李委潞，謝 博，蘇鴻雁，梅開忠

(天津梅花醫(yī)藥有限公司 天津 300384)

藥品制劑選擇合適的內(nèi)包材需要進行藥品與包裝材料的相容性研究。不同給藥途徑制劑與包裝系統(tǒng)發(fā)生相互作用的風險級別不同，其中，注射液和注射用混懸液的風險級別最高[1]，因其直接進入人體血液循環(huán)系統(tǒng)，所以安全性更需要關(guān)注。而注射劑除了直接接觸內(nèi)包材，在使用過程中，往往還需直接接觸輸液器或注射器等醫(yī)療器械，故對注射劑與輸液系統(tǒng)的相容性、二者之間的相互作用也應(yīng)重點考察。輸液系統(tǒng)的構(gòu)造復雜，組件較多，不同組件的添加劑種類也多，有文獻指出聚丙烯聚乙烯等包裝材料中有抗氧劑遷出[2]。本文對輸液系統(tǒng)中可能存在的5種抗氧劑在注射液中遷移量測定的方法學進行研究。

1 實驗條件

1.1 儀器與試藥

儀器：島津 LC2030高效液相色譜儀，色譜柱為Thermo C18，5,μm，4.6,mm×250,mm。

試藥：抗氧劑 BHT(批號 101927788，純度 99.0，阿拉丁)、抗氧劑 1010(批號 1002331683，純度 99.0，阿拉丁)、抗氧劑 1076(批號 1002324221，純度 99.0，阿拉丁)、抗氧劑 330(批號 1002507252，純度 99.0，阿拉丁)、抗氧劑 168(批號 1002384913，純度 99.0，阿拉丁)，乙腈、四氫呋喃均為色譜純。

樣品：一次性使用輸液器(帶針)(山東威高集團醫(yī)用高分子制品股份有限公司，批號 20171021)，10%,葡萄糖注射液 250,mL(山東齊都藥業(yè)有限公司，批號11B1708039)。

1.2 色譜條件

色譜柱：Thermo C18(5,μm，4.6,mm×250,mm，S/N：10504426)。流動相：乙腈-四氫呋喃-水(58∶30∶12)。柱溫：40,℃。檢測波長：274,nm。進樣量：20,μL。

1.3 對照儲備液的配制

分別取抗氧劑 1010、抗氧劑 1076、抗氧劑 330、抗氧劑 168、抗氧劑 BHT的對照品 60,mg，精密稱定，置于同一個 50,mL容量瓶中，加四氫呋喃-乙腈(體積比＝1∶1)溶解并稀釋至刻度，搖勻，配成濃度約為1.2,mg/mL的溶液，作為儲備液1。

分別取抗氧劑 1010、抗氧劑 1076、抗氧劑 330、抗氧劑 168、抗氧劑 BHT的對照品 75,mg，精密稱定，置于同一個 50,mL容量瓶中，加四氫呋喃-乙腈(體積比＝1∶1)[3]溶解并稀釋至刻度，再精密量取1,mL置于 50,mL容量瓶中，加四氫呋喃-乙腈(體積比＝1∶1)稀釋至刻度，搖勻，配成濃度約為30,μg/mL的溶液，作為儲備液2。

2 方法與結(jié)果

2.1 線性試驗

精密量取儲備液 1適量，加四氫呋喃-乙腈(體積比＝1∶1)稀釋，分別制得濃度為 0.3、1.2、6、12、24、60、120、240、300,μg/mL 的對照溶液，精密量取各20,μL，按 1.2項下色譜條件分別進樣，記錄色譜圖。以峰面積(A)對濃度(C，μg/mL)進行線性回歸，得抗氧劑1010、抗氧劑1076、抗氧劑330、抗氧劑168、抗氧劑 BHT的回歸方程和相關(guān)系數(shù)，結(jié)果(見表1)表明：抗氧劑 1010、抗氧劑 1076、抗氧劑 330、抗氧劑168、抗氧劑BHT分別在表中所示濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。圖1為對照品色譜圖。

圖1 對照品色譜圖Fig.1 Comparative chromatogram

表1 線性試驗Tab.1 Linear test

2.2 精密度試驗

取2.1項下濃度為6、120,μg/mL的對照溶液，分別連續(xù)進樣重復測定 6次，得到峰面積，計算 RSD值。結(jié)果如表2。根據(jù) RSD值可以看出，該方法精密度良好。

表2 精密度試驗Tab.2 Precision test

2.3 穩(wěn)定性試驗

取 2.1項下濃度為 120、24、6,μg/mL 的對照溶液，分別在室溫放置 0、24,h，進樣 3次進行測定。RSD(%),結(jié)果如表3，顯示該方法穩(wěn)定性良好。

2.4 重復性試驗

取 10%,葡萄糖注射液，與一次性使用輸液器(帶針)連接，模擬輸液過程，從輸液針出口量取通過輸液器的葡萄糖溶液 100,mL置于容量瓶中。將葡萄糖溶液以 2～3,mL/min的速度通過固相萃取柱。分別用 5,mL甲醇、3,mL四氫呋喃依次洗脫，收集洗脫液，用四氫呋喃-乙腈(體積比＝1∶1)稀釋至 10,mL，平均制備 6份，直接進樣測定，均檢出抗氧劑 BHT，其余4種抗氧劑均未檢出。將測得BHT的峰面積代入標準曲線進行計算，結(jié)果見表4?？寡鮿?BHT的RSD(%)為1.86，表明該方法重復性良好。

表3 抗氧劑對照品室溫放置穩(wěn)定性試驗Tab.3 Stability test for room temperature placement of antioxidant reference product

表4 重復性試驗結(jié)果Tab.4 Repetition test results

2.5 檢測限

取抗氧劑 1010、抗氧劑 1076、抗氧劑 330、抗氧劑 168、抗氧劑 BHT對照品 75,mg，精密稱定，分別置于50,mL量瓶中，加四氫呋喃-乙腈(體積比＝1∶1)溶解并稀釋至刻度，精密量取 1,mL置 50,mL量瓶中，加四氫呋喃-乙腈(體積比＝1∶1)稀釋至刻度，搖勻，配成濃度約為 30,μg/mL的溶液，將各溶液逐級稀釋，按1.2項下色譜條件進樣，經(jīng)測定信噪比(S/N)為 2～3時，抗氧劑 1010、抗氧劑 1076、抗氧劑 330、抗氧劑168、抗氧劑BHT濃度分別約為 0.06、0.075、0.03、0.06、0.075,μg/mL。

2.6 回收率試驗

取 10%,葡萄糖注射液，與一次性使用輸液器(帶針)連接，模擬輸液過程，從輸液針出口量取通過輸液器的葡萄糖溶液100,mL置于容量瓶中，加入1,mL儲備液 2，混勻。溶液以 2～3,mL/min的速度通過固相萃取柱。分別用5,mL甲醇、3,mL四氫呋喃依次洗脫，收集洗脫液，用四氫呋喃-乙腈(體積比＝1∶1)稀釋至 10,mL，直接進樣測定。將測得峰面積代入標準曲線進行計算，結(jié)果見表5。

2.7 抗氧劑在注射液中遷移量的測定

取 10%,葡萄糖注射液，與一次性使用輸液器(帶針)連接，分別在常溫及高溫 60,℃下模擬輸液過程，在 0、3、6、24,h時量取通過輸液器的溶液 100,mL置于容量瓶中。溶液以 2～3,mL/min的速度通過固相萃取柱。分別用 5,mL甲醇、3,mL四氫呋喃依次洗脫，收集洗脫液，用四氫呋喃-乙腈(體積比＝1∶1)稀釋至 10,mL，直接進樣測定[4]。將測得峰面積代入標準曲線進行計算，結(jié)果見表6?？寡鮿?1010、1076、330、168的遷移量均低于檢測限，視為未檢出。圖 2為抗氧劑遷移測定結(jié)果，3.971為抗氧劑BHT的峰。

表5 抗氧劑遷移回收率試驗結(jié)果Tab.5 Test results of the transfer recovery rate of antioxidant

表6 抗氧劑在注射液中遷移量測定結(jié)果Tab.6 Determination of migration of antioxidant in injection

圖2 抗氧劑遷移測定結(jié)果Fig.2 Results of the migration determination of antioxidant

3 討 論

輸液系統(tǒng)包括輸液器、輸液針、輸液瓶等部件，其中輸液器構(gòu)造復雜，組件多，主要包括穿刺器、軟管、滴斗、過濾器、螺旋接頭、流量調(diào)節(jié)器等。目前市售輸液器多為 PVC、聚乙烯或聚丙烯材質(zhì)，而輸液瓶主要有鈉鈣玻璃、低/中硼硅玻璃、低密度聚乙烯/聚丙烯等材質(zhì)，除玻璃材質(zhì)外的輸液用品在生產(chǎn)過程中經(jīng)常會添加一些抗氧劑，但一般不會超過 3種。因此，開發(fā)能夠及時、準確、批量化地檢測輸液系統(tǒng)中抗氧劑遷移的方法非常必要。本文用 HPLC法對輸液系統(tǒng)中可能存在的 5種常見抗氧劑的遷移量進行方法學研究，包括線性試驗、精密度試驗、穩(wěn)定性試驗、重復性試驗、檢測限、回收率試驗，結(jié)果表明該方法適用性好，能夠準確檢測出輸液系統(tǒng)抗氧劑在注射液中的遷移含量，可作為評價輸液系統(tǒng)與藥液相容性的依據(jù)，并可為進一步評價其安全性提供參考。