王一飛 貢 嘎 參木友 羅曉林 石紅梅趙索南 拉 環(huán) 宋仁德 索朗斯珠＊

（1.西藏農(nóng)牧學(xué)院動(dòng)物科學(xué)學(xué)院，西藏林芝 860000；2.西藏農(nóng)牧科學(xué)院草原研究所，西藏拉薩 850000；3.四川省草原科學(xué)研究院，四川紅原 6117314；4.甘南州畜牧工作站，甘肅甘南 747000；5.青海省海北州畜牧獸醫(yī)科學(xué)研究所，青海海北 810299；6.青海省大通種牛場(chǎng)，青海玉樹 810102；7.青海省玉樹藏族自治州畜牧獸醫(yī)工作站，青海玉樹 815099）

牦牛是世界上生活在海拔最高處的哺乳動(dòng)物。主要分布在喜馬拉雅山脈和青藏高原。牦牛作為藏區(qū)重要的生產(chǎn)力，給養(yǎng)殖戶帶來(lái)很高的經(jīng)濟(jì)回報(bào)。所以在養(yǎng)殖過(guò)程中就要注意對(duì)牦牛疾病的控制。但是在大型的牦牛養(yǎng)殖業(yè)中有些疾病是非常易感但是又不容易發(fā)現(xiàn)的，所以必須要采取一系列的檢測(cè)。比如牛布氏桿菌病就會(huì)給養(yǎng)殖戶帶來(lái)非常大的經(jīng)濟(jì)損失，還會(huì)影響到人的安全。

牛布氏桿菌病又稱為布病，是由布氏桿菌引起的一種以流產(chǎn)、不能生育為主的一種人畜共患傳染病。近幾年來(lái)，隨著養(yǎng)牛業(yè)的發(fā)展，牛布病也呈現(xiàn)高發(fā)的態(tài)勢(shì)，其病原菌為形態(tài)不規(guī)則的革蘭氏陰性微小桿菌，其呈現(xiàn)無(wú)鞭毛，且不成形的芽孢和莢膜。本病原菌侵襲力和擴(kuò)散力很強(qiáng)，通過(guò)皮膚和黏膜侵入牛機(jī)體后，在各個(gè)組織中分布。該細(xì)菌有較強(qiáng)的抵抗能力，在肉、乳品中存活2個(gè)月，在糞便和被污染的水源、土壤中，能夠存活20～120d。該病菌對(duì)一般的消毒劑和抗生素具有較強(qiáng)的敏感性，可以利用其這一個(gè)特性對(duì)該種疾病進(jìn)行預(yù)防[1-4]。

1 材料和方法

1.1 血清

2017年6～9月 份共采集牦牛血清871份，其中西藏185份、四川54份、青海390份、甘肅242份，冷藏運(yùn)輸至實(shí)驗(yàn)室，編號(hào)置于-20℃冰箱中保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2 檢測(cè)試劑

牛布氏桿菌?。˙rucella-Ab）抗體酶聯(lián)免疫分析（ELISA）試劑盒由齊一生物科技有限公司提供，（批號(hào)：20171117）。

1.3 實(shí)驗(yàn)儀器

恒溫培養(yǎng)箱（上海三發(fā)科學(xué)儀器有限公司提供，型號(hào)為GNP-9050）、離心機(jī)、自動(dòng)酶標(biāo)儀（深圳雷杜生命科技有限公司提供，型號(hào)為Rayto RT-6100）、超純水（Millpore公司提供，型號(hào)為ELIX10）、振蕩機(jī)等。

1.4 試驗(yàn)方法

嚴(yán)格按照牛布氏桿菌（Brucella-Ab）ELISA檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行操作。

2 結(jié)果

藏區(qū)各地牦牛布氏桿菌病血清抗體總陽(yáng)性率為16.19%（141/871），其中西藏地區(qū)為18.92%（35/185）、四川地區(qū)為24.07%（13/54）、青海地區(qū)為16.15%（63/390）、甘肅地區(qū)為12.40%（30/242）。結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 藏區(qū)不同地區(qū)牛布氏桿菌病血清抗體檢測(cè)情況

3 討論

布氏桿菌病主要引起動(dòng)物的繁殖疾病，嚴(yán)重的危害了藏區(qū)養(yǎng)牛業(yè)的發(fā)展，目前，檢測(cè)布病的方法較多，比如：試管凝集反應(yīng)、ELISA等，其中ELISA方法操作簡(jiǎn)便、快速以及靈敏度較高，因此廣泛應(yīng)用于布病的檢測(cè)。本文通過(guò)酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）對(duì)西藏、四川、青海、甘肅等藏區(qū)各地牦牛871份血清進(jìn)行抗體檢測(cè)，血清抗體總陽(yáng)性率為16.19%（141/871），其中西藏地區(qū)為18.92%（35/185）、四川地區(qū)24.07%（13/54）、青海地區(qū)16.15%（63/390）、甘肅地區(qū)12.40%（30/242）。

牛布氏桿菌病在全球各大洲都有流行的研究報(bào)道。張可榮[5]等2011年對(duì)西藏4個(gè)地區(qū)牦牛血清進(jìn)行布病檢測(cè)，結(jié)果表明布病感染率為5.9%，黎能金[6]等2008年對(duì)四川阿壩州牦牛的檢測(cè)表明布病感染率為5%，陽(yáng)愛(ài)國(guó)[7]等2013年對(duì)四川省牦牛布病進(jìn)行流行病學(xué)調(diào)查，結(jié)果表明陽(yáng)性率達(dá)到5.6%。以上血清抗體陽(yáng)性率均低于本次試驗(yàn)結(jié)果，這可能與樣品的采集數(shù)量等有關(guān)，需要進(jìn)一步研究。

本研究牦牛布病血清學(xué)調(diào)查，雖然在一定程度上能反映出藏區(qū)牦牛布病流行情況，但不能反映藏區(qū)全部易感家畜的布病感染情況。如果要達(dá)到預(yù)防控制布病的目的，建議全面地對(duì)藏區(qū)各地的豬、牛、羊等易感動(dòng)物進(jìn)行全面檢測(cè)，重點(diǎn)是對(duì)那些流產(chǎn)母畜進(jìn)行登記，一經(jīng)查出屬于陽(yáng)性，應(yīng)禁止買賣。對(duì)流產(chǎn)胎兒以及附屬物進(jìn)行無(wú)害化處理。及時(shí)控制本病的發(fā)生。

[1]陳溥言.獸醫(yī)傳染病學(xué)（第5版）[M].北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，2006：135-141.

[2]李玲，閆晶華，閆昊，等.新疆畜間布魯氏菌病流行情況及防治技術(shù)研究[J].草食家畜，2012，15（3）：19-22.

[3]高明春，王君偉.布魯氏菌病實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)及其適用性評(píng)析[J].中國(guó)奶牛，2012，（4）：35-38.

[4]蔡寶祥.家畜傳染病學(xué)（第四版）[M].北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，2002.

[5]張可榮，貢嘎，索朗斯珠，等.西藏部分地區(qū)牦牛布病血清學(xué)檢測(cè)初報(bào)[J].中國(guó)奶牛，2011，（24）：48-49.

[6]黎能金，張霞，馬吉?jiǎng)伲?2008年四川省阿壩州布魯桿菌病調(diào)查結(jié)果分析[J].醫(yī)學(xué)動(dòng)物防治，2009，25（7）：517-518.

[7]陽(yáng)愛(ài)國(guó)，鄧永強(qiáng)，郭莉，等.四川省家畜布病結(jié)核病流行病學(xué)調(diào)查及防治情況[J].四川畜牧獸醫(yī)，2013，40（8）：13-14.