徐端紅，賈新彥，胡　梅

（河南農(nóng)業(yè)職業(yè)學(xué)院，河南鄭州 451450）

黃芪多糖是從黃芪根部提取出含量最多的一種天然大分子多糖物質(zhì)，其在提高動物免疫力、抗病毒能力和促生長等方面具有較大應(yīng)用價值（辜沅，2017）。黃芪多糖對機(jī)體多個免疫器官具有促生長作用，同時，可以在免疫器官出現(xiàn)異常時發(fā)揮調(diào)節(jié)與維護(hù)作用（杜立中等，2014；張訓(xùn)海等，2009）。研究表明，黃芪多糖對B淋巴細(xì)胞和T淋巴細(xì)胞的增殖分化具有促進(jìn)作用，參與調(diào)節(jié)細(xì)胞免疫和體液免疫（Wang等，2013；Li等，2012）。此外，黃芪多糖可以促進(jìn)消化道對營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收，從而達(dá)到促進(jìn)機(jī)體生長發(fā)揮的目的（Zheng等，2013；Zhong等，2012）。隨著養(yǎng)殖業(yè)的不斷發(fā)展和人們對抗生素等藥物認(rèn)知的提升，在食品安全問題日趨嚴(yán)峻形勢的情況下，綠色食品受到更多關(guān)注，因此新的綠色飼料也成為人們關(guān)注的焦點(diǎn)（胡庭俊等，2005）。黃芪多糖憑借其促長增免疫、無毒副作用、無殘留和活性多樣等顯著優(yōu)勢，在動物飼料添加劑方面具有較大應(yīng)用潛能（Zhu等，2011）。目前關(guān)于黃芪多糖在豬、雞和兔等動物養(yǎng)殖中的應(yīng)用報道相對較多，而對羔羊的生長特性和免疫力方面的研究相對較少（魏炳棟等，2011；趙娟等，2010）。羔羊斷奶前后是山羊生長周期中的一個關(guān)鍵點(diǎn)，4月齡左右羔羊處于快速生長階段，消化系統(tǒng)發(fā)育處于過度階段，功能尚不完善，對營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收能力有限，常因營養(yǎng)不良導(dǎo)致生長發(fā)育受阻，抵抗力下降，因此，加強(qiáng)對斷奶羔羊的飼養(yǎng)管理十分重要（Ye等，2014）。本文將黃芪多糖添加到斷奶羔羊補(bǔ)飼的精料中，研究其在促進(jìn)羔羊生長發(fā)育和增強(qiáng)免疫力方面的作用，為黃芪多糖在羔羊健康養(yǎng)殖中的推廣應(yīng)用提供理論依據(jù)，也為其作用機(jī)理的進(jìn)一步研究奠定基礎(chǔ)。

1　材料

1.1試劑黃芪多糖粉購自偉立動保。細(xì)胞因子和免疫球蛋白ELISA試劑盒均購自Sigma公司

1.2試驗(yàn)動物選取4月齡健康斷奶羔羊。

2　方法

2.1動物分組選取4月齡健康斷奶羔羊40只，將其隨機(jī)分為高劑量組、中劑量組、低劑量組和對照組，在試驗(yàn)組補(bǔ)飼精料中添加黃芪多糖粉，黃芪多糖粉與精料的用量比分別為0.2 g/kg、0.1 g/kg和0.05 g/kg，對照組不添加，正常飼喂，連續(xù)飼喂28 d。

2.2血清生化分析和生長激素水平試驗(yàn)結(jié)束后，對所有羔羊進(jìn)行頸靜脈采血，分離血清，進(jìn)行血清生化指標(biāo)和生長激素水平測定。

2.3平均日增重與料重比試驗(yàn)開始前和試驗(yàn)第28天稱取各組羔羊重量，計算其平均日增重量；同時，記錄每天加料量，除去損耗量，計算各組羔羊平均日采食量。并計算料重比，計算公式如下：

料重比=平均日采食量/平均日增重量。

2.4免疫球蛋白及細(xì)胞因子含量利用ELISA試劑盒測定血清免疫球蛋白IgM、IgG、IgA和白細(xì)胞介素 -6（IL-6）、腫瘤壞死因子 -α（TNF-α）含量。

2.5羔羊發(fā)病率每日觀察記錄所有羔羊發(fā)病情況，分析各組羔羊發(fā)病情況。

2.6數(shù)據(jù)處理利用SPSS21.0軟件進(jìn)行方差分析，LSD法進(jìn)行多重比較，P＜0.01表示差異極顯著，P＜0.05表示差異顯著。

3　結(jié)果

3.1黃芪多糖對血清生化水平和生長激素水平的影響由表1可以看出，試驗(yàn)組和對照組血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶、胰島素和球蛋白含量差異不顯著（P＞0.05），試驗(yàn)組血清總蛋白和白蛋白水平與對照組差異顯著（P＜0.05），而谷草轉(zhuǎn)氨酶差異極顯著（P＜0.01）。另外，高劑量組和中劑量組的血清總蛋白與低劑量組差異顯著（P＜0.05），高劑量組的谷草轉(zhuǎn)氨酶與中劑量組和低劑量組差異顯著（P＜0.05）。而各試驗(yàn)組生長激素水平差異不顯著（P＞0.05），但均與對照組差異顯著（P＜ 0.05）。

表1　血生化指標(biāo)和激素水平檢測結(jié)果

3.2黃芪多糖對平均日增重與料重比的影響由圖1～2可知，飼料中添加黃芪多糖后羔羊日增重量均稍高于對照組，平均日采食量均相差不多，通過計算料重比發(fā)現(xiàn)，試驗(yàn)組羔羊料重比均低于對照組。

圖1　平均日增重和平均日采食量

圖2　料重比

3.3黃芪多糖對羔羊免疫指標(biāo)的影響利用ELISA試劑盒對羔羊血清中的細(xì)胞因子和免疫球蛋白進(jìn)行檢測發(fā)現(xiàn)，與對照組相比，試驗(yàn)組羔羊血清中IgA含量極顯著降低（P＜0.01），IgM含量顯著升高（P＜0.05），IgG含量升高，但差異不顯著（P＞ 0.05），IL-6與 TNF-α 含量下降，但差異不顯著（P＞0.05）。

表2　免疫指標(biāo)檢測結(jié)果

3.4羔羊發(fā)病率測定通過對所有羔羊發(fā)病情況進(jìn)行統(tǒng)計發(fā)現(xiàn)（表3），對照組羔羊有4只出現(xiàn)腹瀉癥狀，發(fā)病率最高（40%），低劑量組為10%，而高劑量組和中劑量組均無發(fā)病羔羊。

表3　羔羊發(fā)病率

4　討論

黃芪成分復(fù)雜，活性物質(zhì)多樣，作為重要活性物質(zhì)之一的黃芪多糖，主要由維生素、氨基酸鼠李糖、阿拉伯糖、葡萄糖和微量元素及未知生長因子等多種物質(zhì)構(gòu)成（Yun等，2012）。研究表明，在飼料中添加黃芪多糖可以明顯改善動物機(jī)體對氨基酸的消化吸收（Lu等，2013）。王雨林等（2010）研究發(fā)現(xiàn)，在家禽飼料中添加黃芪對雛雞生長發(fā)育和生產(chǎn)性能均有促進(jìn)作用，同時可以改善機(jī)體免疫力，提高雛雞對疾病的抵抗能力（Zhang等，2010）。有研究表明，黃芪多糖的用量與動物機(jī)體的生長性能有密切關(guān)系，但黃芪多糖對動物的作用效果各有差異（陳強(qiáng)等，2013）。黃芪多糖在一定的用量范圍內(nèi)有利于機(jī)體生長，超過一定的用量或用量過少都不能達(dá)到促生長的目的（張婧飛等，2003）。陳洪亮（2002）發(fā)現(xiàn)，不同來源的黃芪多糖對雞免疫系統(tǒng)具有保護(hù)作用，但對雞的生長性能無明顯效果。

本研究表明，黃芪多糖對斷奶羔羊有促進(jìn)生長作用，在相同飼養(yǎng)條件下，添加黃芪多糖的羔羊日增重明顯增加。在血生化指標(biāo)方面，黃芪多糖可以明顯影響血清總蛋白、白蛋白等含量，而血清總蛋白和谷草轉(zhuǎn)氨酶水平與黃芪多糖的用量關(guān)系更加密切。試驗(yàn)組羔羊的血清總蛋白、白蛋白、生長激素和谷草轉(zhuǎn)氨酶的水平顯著高于對照組。試驗(yàn)組羔羊血清中生長激素水平均高于對照組，差異顯著（P＜0.05），其中高劑量組含量最高。此外，與對照組相比，試驗(yàn)組羔羊平均日增重均偏高，料重比均偏低，這表明黃芪多糖對羔羊的生長發(fā)育具有一定的促進(jìn)作用。免疫指標(biāo)檢測結(jié)果表明，飼喂黃芪多糖粉后，羔羊血清中IgA含量下降，IgM含量顯著升高，IgG含量升高，IL-6與TNF-a含量下降。此外，試驗(yàn)組羔羊健康水平整體較高，當(dāng)黃芪多糖粉含量達(dá)到0.1 g/kg以上時，試驗(yàn)組羔羊疫病保護(hù)率可以達(dá)100%。本研究對黃芪多糖在促進(jìn)斷奶羔羊生長能力，增強(qiáng)機(jī)體免疫力，提高抗病能力等方面進(jìn)行了探討，為黃芪多糖在羔羊健康養(yǎng)殖方面的應(yīng)用提供了理論依據(jù)，并為黃芪多糖的作用機(jī)制的研究奠定了基礎(chǔ)。