楊莉，李丕軍，朱蓮，左建琴，周建華

(1.四川省林業(yè)科學(xué)研究院森林病蟲(chóng)害防治研究所，四川 成都 610081； 2.四川省林業(yè)科學(xué)研究院林木遺傳育種室，四川 成都 610081；3.資陽(yáng)市林業(yè)局，四川 資陽(yáng) 641300； 4.安岳縣石羊林業(yè)工作站，四川 安岳 642357)

核桃營(yíng)養(yǎng)豐富，含有大量不飽和脂肪酸、蛋白質(zhì)和多種微量元素，深得消費(fèi)者喜愛(ài)。截止2015年底,四川省核桃Juglansregia種植規(guī)模達(dá)82萬(wàn)hm2，居全國(guó)各省(直轄市、自治區(qū))第二位，核桃年產(chǎn)量40.8萬(wàn)t，居全國(guó)第三，核桃種植產(chǎn)業(yè)成為農(nóng)民脫貧致富的重要產(chǎn)業(yè)之一[1]。

核桃褐斑病造成核桃果實(shí)提前落果、爛果，嚴(yán)重阻礙了核桃產(chǎn)業(yè)的健康發(fā)展。在國(guó)外Belisario 等[2-4]分離鑒定鏈格孢菌Alternariaalternata是核桃褐色頂端壞死的病原之一，國(guó)內(nèi)曲文文 等[5-6]也報(bào)道了鏈格孢菌是核桃褐斑病的病原，而韓敏 等[7]鑒定了新疆地區(qū)核桃葉斑病病原菌為鏈格孢菌，楊莉 等[8]首次鑒定了四川省核桃褐斑病的病原菌是鏈格孢菌。目前，四川地區(qū)核桃褐斑病的防治研究還是空白。作者首次調(diào)查分析四川省核桃主要栽種品種對(duì)鏈格孢菌引起的核桃褐斑病的抗性，并且通過(guò)室內(nèi)和田間防治試驗(yàn)篩選防治褐斑病的化學(xué)藥劑，以期為核桃褐斑病害的有效防治提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

1.1.1 供試植物 在四川省廣元市朝天區(qū)面積3 000 hm2的核桃品種園，選擇目前四川地區(qū)種植的11個(gè)核桃主要品種：西扶2號(hào)、遼核1號(hào)、香玲、清香、中林5號(hào)、新疆核桃、魯光、碩星、夏早、川核1號(hào)、川核2號(hào)。核桃株行距4 m×5 m，樹(shù)齡10 a。

1.1.2 供試藥劑 50%異菌脲可濕性粉劑(WP)，江西禾益化工有限公司；80%多菌靈WP，江蘇蘇中農(nóng)藥化工廠；25%丙環(huán)唑乳油(EC)，青島金爾農(nóng)化研制開(kāi)發(fā)有限公司；25%咪酰胺EC，四川國(guó)光農(nóng)化股份有限公司；80%代森錳鋅WP，四川國(guó)光農(nóng)化股份有限公司。

1.2 抗病性調(diào)查方法 選擇在核桃褐斑病發(fā)病高峰期的7月中旬調(diào)查核桃不同品種抗病性。每個(gè)品種隨機(jī)調(diào)查10株，每株核桃樹(shù)隨機(jī)選擇3個(gè)大枝調(diào)查核桃果實(shí)，記錄發(fā)病的嚴(yán)重程度，并計(jì)算各品種的發(fā)病率、病情指數(shù)。

病情分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)[9]見(jiàn)表1，以發(fā)病最嚴(yán)重的中林核桃作為對(duì)照，計(jì)算各核桃品種的相對(duì)抗病指數(shù)。為了直觀看出各核桃品種的抗病性，根據(jù)表2將相對(duì)抗病指數(shù)轉(zhuǎn)換成抗病性。

病情指數(shù)=∑(各級(jí)發(fā)病數(shù)×級(jí)數(shù))/(調(diào)查總數(shù)×最高級(jí)數(shù)) ×100

發(fā)病率(%)=∑各級(jí)發(fā)病數(shù)/調(diào)查總數(shù)×100

相對(duì)抗病指數(shù)=(中林5號(hào)病情指數(shù)-某種(品種)病情指數(shù))×100/中林5號(hào)病情指數(shù)

表1 核桃褐斑病病情分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)

表2 核桃對(duì)褐斑病抗性分級(jí)

1.3 化學(xué)藥劑篩選方法

1.3.1 平皿抑菌試驗(yàn) 采用生長(zhǎng)速率測(cè)定法，測(cè)定5種化學(xué)藥劑對(duì)核桃褐斑病病原抑制能力。將5種藥劑分別配置成3種濃度梯度，80%多菌靈WP 1 000，1 500，2 000倍液，80%代森錳鋅WP 1 000，1 500，2 000倍液，25%咪酰胺EC 500，1 000，1 500倍液，50%異菌脲WP 600，1 200，1 800倍液，25%丙環(huán)唑EC 500，1 000，1 500倍液；配制好的藥劑吸取1 mL，加入49 mL滅菌且冷卻至45 ℃的PDA培養(yǎng)基中制成平板，不含藥劑的PDA平板為空白對(duì)照。將病原菌在PDA培養(yǎng)基上28 ℃下培養(yǎng)5 d后，用5 mm打孔器打孔，菌餅接種于含藥平板上，置于28 ℃恒溫培養(yǎng)，每個(gè)處理重復(fù)3次，5 d測(cè)定菌絲生長(zhǎng)速率，根據(jù)公式計(jì)算抑菌率，比較不同藥劑不同濃度對(duì)病原菌的毒力。

抑菌率(%)=(對(duì)照菌落直徑-處理菌落直徑)/對(duì)照菌落直徑×100

1.3.2 田間防治試驗(yàn) 將所選5種藥劑進(jìn)行復(fù)配。18種復(fù)配藥劑中，9種以25%咪酰胺EC 1 000倍液為基礎(chǔ)，9種以25丙環(huán)唑EC 1 000倍液為基礎(chǔ)(表5)。采用機(jī)器高壓噴霧施藥。不噴藥為對(duì)照。每種處理選擇50 hm2核桃果樹(shù)進(jìn)行噴施，果實(shí)成熟后統(tǒng)計(jì)防治區(qū)域和對(duì)照區(qū)域的病情指數(shù)，并計(jì)算防治率。

防治率(%)=(對(duì)照病情指數(shù)-處理病情指數(shù))/對(duì)照病情指數(shù)×100

1.3.3 數(shù)據(jù)處理分析 試驗(yàn)數(shù)據(jù)用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行單因素方差統(tǒng)計(jì)分析。運(yùn)用Duncan′s多重比較進(jìn)行差異顯著性分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 核桃不同品種對(duì)褐斑病的抗病性差異 調(diào)查的11個(gè)核桃品種中，感病最輕的是遼核1號(hào)和魯光，病情指數(shù)分別為8.53和3.67，相對(duì)抗病指數(shù)高達(dá)88.14和94.89，是高抗品種；清香核桃病情指數(shù)為19.15，是中抗核桃；而感病最嚴(yán)重的是中林5號(hào)和夏早核桃，病情指數(shù)分別高達(dá)71.94和56.00，屬于高感品種；香玲、新疆核桃、川核1號(hào)則是中感品種，而西扶2號(hào)、碩星、川核2號(hào)是低抗品種(表3)。

表3 核桃不同品種對(duì)褐斑病的抗病性

2.2 藥劑室內(nèi)抑菌作用 室內(nèi)平皿抑菌試驗(yàn)表明，試驗(yàn)所選5種藥劑對(duì)核桃褐斑病病原菌都有抑制作用。50%異菌脲WP效果最好，其600倍液對(duì)鏈格孢菌的抑菌率高達(dá)84.42%，但該藥劑不同濃度間抑菌效果差異并不顯著。其次是25%咪酰胺EC，500倍液抑菌率可達(dá)81.03%，不同濃度間抑菌效果差異顯著。80%多菌靈WP、80%代森錳鋅WP、25%丙環(huán)唑EC對(duì)鏈格孢菌的抑制效果不如50%異菌脲WP和25%咪酰胺EC(表4)。

2.3 田間防治試驗(yàn)效果 18種復(fù)配藥劑田間防治鏈格孢菌引起的核桃褐斑病均有防治效果(表5)。25%咪酰胺EC 1 000倍液+50%異菌脲WP 600倍液防治效果最好，其次是25%咪酰胺EC 1 000倍液+80%多菌靈WP 1 000倍液、25%咪酰胺EC 1 000倍液+80%代森錳鋅WP 1 000倍液和25%丙環(huán)唑EC 1 000倍液+80%多菌靈WP 1 000倍液。

表4 5種藥劑對(duì)核桃褐斑病菌平皿抑菌試驗(yàn)效果

注：采用Duncan′s多重比較。同列不同小寫字母表示不同處理間差異顯著 (P<0.05)，相同小寫字母表示不同處理間差異不顯著(P>0.05)。

表5 5種藥劑不同復(fù)配組合防治核桃褐斑病田間試驗(yàn)效果

注：表中A代表25%咪酰胺EC 1 000倍液，B代表25%丙環(huán)唑EC 1 000倍液。采用Duncan′s多重比較；同列不同小寫字母表示不同處理間差異顯著(P<0.05)，相同小寫字母表示不同處理間差異不顯著(P>0.05)。

3 結(jié)論與討論

核桃是四川省重要的經(jīng)濟(jì)林樹(shù)種，作者調(diào)查發(fā)現(xiàn)四川地區(qū)主要栽培的11個(gè)核桃品種對(duì)褐斑病的抗病性差異較大，在實(shí)際生產(chǎn)中應(yīng)該選擇對(duì)褐斑病高抗的遼核1號(hào)和魯光，避免選擇夏早、中林這類高感或其他低抗品種，這也是有效防治核桃褐斑病的重要途徑之一。

平皿抑菌試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)5種化學(xué)藥劑對(duì)褐斑病病原菌均有抑制作用，但50%異菌脲WP 600倍液抑菌效果明顯優(yōu)于其他4種藥劑。田間防治試驗(yàn)將所選5種藥劑進(jìn)行復(fù)配后噴施，結(jié)果表明，25%咪酰胺EC 1 000倍液+50%異菌脲WP 600倍液防效最好。室內(nèi)平皿抑菌試驗(yàn)和田間藥劑防治試驗(yàn)結(jié)果一致，說(shuō)明異菌脲對(duì)核桃褐斑病病原菌鏈格孢菌有較好的抑制作用。曲文文 等[10]對(duì)95%咪酰胺原藥、97%戊唑醇原藥、98%多菌靈原藥、95%異菌脲原藥4種殺菌劑對(duì)鏈格孢菌的防治做了研究，認(rèn)為咪酰胺、異菌脲對(duì)鏈格孢的防治效果最好，本研究結(jié)果與之吻合。黃雄 等[11]報(bào)道異菌脲對(duì)核桃炭疽病和黑斑病有一定的防治效果，但并未對(duì)鏈格孢菌引起的核桃病害進(jìn)行研究。此外，本研究所用藥劑濃度較高，但后續(xù)調(diào)查并未發(fā)現(xiàn)造成藥害，且經(jīng)過(guò)化學(xué)農(nóng)殘檢測(cè)，核桃果仁農(nóng)殘并未超過(guò)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)。

栽種抗性品種、噴施化學(xué)藥劑防治，對(duì)核桃褐斑病有一定的控制作用。但要達(dá)到防治核桃褐斑病的理想效果，還應(yīng)該根據(jù)果園實(shí)際情況，進(jìn)行綜合防治，比如合理調(diào)整果樹(shù)栽種的密度，果園秋收后嚴(yán)格修枝清園等。