易 忠 ，趙華林 ，林奕全 ，王運俅 ，杜 麗 ，儲岳峰 ，朱建明 *

（1.新疆畜牧科學院獸醫(yī)研究所，烏魯木齊 830000；2.三亞雪古麗現(xiàn)代生態(tài)農(nóng)業(yè)綜合開發(fā)有限公司，海南 三亞 572000 3.海南大學，?？?570000；4.中國農(nóng)業(yè)科學院蘭州獸醫(yī)研究所，蘭州 730046）

布魯氏桿菌?。╞rucellosis）由布魯氏菌屬(Brucella)細菌所致以侵害生殖系統(tǒng)為特征的人畜共患地方流行性傳染病，羊為主要傳染源，皮毛、肉類加工、擠奶等可經(jīng)皮膚黏膜受染，進食病畜肉、奶及奶制品可經(jīng)消化道傳染[1,2]。 口蹄疫（Foot-and-mouth disease，F(xiàn)MD）是由口蹄疫病毒（Foot-and-mouth disease virus，F(xiàn)MDV）引起的世界性重大動物疫病，嚴重制約著全球畜牧業(yè)的發(fā)展[3]。畜牧業(yè)是海南熱帶高效農(nóng)業(yè)的重要內(nèi)容之一，“無疫區(qū)”不僅是海南畜牧業(yè)發(fā)展的品牌，也是海南國際旅游島建設(shè)和公共衛(wèi)生安全的基礎(chǔ)性工程。近年來，在農(nóng)業(yè)部關(guān)于“促進草食畜牧業(yè)加快發(fā)展的指導意見”的引導下，海南農(nóng)民養(yǎng)牛的積極性不斷高漲。保證該產(chǎn)業(yè)健康發(fā)展不僅關(guān)系到畜產(chǎn)品的衛(wèi)生與安全，而且影響到全省旅游業(yè)的發(fā)展和國家“海南國際旅游島發(fā)展戰(zhàn)略”的順利實施。因此，持續(xù)性確保海南牛羊口蹄疫及布魯氏菌病無疫作用重大，意義深遠[4]。基于上述目標，我們對三亞雪古麗的牛羊及從云南引進的羊進行了口蹄疫及布魯氏菌病自我監(jiān)測與風險評估。

1 材料與方法

1.1 檢測樣品

2018年1月2日至31日采集三亞雪古麗奶牛場牛血液194份、OP液 21份；三亞雪古麗種羊場羊血液596份、OP液25份，昌江雪古麗羊場羊血液452份、OP液 25份，雪古麗引進云南羊血液190份、OP液7份，共計血液樣品1 432份、OP液78份(注：牛血液有8份未分離出血清）。

1.2 檢測方法及試劑盒

參照布魯氏菌病診斷技術(shù)規(guī)程用虎紅平板方法檢測羊布魯氏菌病[5]?；⒓t平板凝集試驗抗原（敏感型）、布魯氏菌試管凝集抗原及布魯氏菌陽性對照血清（羊種）購自英國OIE參考實驗室。

口蹄疫免疫抗體檢測使用液相阻斷ELISA方法，口蹄疫病原學檢測采用多重RT-PCR（Multi-RTPCR）方法，試劑盒均購自中國農(nóng)業(yè)科學院蘭州獸醫(yī)研究所。

2 結(jié)果與分析

2.1 三亞雪古麗羊血清樣品的布魯氏菌病檢測情況

2018年三亞雪古麗種羊場、昌江雪古麗羊場和雪古麗云南引進羊血清樣品共計1 238頭份使用虎紅平板方法用于布魯氏菌病監(jiān)測，檢測結(jié)果全部陰性（—）。結(jié)果表明雪古麗的羊場目前不存在布魯氏菌感染情況。

2.2 三亞雪古麗牛羊樣品口蹄疫檢測情況

為了持續(xù)監(jiān)測本單位所有牛羊口蹄疫免疫情況及攜帶或感染口蹄疫情況，對采集的牛羊樣品進行了口蹄疫免疫抗體及病原學檢測，具體如下表1。

表1 牛羊樣品口蹄疫檢測情況

2.3 牛羊A、O型口蹄疫抗體免疫抗體檢測結(jié)果

采集樣品的口蹄疫A型 和O型免疫抗體檢測結(jié)果見表2、表3。

表2 牛口蹄疫A型免疫抗體檢測結(jié)果

從表2及表3表中可見，雪古麗的牛口蹄疫群體免疫水平（牛O型 ）達到國家重大動物疫病規(guī)定的免疫合格率（70%）的標準，O型抗體免疫合格率72%；A型抗體免疫合格率47.4%，羊O型免疫合格率53.55%，免疫水平未達到農(nóng)業(yè)部規(guī)定的免疫合格率的標準。

表3 牛羊口蹄疫O型免疫抗體檢測結(jié)果

2.4 口蹄疫病原學樣品監(jiān)測結(jié)果

隨機抽取牛羊OP液樣品使用多重RT-PCR進行口蹄疫病原學檢測，結(jié)果顯示無病原學陽性樣品，樣品RT-PCR結(jié)果見圖1、圖2、圖3和圖4。

圖1 三亞雪古麗牛場樣品口蹄疫病原學檢測RT-PCR結(jié)果

圖2 三亞雪古麗羊場樣品口蹄疫病原學檢測RT-PCR結(jié)果

圖3 昌江雪古麗樣品口蹄疫病原學檢測RT-PCR結(jié)果

圖4 引進羊（云南）樣品口蹄疫病原學檢測RT-PCR結(jié)果

隨機抽取樣品的口蹄疫病原學檢測結(jié)果表明，目前雪古麗的牛羊及引進羊只未被口蹄疫病毒感染。

3 討 論

口蹄疫是國家強制免疫的重大動物疫病，海南是口蹄疫無疫區(qū)，持續(xù)性確保海南牛羊口蹄疫無疫作用重大，意義深遠[3,6]。

布魯氏菌病在我國主要流行羊種，從臨床看，羊種的致病力最強，感染后癥狀較重，可引起暴發(fā)流行；布魯菌在自然環(huán)境中生命力較強，故可通過多種途徑傳播[7]。在病畜的分泌物、排泄物及在畜的臟器中傳染源存在[8]。檢出的病畜，及時隔離治療，必要時宰殺之，對受威脅動物重要措施是進行菌苗免疫。病畜的流產(chǎn)物及死畜必需深埋。防止病畜或患者的排泄物污染水源。對與牲畜或畜產(chǎn)品接觸密切者，要進行宣傳教育，做好個人防護。

2017年海南三亞雪古麗曾進行過口蹄疫病原及免疫抗體的自我監(jiān)測與風險評估，檢測結(jié)果顯示本場牛O型免疫抗體合格率剛剛達到農(nóng)業(yè)部規(guī)定的免疫合格率（70%）的標準，而羊的群體免疫狀況較差，免疫抗體合格率遠低于農(nóng)業(yè)部規(guī)定的標準[9]。

2018年采集的海南雪古麗牛羊血清樣品及OP液樣品，再次用于羊布魯氏菌、口蹄疫病原及免疫抗體的自我監(jiān)測與風險評估?；⒓t平板檢測布魯氏菌病，結(jié)果表明雪古麗的羊場目前不存在布魯氏菌感染情況，但應(yīng)每年進行一次監(jiān)測，確保牛羊始終處于布魯氏菌病凈化狀態(tài)[10]。本次監(jiān)測中雪古麗的牛羊中僅牛O型口蹄疫群體免疫水平達到國家重大動物疫病規(guī)定的免疫合格率（70%）的標準，即O型抗體免疫合格的有126頭份，合格率72%；A型抗體免疫合格的有83頭份，合格率47.4%；檢測中羊O型抗體免疫合格的有663頭份，免疫合格率53.55%。

為確保雪古麗牛羊持續(xù)無疫，免疫抗體不合格動物應(yīng)及時給予補免。同時，加強免疫持續(xù)監(jiān)測，引種時要做好隔離觀察及檢測。