陳 芳，顧玉娣 ，余家樹 ，常彩琴，嚴品華，徐恩萍

（1.浙江漢博司法鑒定中心，浙江 杭州 310000；2.浙江大學司法鑒定中心，浙江 杭州 310000）

1 案 例

1.1 簡要案情

當事人王某懷疑孩子為其妻子與父親所生，攜帶本人、孩子生母及孩子血樣來本中心，要求鑒定自己與孩子之間是否存在親生血緣關系。經常染色體STR分型檢測和Y-STR分型檢測之后無法排除王某與孩子之間的親生血緣關系，因此補送王某父親樣本進行檢測。

1.2 檢驗方法

1.2.1 DNA提取

采用常規(guī)Chelex-100法[1]分別提取王某、王某父親、孩子母親與孩子血樣DNA，采用人類STRtyper-21G擴增熒光檢測試劑盒、STRtyper-10G試劑盒（寧波海爾施基因科技有限公司）進行27個常染色體STR基因座和Amelogenin性別基因座分型檢測，采用Goldeneye?DNA身份鑒定系統(tǒng)20Y［基點認知技術（北京）有限公司］進行20個Y-STR基因座的分型，采用Investigator DIPplex試劑盒（德國QIAGEN公司）進行30個常染色體InDel位點檢測，擴增體系和擴增程序按相關操作手冊進行。

1.2.2 STR分型

采用9700型PCR儀（美國AB公司）進行PCR擴增，使用3130xl基因分析儀（美國AB公司）進行電泳分離，使用GeneMapper?ID v3.2.1軟件（美國Thermo Fisher Scientific公司）處理電泳數據，實驗過程參照操作手冊。

1.3 檢驗結果

1.3.1 常染色體STR基因分型及Y-STR基因分型結果

對27個常染色體STR基因座（D19S433、D5S818、D21S11、D18S51、D6S1043、D3S1358、D13S317、D7S820、D16S539、CSF1PO、Penta D、vWA、D8S1179、TPOX、Penta E、TH01、D12S391、D2S1338、FGA、D1S1656、D18S1364、D13S325、D2A1772、D11S2368、D22-GATA198B05、D8S1132、D7S3048）和 Amelogenin 性別基因座進行STR分型檢驗，其中王某與孩子在D19S433、D3S1358基因座不符合遺傳規(guī)律：王某D19S433基因座分型為13/13，孩子D19S433基因座分型為14/16.2；王某D3S1358基因座分型為15/17，孩子D3S1358基因座分型為14/16，且不符合等位基因之間均只存在增加或者減少一個重復單位差異的遺傳定律。王某父親與孩子在27個常染色體STR基因座均符合遺傳定律。在20個Y-STR基因座的分型檢測中，王某、王某父親及孩子Y-STR分型結果均一致。

1.3.2 30個常染色體InDel位點檢測結果

對王某及孩子樣本進行30個常染色體InDel位點檢測結果見圖1～2。王某與孩子在D40、D125、D64三個InDel位點不符合遺傳規(guī)律。王某父親與孩子在30個常染色體InDel位點檢測結果均符合遺傳規(guī)律。

圖1 王某（上）與孩子（下）D40 InDel位點不符合遺傳規(guī)律

圖2 王某（上）與孩子（下）D125、D64位點不符合遺傳規(guī)律

2 討 論

本案例經常染色體STR分型檢測，王某與孩子在D19S433、D3S1358基因座不符合遺傳規(guī)律，且不符合等位基因之間均為增加或者減少一個重復單位差異的遺傳定律，無法給出明確鑒定結論。運用Investigator DIPplex試劑盒進行30個常染色體InDel位點補充鑒定，在30個常染色體InDel位點基因座中，有三個InDel位點不符合遺傳規(guī)律。結合常染色體STR分型結果及InDel分型結果，可以排除當事人王某與孩子之間存在親生血緣關系。

日常檢驗鑒定中，受理案件時，一定要充分理解被鑒定人的委托要求，特別是對一些爭議父與生父存在近親血緣關系的案例[2]。此類案件，孩子生母一定要參與，涉案的被鑒定父親和懷疑父親盡可能都參與鑒定。本案中，如果事先沒有了解被鑒定人的委托要求，僅僅當成普通的三聯體親子鑒定，在進行27個常染色體STR檢測之后，出現2個基因座位點不符合遺傳規(guī)律，均為增加或者減少一個重復單位的差異，且累積親權指數（cumulative paternity index，CPI）大于10000，這種情形很容易給出錯誤的鑒定意見。在亂倫親子鑒定中，增加檢測常染色體STR比增加檢測性染色體STR更有效，在常染色體STR不能滿足鑒定要求時，也可以補充InDel位點和SNP位點進行補充鑒定。

InDel是基因組等位基因中插入或者缺失長度不等的小DNA片段[3]，在個體分布上呈現長度多態(tài)性，因而可以作為DNA的分子標記用于祖先遺傳信息、群體遺傳結構等分析及法醫(yī)物證學鑒定。作為新一代遺傳標記，InDel兼具STR和SNP的優(yōu)點。InDel標記位點遍布基因組[4]，數量多、突變率低、片段短，適用于高度降解樣本的檢測，并可通過DNA毛細管電泳分型技術平臺進行分析，易于普及，在群體中有較好的遺傳多態(tài)性，可作為特殊檢案有效的補充鑒定工具。