劉若男 江倩 柯張延 郭嘉 吳海波 高敏 張妍蓓

安徽醫(yī)科大學第一附屬醫(yī)院呼吸與危重癥學科（合肥 230022）

近年來，腫瘤的高發(fā)病率備受人們關注［1］。在所有惡性腫瘤中，肺癌發(fā)病率及病死率均居較高地位，其中85%以上為非小細胞肺癌［2-3］。因肺癌早期常無明顯臨床癥狀，當患者因出現(xiàn)癥狀而就診時，多處晚期，僅能采取以化療為主的綜合治療［4］。因此，肺癌的早期診斷極為重要。目前肺癌的診斷方法多樣，如影像學、病理學、血清腫瘤標記物檢測等［5］。其中，腫瘤標記物因其簡便、快捷、無創(chuàng)而受到廣大研究者的青睞［6］。熱休克蛋白90α（HSP90α）在維持分子伴侶結構、調(diào)控細胞周期及凋亡、協(xié)調(diào)激素信號傳遞等方面發(fā)揮重要作用［7-8］。相關研究表明，在肺癌進展中，HSP90α處于動態(tài)演變過程，可作為一種新型腫瘤標記物［9］。目前HSP90α已被證實在NSCLC等多種腫瘤細胞中含量增高且其對肺癌診斷的靈敏度及特異度均較高［6，10］。因國內(nèi)外對于HSP90α在肺癌化療療效評價方面的研究仍較少，故開展本研究。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集2016年1月1日至2017年11月30日安徽醫(yī)科大學第一附屬醫(yī)院呼吸與危重癥學科收治的NSCLC患者47例。其中男33例，女14例，中位年齡64歲。病理分型：肺鱗癌13例，腺癌31例，腺鱗癌3例。有胸腔積液組25例，無積液組22例。入選標準：（1）所有入選患者均接受常規(guī)實驗室及影像學檢查，且均經(jīng)病理組織活檢確診；（2）為原發(fā)性肺癌，且未接受其他治療；（3）對化療藥物均無過敏；（4）所有患者病例資料均記錄完整，PS評分＜2分，可耐受化療。排除標準：（1）有嚴重心腦腎等臟器疾病，不耐受化療者；（2）有嚴重感染者；（3）依從性差，不能配合治療者；（4）妊娠期及哺乳期婦女。

1.2 試劑與方法 應用酶聯(lián)免疫法檢測血漿HSP90α濃度，其定量檢測試劑盒、酶免分析儀均由煙臺普羅吉生物科技發(fā)展有限公司提供。所有入選患者分別于首次確診及第4次化療結束后，于清晨空腹時使用EDTA抗凝管采集靜脈血2 mL，于4℃3 000 r/min離心10 min，分離血漿，并于-80℃凍存，所有標本統(tǒng)一解凍后，應用酶聯(lián)免疫法檢測，具體檢測方法嚴格按說明書進行。HSP90α的正常參考值范圍為0～82.06 ng/mL，＞82.06 ng/mL即為陽性。

1.3 治療及療效評價 收集的NSCLC患者均采用以卡鉑為基礎的聯(lián)合化療（鱗癌為紫杉醇聯(lián)合卡鉑，腺癌為培美曲塞聯(lián)合卡鉑），21 d為1個周期，經(jīng)4個周期化療結束后，根據(jù)WHO實體瘤近期療效評定標準評估，完全緩解（CR）0例，部分緩解（PR）2例，穩(wěn)定（SD）29例，進展（PD）16例。CR+PR+SD為化療有效組，（PD）為化療無效組，即經(jīng)過4個周期化療結束后可分為化療有效組31例和化療無效組16例。

1.4 統(tǒng)計學方法 數(shù)據(jù)處理用SPSS 16.0統(tǒng)計軟件，計量資料以表示，化療前后的均數(shù)比較采用配對t檢驗，不同病理類型間的均數(shù)比較采用方差（F）分析，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 化療前后各腫瘤標記物水平監(jiān)測 血漿HSP90α、CYFRA211、D?D及血紅蛋白（Hb）水平在化療后明顯低于化療前，其中血漿HSP90α及Hb濃度在化療前后差異有統(tǒng)計學意義；血漿CEA、NSE及白蛋白（ALB）水平在化療后較化療前升高，差異無統(tǒng)計學意義。見表1。

表1 化療前后各腫瘤標記物水平Tab.1 The levels of tumor markers before and after chemotherapy ±s

表1 化療前后各腫瘤標記物水平Tab.1 The levels of tumor markers before and after chemotherapy ±s

化療前化療后t值P值HSP90α（ng/mL）115.12±85.09 72.55±66.99 2.729 0.009 CEA（ng/mL）28.86±82.68 30.50±108.47-0.315 0.754 CYFRA211（ng/mL）7.36±7.18 5.69±6.14 1.744 0.088 NSE（ng/mL）17.14±7.70 23.50±51.95-0.881 0.383 D?D（ng/mL）2.30±4.83 1.31±1.52 1.392 0.170 Hb（g/L）127±15 116±15 5.584 0.000 ALB（g/L）39.37±4.16 40.16±11.58-0.449 0.655

2.2 化療有效組與無效組在化療前后各腫瘤標記物水平監(jiān)測 化療有效組中，各腫瘤標記物水平化療后均較化療前有所下降，其中血漿HSP90α、CYFRA211及Hb在化療前后差異有統(tǒng)計學意義；化療無效組中，血漿HSP90α、CEA、NSE及ALB化療后水平較化療前有所升高，差異無統(tǒng)計學意義，見表2。

表2 化療有效組與無效組化療前后各腫瘤標記物水平Tab.2 The levels of tumor markers were compared between the effective and ineffective groups of chemotherapy ±s

表2 化療有效組與無效組化療前后各腫瘤標記物水平Tab.2 The levels of tumor markers were compared between the effective and ineffective groups of chemotherapy ±s

HSP90α（ng/mL）CEA（ng/mL）CYFRA211（ng/mL）NSE（ng/mL）D?D（μg/mL）Hb（g/L）ALB（g/L）組別有效組化療前化療后t值P值無效組化療前化療后t值P值例數(shù)31 132.79±87.36 59.35±39.98 4.457 0.000 17.27±32.00 14.09±26.23 1.243 0.223 6.21±4.72 4.05±3.37 3.439 0.002 16.61±8.24 15.87±6.22 0.482 0.633 2.89±5.81 1.42±1.82 1.374 0.180 124±15 114±14 3.899 0.001 39.25±4.24 38.35±4.85 0.890 0.380 16 80.88±71.02 98.12±97.51-0.618 0.546 51.33±134.54 62.29±181.86-0.761 0.459 9.60±10.26 8.87±8.74 0.282 0.782 18.18±6.67 38.29±88.57-0.957 0.354 1.17±1.46 1.09±0.66 0.256 0.802 131±15 119±17 4.473 0.000 39.60±4.13 43.68±18.55-0.843 0.413

2.3 有無胸腔積液對化療前后各腫瘤標記物水平的影響 有胸腔積液組中，血漿HSP90α、CY?FRA211、NSE、D?D、Hb及ALB化療后水平較化療前有所下降，其中血漿HSP90α、CYFRA211、Hb在化療前后差異有統(tǒng)計學意義；無積液組中，血漿HSP90α、CEA、Hb化療后水平較化療前有所下降，其中Hb水平在化療前后差異有統(tǒng)計學意義。見表3。

2.4 不同病理分型化療前后血漿HSP90α水平化療后肺鱗癌組、腺癌組、腺鱗癌組血漿HSP90α水平均較化療前有所下降，差異無統(tǒng)計學意義，見表4。

表3 有胸腔積液組與無胸腔積液組化療前后各腫瘤標記物水平Tab.3 The levels of tumor markers were presented before and after chemotherapy in patients who had hydrothorax or not ±s

表3 有胸腔積液組與無胸腔積液組化療前后各腫瘤標記物水平Tab.3 The levels of tumor markers were presented before and after chemotherapy in patients who had hydrothorax or not ±s

組別有積液化療前化療后t值P值無積液化療前化療后t值P值例數(shù)25 HSP90α（ng/mL）CEA（ng/mL）CYFRA211（ng/mL）NSE（ng/mL）D?D（μg/mL）Hb（g/L）ALB（g/L）134.17±104.35 58.03±32.74 3.547 0.002 37.80±109.62 43.87±146.55-0.72 0.479 7.85±8.87 4.50±5.40 3.001 0.006 15.80±4.52 15.00±4.06 0.832 0.414 3.52±6.37 1.37±1.48 1.695 0.103 126±17 111±16 4.572 0.000 39.45±4.39 38.96±4.63 0.499 0.622 22 93.47±49.92 89.05±89.83 0.218 0.829 18.71±32.24 15.30±27.82 0.611 0.548 6.80±4.72 7.04±6.75-0.157 0.877 18.67±10.10 33.16±75.56-0.941 0.357 0.92±0.99 1.23±1.60-0.812 0.426 128±13 121±13 3.552 0.002 39.27±3.99 41.53±16.29-0.618 0.543

表4 不同病理分型化療前后血漿HSP90α水平Tab.4 The levels of plasma HSP90α were showed among different pathological types before and after chemotherapy

3 討論

肺癌是嚴重威脅人類健康的惡性腫瘤，其發(fā)病率及病死率均較高［3］，故肺癌的早期診斷尤為重要。在眾多檢測方法中，血清腫瘤標記物因其無創(chuàng)、簡便而備受關注。其中，HSP90α成為近年來的研究熱點之一。HSP90α在致癌信號的傳導、血管的新生、抗細胞凋亡及腫瘤轉(zhuǎn)移等方面發(fā)揮重要作用［7］。張聞龍等［9］亦在研究中表明HSP90α可作為一種新型腫瘤標記物。

本研究將NSCLC患者化療前后的血漿HSP90α濃度進行比較，結果發(fā)現(xiàn)，化療后HSP90α水平較化療前明顯下降，該結果與SHI等［11］的研究結果一致，表明化療對HSP90α在肺癌細胞中的表達具有較為重要的影響，在化療過程中監(jiān)測HSP90α濃度對于評價化療療效有著極其重要的作用。另外，本研究亦對入組患者化療結束后的療效進行評價，結果顯示：在化療有效組中，血漿HSP90α及肺癌三項水平均較化療前有所下降，其中HSP90α及CYFRA211在化療前后差異有統(tǒng)計學意義；由此可見，單獨檢測血漿HSP90α水平對于NSCLC化療后的療效評價優(yōu)于肺癌三項（因其簡化了檢測程序并降低了檢測成本），此為患者化療后隨訪提供更優(yōu)選擇。

肺癌患者常伴有胸腔積液，在本研究中，有胸腔積液組患者化療后HSP90α水平較化療前明顯下降，而無積液組患者無明顯差異，由此可見化療對于有積液組患者療效更佳。SHI等［12］研究表明：肺癌患者血漿HSP90α水平在不同病理分型間無明顯差異，與本研究結果一致。但本研究因樣本量少，病理分型間可能存在偏倚，在后期研究中將增大樣本量使得實驗數(shù)據(jù)更加完善。

晚期肺癌患者多伴有凝血功能異常，研究表明，纖溶系統(tǒng)及凝血機制的改變導致機體內(nèi)血液黏稠度上升，使得機體呈現(xiàn)出高凝狀態(tài)，此為肺癌患者機體內(nèi)最常見的改變之一［12］。相關研究表明，肺癌患者的預后好壞與血漿D?D水平呈負相關。本研究中，血漿D?D水平在化療前后差異顯著，表明化學治療可改善肺癌患者的凝血狀態(tài)，該檢查對于肺癌化療療效的評價亦有重要意義。

本研究對入選患者的Hb進行了分析，結果發(fā)現(xiàn)，無論是化療有效組還是無效組，Hb水平在化療前后差異顯著。如上所述，肺癌患者就診時多已處晚期，長期惡病質(zhì)使得患者處于貧血狀態(tài)，研究表明，腫瘤組織缺氧是誘導化療耐藥的重要原因，而Hb作為機體內(nèi)攜氧的主要分子，具有重要的參考價值［13］。

本研究對入組患者化療前后的血漿HSP90α水平、肺癌三項、Hb、ALB及D?D分別進行了探討，結果顯示血漿HSP90α可用于評估化療療效并指導后續(xù)治療。但因本研究樣本量有限，對于病理分型間的探討可能存在偏倚。另外，本研究僅檢測了肺癌患者首診及第4次化療結束后的各腫瘤標記物水平，在后期研究中將增大樣本量，并對每次化療結束后各腫瘤標記物進行檢測，以便得出其中的相關關系。除此之外，還將對血漿HSP90α水平與肺癌患者靶向治療及客觀生存率間的關系分別進行探討。