔子苷的質量濃度為22.64 μg/mL的對照品溶液。

2.2.3 供試品溶液：精密量取西帕依麥孜彼子口服液0.5 mL，置25 mL量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，經0.45 μm微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液，即得。

2.2.4 空白溶液：取制備供試品溶液的溶劑，同供試品溶液步驟方法制備，即得。

2.3 方法學考察 專屬性實驗：精密吸取2.2項下的空白溶液、對照品溶液、供試品溶液各10μL，按上述色譜條件測定，記錄HPLC圖譜如圖1所示。

線性關系考察：分別精密量取2.2.1項下梔子苷對照品儲備液各1.0、2.0、5.0、10.0、25.0 mL，分別置50 mL量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，制得梔子苷濃度分別為2.26、4.53、11.32、22.64、56.60 μg/mL的系列標準曲線溶液。按擬定色譜條件進行測定，計算峰面積積分值。以梔子苷質量濃度(X，μg/mL)為橫坐標、峰面積積分值(Y)為縱坐標進行線性回歸，得回歸方程，梔子苷為Y=14199.00X-855.28，r=0.99999(n=5)。結果表明，梔子苷質量濃度在2.26～56.60 μg/mL范圍內與峰面積積分值線性關系良好。

精密度試驗：取2.2.2項下對照品溶液，按擬定色譜條件進行測定，連續(xù)進樣6次，記錄峰面積。結果梔子苷峰面積的RSD為0.11%(n=6)，表明儀器精密度良好。

穩(wěn)定性試驗：取2.2.3項下的同一供試品(批號為160838)溶液，置室溫下，分別于0、2、4、8、12、24 h按擬定色譜條件進行測定，記錄峰面積。結果梔子苷峰面積的RSD為1.14%(n=6)，表明供試品溶液在室溫下24 h內穩(wěn)定。

重復性試驗：取西帕依麥孜彼子口服液(批號為160838)，按供試品溶液制備項下的方法制備6份供試品溶液，按擬定色譜條件進行測定，記錄梔子苷峰面積。結果梔子苷峰面積的RSD為0.30%(n=6)，表明方法重復性良好。結果見表1。

加樣回收試驗：精密量取已知含量的西帕依麥孜彼子口服液(批號為160838)0.25 mL 9份，置25 mL量瓶中，分別加入濃度為113.20 μg/mL梔子苷對照品2、2.5、3 mL各三份，按供試品溶液制備方法制備9份待測溶液，按擬定色譜條件進行測定，記錄溶液中梔子苷峰面積，并計算加樣回收率。結果見表2。

表1 重復性試驗結果

表2 加樣回收試驗結果 (n=9)

2.4 樣品含量測定 用3批西帕依麥孜彼子口服液，按2.2.2項下的方法制備供試品溶液，按擬定色譜條件進行測定，記錄峰面積，并用梔子苷回歸方程計算含量。結果見表3。

表3 樣品含量測定結果

3 討論

本實驗選用不同比例的流動相系統，乙腈-0.1%磷酸(10∶90、12∶88、14∶86、15∶85、16∶84、18∶82、20∶80)。結果表明，流動相為乙腈-0.1%磷酸(14∶86)時柱效高，分離效果好。

實驗中比較了純水、30%甲醇、50%甲醇、70%甲醇、甲醇為提取溶媒，結果表明甲醇提取效率最高，因此選用甲醇作為提取溶劑。

西帕依麥孜彼子口服液臨床應用廣泛，但其質量標準落后，本研究根據制劑組成，選擇有效成分梔子苷作為測試指標，對西帕依麥孜彼子口服液的質量進行控制。本方法操作簡單，線性關系良好，穩(wěn)定性、重現性好，加樣回收率符合要求，為西帕依麥孜彼子口服液的質量控制提供了良好的依據。