謝 清,洪 慶,朱曉奕,湯 建
(1. 江蘇大學 藥學院,江蘇 鎮(zhèn)江 212013;2. 江蘇大學附屬醫(yī)院,江蘇 鎮(zhèn)江 212001)
玉屏風散系中醫(yī)扶正固本的經(jīng)典名方,由黃芪、白術(shù)和防風組成,藥簡效宏,臨床療效顯著。君藥黃芪補氣升陽,固表止汗;臣藥白術(shù)健脾益氣,助黃芪以固表;佐藥防風散風解痙以達邪,諸藥合參,組方嚴謹[1]。玉屏風散具有雙向免疫調(diào)節(jié)作用,使機體免疫保持平衡,對免疫失調(diào)性疾病有很好的臨床效果[2-3]。為了解釋該藥物的藥效物質(zhì)基礎和更好的控制藥物的質(zhì)量,研究人員采用現(xiàn)代色譜技術(shù),深入分析了玉屏風散及原藥材的化學成分,建立了指紋圖譜,為該藥物的質(zhì)量控制和深入藥理機制研究提供了科學依據(jù)[4-8],現(xiàn)將近年來玉屏風散的化學物質(zhì)基礎研究綜述如下。
黃芪、白術(shù)和防風因其顯著的藥理活性及廣泛應用,眾多科研人員對其化學成分進行了深入的研究,比較徹底地解析了主要的化學成分。
黃芪中皂苷、黃酮和多糖是該中藥材主要的活性成分[5-7],已從黃芪中分離得到40余種三萜皂苷類成分,如:黃芪皂苷(astragaloside)Ⅰ(1),Ⅱ(2),Ⅲ(3),Ⅳ(4),Ⅴ(5),Ⅵ(6),Ⅶ(7),異黃芪皂苷Ⅰ(8),Ⅱ(9)和Ⅳ(10),新黃芪皂苷Ⅰ(11),乙酰黃芪皂苷(12),膜莢黃芪皂苷(13),環(huán)黃芪苷E(cyclocanthoside E,14),agroastragaloside Ⅰ(15), agroastragaloside Ⅱ(16),astramembranoside B(17),大豆皂苷Ⅰ(soyasaponin Ⅰ,18),黃芪皂苷Ⅷ(astragaloside Ⅷ,19)。大部分化合物(1~17)是環(huán)阿屯烷型四環(huán)三萜苷元,但14~17是側(cè)鏈四氫呋喃環(huán)開環(huán)的產(chǎn)物。少量皂苷(18和19)是大豆皂苷元B為母核的化合物。黃芪中分離鑒定的黃酮類化合物近40余種,包括黃酮、異黃酮、異黃烷和紫檀烷四類成分,如槲皮素(quercetin),異槲皮苷(quercetin-3-O-gluco-side),毛蕊異黃酮苷(calycosin-7-O-glucoside,20),毛蕊異黃酮(calycosin,21),芒柄花苷(ononin,22),芒柄花素(formononetin,23),紅車軸草素-7-O-葡萄糖苷(pratensein-7-O-glucoside,24),紅車軸草素(pratensein,25),黃芪異黃烷醇(isomucronulatol,26),黃芪異黃烷苷(isomucronulatol-7-O-glucoside,27),isomucronulatol-7, 2′-di-O-glucoside(28),(-)-methylnissolin(29),(-)-methylnissolin-3-O-glucoside(30)。黃芪多糖成分主要是酸性水溶性雜多糖和α-1,4/1,6或α-1,4/葡聚糖,前者主要由葡萄糖、阿拉伯糖、鼠李糖和半乳糖組成。在增強免疫系統(tǒng)方面,黃芪多糖的作用明顯強于皂苷類和黃酮類成分,但黃芪皂苷具有顯著的腦損傷保護作用[5, 8]。
圖1 黃芪中代表性小分子化合物結(jié)構(gòu)
白術(shù)的化學成分研究主要集中于揮發(fā)油、內(nèi)酯類化合物、苷類化合物以及多糖成分[9, 10]。目前已從白術(shù)中分離鑒定出100多種倍半萜類化合物。白術(shù)揮發(fā)油中主要是單萜或倍半萜類成分,含量最高的是蒼術(shù)酮(31)。內(nèi)酯類成分主要為白術(shù)內(nèi)酯(atractylenolide)Ⅰ(32),Ⅱ(38),Ⅲ(33),Ⅳ(34),Ⅴ(35),8β-甲氧基白術(shù)內(nèi)酯I(36),8β-乙氧基白術(shù)內(nèi)酯I(37),雙白術(shù)內(nèi)酯(biatractylenolide,39)及雙表白術(shù)內(nèi)酯(biepialtemlid,40)[11]等倍半萜類化合物。但SCIFINDER上給出的白術(shù)內(nèi)酯I和Ⅱ的結(jié)構(gòu)分別為38和32,與文獻[10]正好相反。
圖2 白術(shù)和防風中代表性小分子化合物結(jié)構(gòu)
防風的化學成分主要為色原酮類化合物、香豆素、揮發(fā)油、聚炔和多糖[12-13],其中色原酮類化合物為代表性活性組分,如:升麻苷(prim-O-glucosylcimifugin,41),升麻素(cimifugin,42),5-O-甲基維斯阿米醇苷(5-O-methylvisamminoside,43),5-O-甲基維斯阿米醇(5-O-methylvisamminnol,44),亥茅酚苷(sec-O-glucosylhamaudol,45),亥茅酚(hamaudol,46),3-乙酰基亥茅酚(3-acetylhamaudol,47),3-當歸?;ッ┓?3-angeloyl hamaudol,48),divaricatol(49),防風色原酮(ledebouriellol,50),undulatoside A(51)和漢黃芩素(wogonin,52)等。香豆素成分主要是:補骨脂素(psoralen,53),歐前胡素(imperation,54),異歐前胡素(isoimperation,55),香柑內(nèi)酯(57),花椒毒素(xanthotoxin,58),珊瑚菜內(nèi)酯(phellopterin,59),東莨菪亭(scopoletin,60),秦皮啶(fraxidin,61),異秦皮啶(isofraxidin,62),紫花前胡苷元(nodakenetin,63),異紫花前胡苷(marmesinin,64),石防風素(deltoin,65),川白芷內(nèi)酯(anomalin,66)。防風中的聚炔類化合物有人參炔醇(falcarinol,67)和法卡林二醇(falcarindiol,68)等。化合物63中的2′位為R構(gòu)型,不同于化合物64和65中的S構(gòu)型(C2′),這有違一般規(guī)律,至少在分離過程中會發(fā)現(xiàn)2′位為S構(gòu)型的S-nodakenetin。
為了更加全面控制玉屏風散的質(zhì)量,研究人員測定了玉屏風散的物質(zhì)基礎。但相比于原料藥材,玉屏風的分離鑒定工作并不深入,僅限于HPLC等方法對主要化合物峰進行指認。
黃月純[4]等從玉屏風散水煎液的指紋圖譜中標示出11個共有峰,其中源于黃芪的特征峰為6個,源于防風的特征峰4個,源于白術(shù)的特征峰1個。經(jīng)過與標準品比對,鑒定出5個化合物:毛蕊異黃酮苷(20),毛蕊異黃酮(21),芒柄花素(23),升麻苷(41),5-O-甲基維斯阿米醇苷(43)。王欣之[14]等從玉屏風散水煎液中檢出色原酮、黃酮和內(nèi)酯類9種成分的含量:毛蕊異黃酮苷(20),毛蕊異黃酮(21),芒柄花素(23),白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ(32)和Ⅲ(33),升麻苷(41),升麻素(42),5-O-甲基維斯阿米醇苷(43),亥茅酚苷(45)。袁文娟[15]對26批次的玉屏風散顆粒的甲醇提取物進行了指紋圖譜研究,經(jīng)與原藥材飲片比較,其中有5個峰源于黃芪,4個峰源于防風,1個峰源于白術(shù)。進一步與對照品比較,鑒定了其中8種成分:毛蕊異黃酮苷(20),毛蕊異黃酮(21),白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ(33),升麻苷(41),升麻素(42)、5-O-甲基維斯阿米醇苷(43),亥茅酚苷(45),但未檢出白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ(32)。文章[15]中還提到了化合物甜菊苷(stevioside),但該化合物可能是源于輔料,而非三種原藥材。周倩采用RP-HPLC法測定了玉屏風散中源于黃芪的4種異黃酮:毛蕊異黃酮苷(20),毛蕊異黃酮(21),芒柄花苷(22)和芒柄花素(23)[7]??焖俑叻蛛x度液相色譜RRLC-DAD-QQQ MS/MS技術(shù),從玉屏風散水煎劑中發(fā)現(xiàn)了15個化合物:黃芪皂苷Ⅳ(4),毛蕊異黃酮苷(20),毛蕊異黃酮(21),芒柄花苷(22),芒柄花素(23),白術(shù)內(nèi)酯I(32),Ⅱ(38)和Ⅲ(33),升麻苷(41)、5-O-甲基維斯阿米醇苷(43),補骨脂素(53),異補骨脂素(isopsoralen,56)和東莨菪亭(60)[16]。雖然液質(zhì)手段指認出化合物56,但防風藥材中該化合物并不常見。采用16HBE-HPLC-MS手段,跟蹤篩選到了5個活性組分:毛蕊異黃酮苷(20),毛蕊異黃酮(21),芒柄花苷(22),芒柄花素(23)和亥茅酚苷(45)[17],這5個化合物均見于玉屏風散的HPLC分析圖譜中。
HPLC檢測發(fā)現(xiàn),全方湯劑的特征峰基本為各藥特征峰的加和,未產(chǎn)生明顯的新特征峰,三藥合煎僅對特征峰的相對含量有輕微影響[4,15]。但也明顯看得出,HPLC檢測到的玉屏風中的化合物主要是異黃酮類、色原酮類以及香豆素類等含量較高且具有明顯紫外吸收的物質(zhì),而黃芪皂苷是君藥黃芪的重要組分,但分析得較少。同時,對于發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)至關(guān)重要的多糖成分,目前對其化學組成還有待于進一步深入研究。
玉屏風散在臨床上具有良好的藥效,單獨使用或與其他藥物聯(lián)合使用均表現(xiàn)出明顯的雙向調(diào)節(jié)性能。玉屏風散總多糖和總皂苷是發(fā)揮其免疫作用的主要藥效部分,深入研究該方劑及其原藥材,不僅有利于控制藥物質(zhì)量,也有利于闡明作用機制。同時,現(xiàn)代化學和藥理研究發(fā)現(xiàn)原藥材含有神經(jīng)保護的活性成分,這也使我們認識到玉屏風在抗衰老和防治老年癡呆等疾病方面具有一定的潛力。
參考文獻:
[1] 金哲峰,王聰. 難病奇方系列叢書第二輯—玉屏風散[M]. 北京:中國醫(yī)藥科技出版社,2009:4-12.
[2] 段懿洲,肖丹,彭衡陽,等. 玉屏風制劑免疫調(diào)節(jié)作用研究進展[J]. 亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥,2012,8(9):200-202.
[3] 許璇璇,李玲孺,武彥伶,等. 從表虛伏邪探討玉屏風散雙向免疫調(diào)節(jié)機制[J]. 安徽中醫(yī)藥大學學報,2015,34(2):1-3.
[4] 黃月純,尹雪,魏剛. 玉屏風湯劑的 HPLC 指紋圖譜研究[J]. 中成藥,2008,30(10):1405-1408.
[5] 張薔, 高文遠, 滿淑麗. 黃芪中有效成分藥理活性的研究進展[J]. 中國中藥雜志,2012 (21):3203-3207.
[6] 郭璐. 黃芪中皂苷類成分及黃芪甲苷結(jié)構(gòu)修飾的研究[D]. 成都:西南交通大學,2014.
[7] 周倩,李瑩,戴衍朋,等. RP-HPLC 法測定黃芪及玉屏風顆粒中4種異黃酮類成分[J]. 中成藥,2014,36(8):1674-1677.
[8] 楊春彥,李艷花,辛延樂,等. 黃芪皂苷對多發(fā)性硬化作用的研究進展[J]. 山西大同大學學報 (自然科學版),2016,32(1):48-50.
[9] 岳美穎,潘媛,敖慧. 白術(shù)化學、藥理與臨床研究進展[J]. 亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥,2016,12(5):66-68.
[10] 梁志遠,冉曉燕,周進康. 白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ的化學研究進展[J]. 貴州師范學院學報,2013,29(9):29-33.
[11] 王保德,滕寧寧,蔣山好,等. 雙表白術(shù)內(nèi)酯的結(jié)構(gòu)鑒定[J]. 化學學報, 1999,57(9):1022-1025.
[12] 竇紅霞,高玉蘭. 防風的化學成分和藥理作用研究進展[J]. 中醫(yī)藥信息,2009,26(2):15-17.
[13] 姜艷艷,劉斌,石任兵,等. 防風化學成分的分離與結(jié)構(gòu)鑒定[J]. 藥學學報,2007,42(5):505-510.
[14] 王欣之,文紅梅,居玲玲,等. 玉屏風散醇提部位HPLC指紋圖譜研究[J]. 中成藥,2009,31(3):335-339.
[15] 袁文娟,高文分,孟芹,等. 玉屏風顆粒HPLC指紋圖譜的研究[J]. 中國藥師,2012,15(3):313-318.
[16] DU C Y Q, CHOI R C Y, ZHENG K Y Z, et al. Yu Ping Feng San, an ancient Chinese herbal decoction containing Astragali Radix, Atractylodis Macrocephalae Rhizoma and Saposhnikoviae Radix, regulates the release of cytokines in murine macrophages[J]. PLoS One, 2013, 8(11): e78622.
[17] SHEN D, XIE X, ZHU Z, et al. Screening active components from Yu-ping-feng-san for regulating initiative key factors in allergic sensitization[J]. PloS One, 2014, 9(9): e107279.