徐端紅,賈新彥,胡 梅
(河南農(nóng)業(yè)職業(yè)學(xué)院,河南鄭州 451450)
黃芪多糖是從黃芪根部提取出含量最多的一種天然大分子多糖物質(zhì),其在提高動物免疫力、抗病毒能力和促生長等方面具有較大應(yīng)用價值(辜沅,2017)。黃芪多糖對機(jī)體多個免疫器官具有促生長作用,同時,可以在免疫器官出現(xiàn)異常時發(fā)揮調(diào)節(jié)與維護(hù)作用(杜立中等,2014;張訓(xùn)海等,2009)。研究表明,黃芪多糖對B淋巴細(xì)胞和T淋巴細(xì)胞的增殖分化具有促進(jìn)作用,參與調(diào)節(jié)細(xì)胞免疫和體液免疫(Wang等,2013;Li等,2012)。此外,黃芪多糖可以促進(jìn)消化道對營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收,從而達(dá)到促進(jìn)機(jī)體生長發(fā)揮的目的(Zheng等,2013;Zhong等,2012)。隨著養(yǎng)殖業(yè)的不斷發(fā)展和人們對抗生素等藥物認(rèn)知的提升,在食品安全問題日趨嚴(yán)峻形勢的情況下,綠色食品受到更多關(guān)注,因此新的綠色飼料也成為人們關(guān)注的焦點(diǎn)(胡庭俊等,2005)。黃芪多糖憑借其促長增免疫、無毒副作用、無殘留和活性多樣等顯著優(yōu)勢,在動物飼料添加劑方面具有較大應(yīng)用潛能(Zhu等,2011)。目前關(guān)于黃芪多糖在豬、雞和兔等動物養(yǎng)殖中的應(yīng)用報道相對較多,而對羔羊的生長特性和免疫力方面的研究相對較少(魏炳棟等,2011;趙娟等,2010)。羔羊斷奶前后是山羊生長周期中的一個關(guān)鍵點(diǎn),4月齡左右羔羊處于快速生長階段,消化系統(tǒng)發(fā)育處于過度階段,功能尚不完善,對營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收能力有限,常因營養(yǎng)不良導(dǎo)致生長發(fā)育受阻,抵抗力下降,因此,加強(qiáng)對斷奶羔羊的飼養(yǎng)管理十分重要(Ye等,2014)。本文將黃芪多糖添加到斷奶羔羊補(bǔ)飼的精料中,研究其在促進(jìn)羔羊生長發(fā)育和增強(qiáng)免疫力方面的作用,為黃芪多糖在羔羊健康養(yǎng)殖中的推廣應(yīng)用提供理論依據(jù),也為其作用機(jī)理的進(jìn)一步研究奠定基礎(chǔ)。
1.1試劑黃芪多糖粉購自偉立動保。細(xì)胞因子和免疫球蛋白ELISA試劑盒均購自Sigma公司
1.2試驗(yàn)動物選取4月齡健康斷奶羔羊。
2.1動物分組選取4月齡健康斷奶羔羊40只,將其隨機(jī)分為高劑量組、中劑量組、低劑量組和對照組,在試驗(yàn)組補(bǔ)飼精料中添加黃芪多糖粉,黃芪多糖粉與精料的用量比分別為0.2 g/kg、0.1 g/kg和0.05 g/kg,對照組不添加,正常飼喂,連續(xù)飼喂28 d。
2.2血清生化分析和生長激素水平試驗(yàn)結(jié)束后,對所有羔羊進(jìn)行頸靜脈采血,分離血清,進(jìn)行血清生化指標(biāo)和生長激素水平測定。
2.3平均日增重與料重比試驗(yàn)開始前和試驗(yàn)第28天稱取各組羔羊重量,計算其平均日增重量;同時,記錄每天加料量,除去損耗量,計算各組羔羊平均日采食量。并計算料重比,計算公式如下:
料重比=平均日采食量/平均日增重量。
2.4免疫球蛋白及細(xì)胞因子含量利用ELISA試劑盒測定血清免疫球蛋白IgM、IgG、IgA和白細(xì)胞介素 -6(IL-6)、腫瘤壞死因子 -α(TNF-α)含量。
2.5羔羊發(fā)病率每日觀察記錄所有羔羊發(fā)病情況,分析各組羔羊發(fā)病情況。
2.6數(shù)據(jù)處理利用SPSS21.0軟件進(jìn)行方差分析,LSD法進(jìn)行多重比較,P<0.01表示差異極顯著,P<0.05表示差異顯著。
3.1黃芪多糖對血清生化水平和生長激素水平的影響由表1可以看出,試驗(yàn)組和對照組血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶、胰島素和球蛋白含量差異不顯著(P>0.05),試驗(yàn)組血清總蛋白和白蛋白水平與對照組差異顯著(P<0.05),而谷草轉(zhuǎn)氨酶差異極顯著(P<0.01)。另外,高劑量組和中劑量組的血清總蛋白與低劑量組差異顯著(P<0.05),高劑量組的谷草轉(zhuǎn)氨酶與中劑量組和低劑量組差異顯著(P<0.05)。而各試驗(yàn)組生長激素水平差異不顯著(P>0.05),但均與對照組差異顯著(P< 0.05)。
表1 血生化指標(biāo)和激素水平檢測結(jié)果
3.2黃芪多糖對平均日增重與料重比的影響由圖1~2可知,飼料中添加黃芪多糖后羔羊日增重量均稍高于對照組,平均日采食量均相差不多,通過計算料重比發(fā)現(xiàn),試驗(yàn)組羔羊料重比均低于對照組。
圖1 平均日增重和平均日采食量
圖2 料重比
3.3黃芪多糖對羔羊免疫指標(biāo)的影響利用ELISA試劑盒對羔羊血清中的細(xì)胞因子和免疫球蛋白進(jìn)行檢測發(fā)現(xiàn),與對照組相比,試驗(yàn)組羔羊血清中IgA含量極顯著降低(P<0.01),IgM含量顯著升高(P<0.05),IgG含量升高,但差異不顯著(P> 0.05),IL-6與 TNF-α 含量下降,但差異不顯著(P>0.05)。
表2 免疫指標(biāo)檢測結(jié)果
3.4羔羊發(fā)病率測定通過對所有羔羊發(fā)病情況進(jìn)行統(tǒng)計發(fā)現(xiàn)(表3),對照組羔羊有4只出現(xiàn)腹瀉癥狀,發(fā)病率最高(40%),低劑量組為10%,而高劑量組和中劑量組均無發(fā)病羔羊。
表3 羔羊發(fā)病率
黃芪成分復(fù)雜,活性物質(zhì)多樣,作為重要活性物質(zhì)之一的黃芪多糖,主要由維生素、氨基酸鼠李糖、阿拉伯糖、葡萄糖和微量元素及未知生長因子等多種物質(zhì)構(gòu)成(Yun等,2012)。研究表明,在飼料中添加黃芪多糖可以明顯改善動物機(jī)體對氨基酸的消化吸收(Lu等,2013)。王雨林等(2010)研究發(fā)現(xiàn),在家禽飼料中添加黃芪對雛雞生長發(fā)育和生產(chǎn)性能均有促進(jìn)作用,同時可以改善機(jī)體免疫力,提高雛雞對疾病的抵抗能力(Zhang等,2010)。有研究表明,黃芪多糖的用量與動物機(jī)體的生長性能有密切關(guān)系,但黃芪多糖對動物的作用效果各有差異(陳強(qiáng)等,2013)。黃芪多糖在一定的用量范圍內(nèi)有利于機(jī)體生長,超過一定的用量或用量過少都不能達(dá)到促生長的目的(張婧飛等,2003)。陳洪亮(2002)發(fā)現(xiàn),不同來源的黃芪多糖對雞免疫系統(tǒng)具有保護(hù)作用,但對雞的生長性能無明顯效果。
本研究表明,黃芪多糖對斷奶羔羊有促進(jìn)生長作用,在相同飼養(yǎng)條件下,添加黃芪多糖的羔羊日增重明顯增加。在血生化指標(biāo)方面,黃芪多糖可以明顯影響血清總蛋白、白蛋白等含量,而血清總蛋白和谷草轉(zhuǎn)氨酶水平與黃芪多糖的用量關(guān)系更加密切。試驗(yàn)組羔羊的血清總蛋白、白蛋白、生長激素和谷草轉(zhuǎn)氨酶的水平顯著高于對照組。試驗(yàn)組羔羊血清中生長激素水平均高于對照組,差異顯著(P<0.05),其中高劑量組含量最高。此外,與對照組相比,試驗(yàn)組羔羊平均日增重均偏高,料重比均偏低,這表明黃芪多糖對羔羊的生長發(fā)育具有一定的促進(jìn)作用。免疫指標(biāo)檢測結(jié)果表明,飼喂黃芪多糖粉后,羔羊血清中IgA含量下降,IgM含量顯著升高,IgG含量升高,IL-6與TNF-a含量下降。此外,試驗(yàn)組羔羊健康水平整體較高,當(dāng)黃芪多糖粉含量達(dá)到0.1 g/kg以上時,試驗(yàn)組羔羊疫病保護(hù)率可以達(dá)100%。本研究對黃芪多糖在促進(jìn)斷奶羔羊生長能力,增強(qiáng)機(jī)體免疫力,提高抗病能力等方面進(jìn)行了探討,為黃芪多糖在羔羊健康養(yǎng)殖方面的應(yīng)用提供了理論依據(jù),并為黃芪多糖的作用機(jī)制的研究奠定了基礎(chǔ)。