陸英　漆艷香　喻群芳　楊毅

摘要[目的]綜合評(píng)價(jià)黃龍病對(duì)綠橙果實(shí)品質(zhì)的影響。[方法]以采自海南瓊中縣同一果園的健康綠橙植株和具有柑橘黃龍病典型癥狀植株上的果實(shí)為試驗(yàn)材料，對(duì)單果重、果形指數(shù)、果皮厚度、果實(shí)硬度、可溶性固形物、可滴定酸含量、維生素C、果汁率、可食率等指標(biāo)進(jìn)行測(cè)定，探討黃龍病對(duì)瓊中綠橙果實(shí)品質(zhì)的影響。[結(jié)果]同一生產(chǎn)果園中健康綠橙和黃龍病綠橙果實(shí)在外觀、內(nèi)在品質(zhì)等多個(gè)指標(biāo)上存在明顯差異，感病綠橙果實(shí)品質(zhì)嚴(yán)重下降。與健康植株果實(shí)相比，感染黃龍病的植株果實(shí)單果重明顯變輕，果實(shí)變小，果實(shí)變硬，可溶性固形物、維生素C含量、固酸比、可食率和出汁率顯著減少，而可滴定酸含量明顯增加。[結(jié)論]該研究結(jié)果為科學(xué)評(píng)估黃龍病對(duì)綠橙產(chǎn)業(yè)造成的損失提供了參考。

關(guān)鍵詞 黃龍?。画傊芯G橙；果實(shí)品質(zhì)

中圖分類號(hào) S436.661.1 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A 文章編號(hào) 0517-6611（2018）11-0122-03

柑橘是世界第一大水果，是僅次于玉米和小麥的世界第三大貿(mào)易農(nóng)產(chǎn)品。我國(guó)是世界最大的柑橘生產(chǎn)國(guó)，目前已有19個(gè)省、市、區(qū)種植柑橘，2016年全國(guó)柑橘種植面積256萬hm²，產(chǎn)量達(dá)3616萬t，產(chǎn)值達(dá)3000多億元人民幣，已成為我國(guó)農(nóng)民收入的重要來源之一。海南屬熱帶季風(fēng)氣候，素來有“天然大溫室”的美稱，長(zhǎng)夏無冬，年平均氣溫22～26℃，≥10℃的積溫為8200℃，全省雨量充沛，年平均降雨量為1639mm，有明顯的多雨季和少雨季，具有發(fā)展柑橘的優(yōu)越自然生態(tài)條件，品種特色明顯，產(chǎn)業(yè)發(fā)育較成熟，已經(jīng)形成規(guī)模生產(chǎn)。海南柑橘種類以瓊中綠橙為主，其次是澄邁福橙、檸檬、柚類，這些特色品種在長(zhǎng)期栽培過程中，經(jīng)過自然和人工的選擇，產(chǎn)生了許多變異，形成了適應(yīng)當(dāng)?shù)丨h(huán)境的優(yōu)良品種。橘果外觀、風(fēng)味、內(nèi)含物等方面品質(zhì)獨(dú)特、優(yōu)良，質(zhì)量在國(guó)內(nèi)外市場(chǎng)上具有明顯的優(yōu)勢(shì)。其中，瓊中綠橙是海南省第一個(gè)地理標(biāo)志產(chǎn)品，被評(píng)為海南優(yōu)質(zhì)農(nóng)產(chǎn)品、海南省名牌產(chǎn)品等，獲國(guó)家綠色食品認(rèn)證，深受市場(chǎng)喜愛，在島內(nèi)外享有盛譽(yù)。

柑橘黃龍病是一種極具毀滅性的病害，被稱為國(guó)內(nèi)外柑橘產(chǎn)業(yè)頭號(hào)“殺手”，嚴(yán)重威脅著柑橘產(chǎn)業(yè)的健康發(fā)展。該病病原菌為韌皮桿菌屬（CandidatusLiberibacterspp.），是一種難培養(yǎng)細(xì)菌，至今還未能純化培養(yǎng)，可通過柑橘木虱和嫁接帶菌接穗在田間短距離傳播，還可以隨著帶菌種苗調(diào)運(yùn)實(shí)現(xiàn)遠(yuǎn)距離傳播。患病的柑橘葉脈間黃化、再生葉變小，病葉變硬、反卷或葉脈木栓化。染病果實(shí)轉(zhuǎn)色異常、果皮變粗厚以及甜度下降。整個(gè)患病植株樹勢(shì)漸衰弱、生育緩慢，結(jié)果數(shù)減少，嚴(yán)重影響產(chǎn)量和品質(zhì)。我國(guó)最早于1919年在廣東汕頭地區(qū)發(fā)現(xiàn)黃龍病，20世紀(jì)70年代黃龍病在廣東暴發(fā)流行，之后逐漸蔓延到全國(guó)各地，截止目前我國(guó)19個(gè)柑橘生產(chǎn)?。ㄊ小⒆灾螀^(qū)）中已有11個(gè)?。ㄊ?、自治區(qū)）受到該病危害，受影響面積占柑橘總栽培面積的80%以上。嚴(yán)重的產(chǎn)區(qū)，黃龍病直接造成50%以上的減產(chǎn)，甚至引起產(chǎn)區(qū)覆滅，曾經(jīng)的潮州柑（廣東潮汕）、沙糖橘（廣東肇慶四會(huì)、廣寧和德慶）、臍橙（江西贛南）等柑橘種植面積銳減，由原來的2萬hm²以上減到666.67～2000.00hm²，甚至更少。海南瓊中在2006年首次上報(bào)出現(xiàn)柑橘黃龍病，截止目前海南瓊中、澄邁等柑橘產(chǎn)區(qū)均受到黃龍病不同程度的危害，并且發(fā)生日益嚴(yán)重。2008年瓊中綠橙栽培面積為2866.67hm²，2013年栽培面積為1906.00hm²，5年時(shí)間栽培面積減少了30%以上，已經(jīng)嚴(yán)重阻礙海南柑橘產(chǎn)業(yè)的健康發(fā)展。目前尚缺乏黃龍病對(duì)綠橙果實(shí)品質(zhì)影響的相關(guān)研究。為此，筆者通過比較健康和感染黃龍病綠橙果實(shí)的外觀、內(nèi)在品質(zhì)等指標(biāo)，綜合評(píng)價(jià)了黃龍病對(duì)綠橙果實(shí)品質(zhì)的影響，以期為科學(xué)評(píng)估黃龍病對(duì)綠橙產(chǎn)業(yè)造成的損失提供參考。

1材料與方法

1.1材料 供試的瓊中綠橙果實(shí)于2017年11月采自海南省瓊中縣華裕果園，果園管理栽培水平及立地條件基本一致，樹齡13年。健康果實(shí)和黃龍病果實(shí)分別采自健康植株和黃龍病典型癥狀的植株的枝條，于每株樹冠外圍的東、西、南、北、中5個(gè)方位各隨機(jī)采摘2個(gè)果實(shí)，同時(shí)采集所采果蒂附近的葉片帶回實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)，以確定是否感病。將試驗(yàn)分為2組，健康果實(shí)和黃龍病果實(shí)，各自隨機(jī)混勻，各選取20個(gè)果實(shí)用于單果重及果形測(cè)定，各隨機(jī)選取10個(gè)果實(shí)，榨汁后用于果汁率、可溶性固形物、維生素C等內(nèi)在品質(zhì)的測(cè)定。

1.2方法

1.2.1黃龍病病原的檢測(cè)。稱取100mg新鮮葉脈，剪碎，采用植物DNA提取試劑盒并按照說明書提取葉片總DNA。設(shè)置ddH20為空白對(duì)照，以感病樣品DNA為陽(yáng)性對(duì)照，健康樣品DNA為陰性對(duì)照，利用黃龍病病原的特異性引物011/012對(duì)樣品進(jìn)行PCR檢測(cè)，以判斷植株中是否存在黃龍病病原菌。

1.2.2外觀及內(nèi)在品質(zhì)的測(cè)定。采用電子天平稱量單果質(zhì)量，果實(shí)剝皮榨汁后稱量果皮質(zhì)量及殘?jiān)|(zhì)量，計(jì)算可食率和出汁率；電子游標(biāo)卡尺測(cè)量果實(shí)縱徑、橫徑及果皮厚度，計(jì)算出果形指數(shù)（縱徑與橫徑的比值），測(cè)定果實(shí)硬度，沿果實(shí)不同赤道部位測(cè)定3次，取平均值。

榨取果實(shí)汁后，采用4層紗布過濾，采用糖酸折射儀測(cè)定可溶性固形物及可滴定酸（以檸檬酸計(jì)）含量，2，6-二氯靛酚鈉滴定法測(cè)定維生素C含量，計(jì)算可食率和出汁率。

可食率=（全果質(zhì)量-全果皮質(zhì)量）/全果質(zhì)量×100%

出汁率=全果汁質(zhì)量/全果質(zhì)量×100%

1.3數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì) 采用Excel2007軟件進(jìn)行試驗(yàn)數(shù)據(jù)處理，采用SPSS19.0軟件進(jìn)行差異顯著性分析。

2結(jié)果與分析

2.1黃龍病菌的分子檢測(cè) PCR檢測(cè)試驗(yàn)結(jié)果表明，具有黃龍病典型癥狀植株上采集的葉片均能擴(kuò)增出目的條帶，而健康植株上采集的葉片均未能擴(kuò)增出目的條帶，該結(jié)果從分子水平上證實(shí)，從健康綠橙植株上采集的葉片未感染病原菌，而從黃龍病樹上采集的葉片上都能檢測(cè)到病原菌（圖1）。

2.2黃龍病對(duì)柑橘果實(shí)品質(zhì)的影響

2.2.1黃龍病對(duì)綠橙外觀品質(zhì)的影響。由表1可知，與健康綠橙相比，感病綠橙果實(shí)的縱橫徑、單果重顯著減小，而果皮變厚、果皮率、殘?jiān)省⒐麑?shí)硬度顯著增加。其中，健康果形和感病果形上無明顯差別，接近圓形。健康的果實(shí)平均單果重達(dá)161.6g，明顯重于感病果實(shí)，感病果實(shí)單果重僅為93.5g。此外，健康果實(shí)和感病果實(shí)在果皮占比和硬度上差異顯著。這些指標(biāo)均表明，黃龍病對(duì)綠橙果實(shí)外觀品質(zhì)影響較大。

2.2.2黃龍病對(duì)綠橙果實(shí)內(nèi)在品質(zhì)的影響。由表2可知，黃龍病對(duì)綠橙內(nèi)在品質(zhì)的影響極顯著。感病綠橙果實(shí)可溶性固形物、維生素c含量及固酸比顯著降低，可滴定酸含量顯著升高。健康果實(shí)和感病果實(shí)在出汁率和可食率上差異顯著，健康果實(shí)的出汁率和可食率分別為48.60%和80.56%，而感病果實(shí)的出汁率和可食率分別僅為36.29%和71.44%。

3結(jié)論與討論

瓊中綠橙是海南中部地區(qū)重要的特色優(yōu)勢(shì)經(jīng)濟(jì)作物，成為當(dāng)?shù)剞r(nóng)民增加經(jīng)濟(jì)收入的重要來源，綠橙栽培面積及產(chǎn)量占全省柑橘橙柚栽培面積和產(chǎn)量的比例分別為36.26%和21.41%。瓊中綠橙產(chǎn)業(yè)已成為海南柑橘產(chǎn)業(yè)重要的組成部分。近年來黃龍病重創(chuàng)海南柑橘產(chǎn)業(yè)，瓊中綠橙也不能幸免。據(jù)統(tǒng)計(jì)，自發(fā)現(xiàn)黃龍病以來，發(fā)病嚴(yán)重的果園發(fā)病率在80%以上，甚至出現(xiàn)毀園現(xiàn)象，幾萬株綠橙被砍，說明黃龍病已嚴(yán)重威脅瓊中綠橙產(chǎn)業(yè)的健康發(fā)展。目前，關(guān)于黃龍病對(duì)瓊中綠橙品質(zhì)影響的研究較少。該研究通過試驗(yàn)數(shù)據(jù)定量分析了黃龍病對(duì)瓊中綠橙果實(shí)品質(zhì)的影響，結(jié)果表明，柑橘黃龍病對(duì)瓊中綠橙的果實(shí)外在品質(zhì)有顯著影響。與健康果實(shí)相比，感病果明顯變輕、變小，果皮變厚，殘?jiān)?，果?shí)變硬；感病綠橙果實(shí)單果重顯著降低，健康的果實(shí)平均單果重達(dá)161.6g，而感病果實(shí)單果重僅為健康果實(shí)單果重的60%，感病果實(shí)果皮變厚，果實(shí)變硬，果皮率、殘?jiān)曙@著增加。

該研究還對(duì)健康和感病綠橙果實(shí)可溶性固形物、維生素c含量等的差異進(jìn)行了比較，相對(duì)于健康植株的果實(shí)，感病植株上采摘的果實(shí)可溶性固形物含量降低，可滴定酸含量升高，固酸比顯著降低，同時(shí)出汁率和可食率也顯著降低。與前人在沙糖橘、貢柑、蕉柑、瓦倫西亞橙、哈姆林橙上的研究結(jié)果相似。但Bassanezi等對(duì)健康ValenciaAmerica-na甜橙和感病甜橙的TSS含量、酸度以及固酸比對(duì)比發(fā)現(xiàn)其差異并不顯著，2類果實(shí)的出汁率相當(dāng)，差異不顯著，但對(duì)巴西甜橙研究發(fā)現(xiàn)，哈姆林、瓦倫西亞等甜橙品種感黃龍病后其出汁率明顯降低，而ValenciaAmericana橙感病后出汁率增加。這表明不同柑橘品種感病后品質(zhì)變化的差異性可能與柑橘自身抗病性及栽培條件密切相關(guān)。

綜合分析，黃龍病對(duì)瓊中綠橙的果實(shí)內(nèi)外品質(zhì)都有顯著影響。黃龍病的發(fā)生嚴(yán)重影響了瓊中綠橙的果實(shí)品質(zhì)，阻礙了瓊中綠橙產(chǎn)業(yè)的健康發(fā)展。

該研究對(duì)健康綠橙和感病綠橙果實(shí)可溶性固形物、可滴定酸及維生素C含量等的差異進(jìn)行了比較，尚缺少對(duì)果實(shí)中類黃酮、檸檬苦素類似物、類胡蘿卜素等生物活性物質(zhì)以及礦物質(zhì)等指標(biāo)變化的研究，因此，關(guān)于黃龍病對(duì)綠橙中其他營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)成分的影響仍需進(jìn)一步研究。