王晶晶

本文主要介紹了禽流感病毒的基本特性、流行病學(xué)特征和診斷方法。

中圖分類號(hào)：S855 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：C 文章編號(hào)：1001-0769（2018）11-0001-05

1? 總體介紹

甲型流感病毒不僅感染禽類，還是全球重要的人獸病原體。這些病毒具有復(fù)雜的生態(tài)學(xué)和流行病學(xué)，涉及各種野生、圈養(yǎng)和馴養(yǎng)的禽類宿主以及各種野生和馴養(yǎng)的哺乳動(dòng)物宿主，包括人、豬、馬和狗等。

甲型流感病毒會(huì)引起一系列臨床疾病癥狀。這些癥狀與病毒的致病性以及感染是否限于一個(gè)黏膜表面或是否能夠產(chǎn)生全身性感染有關(guān)。

甲型流感病毒通過(guò)高突變率和基因組片段產(chǎn)生基因和抗原變異，使得該病毒能夠快速改變并適應(yīng)新宿主。事實(shí)上，這種情況可能會(huì)導(dǎo)致“新病毒”在新宿主中迅速達(dá)到地方性流行的程度。該過(guò)程還使病毒適應(yīng)其新宿主，從而獲得一定程度的宿主特異性。

在禽類中，這種屏障還未研究清楚，例如，適應(yīng)雞的病毒通常也會(huì)感染鶉雞類和水禽等其他禽類。

可以使用撲殺、隔離和疫苗接種等方法控制流感。

2? 流感病毒

流感病毒屬于分節(jié)段RNA病毒的正黏病毒科，其中一種是甲型流感病毒。其他兩種為人類流感病毒，包括乙型流感病毒和丙型流感病毒，這兩種病毒往往只感染人類。

所有甲型流感病毒都有8個(gè)不同的基因片段，可編碼至少10種不同的病毒蛋白。其中兩種——血細(xì)胞凝集素（Haemagglutinin，HA）和神經(jīng)氨酸酶（Neuramidase，NA）——用于流感病毒的分類，它們是H5N1等名稱中H和N的來(lái)源。到目前為止，我們已知18種HA蛋白，因此流感病毒有18種亞型，分別為H1至H18。

3? 病毒形態(tài)學(xué)

流感病毒的形態(tài)變化很大，從球形到長(zhǎng)絲狀，后者在病毒的臨床分離株中最常見(jiàn)。

4? 血細(xì)胞凝集素（HA）和神經(jīng)氨酸酶（NA）

血細(xì)胞凝集素蛋白是一個(gè)三聚體，其流感病毒外部脂膜上有明顯刺突，而神經(jīng)氨酸酶蛋白的形狀則更像球形，并且從表面脂膜伸出。

如前所述，這些HA和NA蛋白質(zhì)為亞型分類提供了基礎(chǔ)。目前已知有18種H亞型，它們被命名為H1至H18。

禽流感病毒中最常見(jiàn)的H型是H1、H3、H5、H7和H9。家禽中已發(fā)現(xiàn)H1到H13。野生鳥(niǎo)類中已經(jīng)發(fā)現(xiàn)H1至H16，不包括H14。H1至H10（不包括H8）也已從哺乳動(dòng)物中分離出來(lái)，而H17和H18僅在蝙蝠中發(fā)現(xiàn)。

5? 流感病毒的分離

流感病毒可以在雞胚中生長(zhǎng)，最近開(kāi)始使用細(xì)胞培養(yǎng)物。

然而，對(duì)于禽流感病毒，迄今為止最流行的分離方法仍是使用雞胚，并且雞胚的優(yōu)選日齡為9 d～11 d，以便將測(cè)試材料接種到尿囊腔中。這種方法的一大優(yōu)點(diǎn)是它可以用于高致病性禽流感（High Pathogenic Avian Influenza，HPAI）病毒和低致病性禽流感（Low Pathogenic Avian Influenza，LPAI）病毒。

一些火雞禽流感病毒株在雞胚中生長(zhǎng)不良。這些病毒株不會(huì)凝集雞紅細(xì)胞，因此如果使用血細(xì)胞凝集抑制試驗(yàn)對(duì)這些菌株進(jìn)行血清學(xué)篩選，則試驗(yàn)應(yīng)該使用火雞或豚鼠紅細(xì)胞，而不是雞紅細(xì)胞。

6? 流感病毒的命名

為了給每種分離的禽流感病毒一個(gè)獨(dú)特的名稱，人們使用了一種具有6個(gè)組分的系統(tǒng)給它們命名。

①抗原類型（A、B、C或D）。

②分離病毒的宿主物種。

③分離的地理區(qū)域。

④唯一的參考標(biāo)識(shí)碼。

⑤分離的年份。

⑥其H和N亞型。

例如：

A/雞/加拿大/AVFV2/2004/H7N3

A/雞/普埃布拉/8623-607/1994/H5N2

A/燕鷗/南非/-/1961/H5N9

7? 臨床疾病

家禽上的流感感染可能無(wú)癥狀，但是它們通常會(huì)導(dǎo)致生產(chǎn)損失和各種臨床癥狀，在受影響的雞群中可以造成從輕微到嚴(yán)重的臨床癥狀。

臨床表現(xiàn)與引起呼吸道和/或腸道黏膜感染以及引起全身感染的禽流感病毒相關(guān)。

感染黏膜表面的病毒通常被稱為L(zhǎng)PAI病毒，通常它們的感染不會(huì)造成嚴(yán)重的死亡率。HPAI病毒通常與高死亡率有關(guān)，并且在歷史上，其通常被稱為禽瘟。

LPAI病毒盡管可以產(chǎn)生無(wú)癥狀感染，但它們通常與呼吸道感染有關(guān)，其嚴(yán)重程度可以從輕微到嚴(yán)重。臨床可見(jiàn)采食量和飲水量下降，種雞或蛋雞群中經(jīng)常會(huì)發(fā)生產(chǎn)蛋量下降。這些可能會(huì)對(duì)雞群造成嚴(yán)重的影響，永遠(yuǎn)無(wú)法恢復(fù)到原來(lái)的生產(chǎn)狀態(tài)。該現(xiàn)象經(jīng)常出現(xiàn)在被豬流感病毒感染的火雞種雞群中。

在大型雞群中，LPAI感染可以通過(guò)雞群緩慢地傳播，死亡率低但會(huì)持續(xù)升高?；蛘撸琇PAI感染可能會(huì)導(dǎo)致高死亡率，尤其是在環(huán)境管理不善以及有繼發(fā)感染時(shí)。

LPAI偶爾會(huì)引起內(nèi)臟器官的特定病變。

8? HPAI和LPAI病毒的特征

HPAI病毒僅限于H5和H7亞型。大多數(shù)亞型是LPAI病毒，這些亞型很少突變?yōu)镠PAI病毒。據(jù)認(rèn)為，HPAI病毒來(lái)源于在家禽中長(zhǎng)時(shí)間流行的LPAI病毒。

例如，1983年LPAI在美國(guó)H5型禽流感暴發(fā)之前在賓夕法尼亞家禽群中流行了數(shù)年。1994年墨西哥的H5型禽流感和5年后的意大利H7型禽流感暴發(fā)也出現(xiàn)了類似情況。

LPAI病毒轉(zhuǎn)變?yōu)镠PAI病毒所需的選擇壓力尚不清楚，但該過(guò)程的關(guān)鍵部分是病毒可在雞和火雞等鶉雞中復(fù)制。

人們通常認(rèn)為野生禽類不是HPAI病毒的宿主。然而，人們數(shù)次在野生禽類上發(fā)現(xiàn)了該病毒，例如1961年在南非燕鷗中暴發(fā)該病。在過(guò)去的十年中，H5N1的三次大規(guī)模暴發(fā)都與野生禽類有關(guān)

9? 致病性——宿主和病毒株因素

HPAI病毒會(huì)導(dǎo)致4～6周齡無(wú)特定病原體雞出現(xiàn)較高的死亡率，否則根據(jù)定義，不能將其命名為HPAI。僅僅鑒別為HPAI并不意味著它會(huì)導(dǎo)致其他物種發(fā)病，還需要用HPAI病毒對(duì)這些物種進(jìn)行攻毒試驗(yàn)來(lái)定義。

其中研究得最廣泛的是1997年從香港分離到的雞H5N1型HPAI。

香港97毒株在所測(cè)試的所有鶉雞中都造成了高死亡率，包括雞、火雞、野雞和鵪鶉。在其他物種的試驗(yàn)中，引起的癥狀不太嚴(yán)重，或者在某些情況下，沒(méi)有臨床癥狀。

一些動(dòng)物受到挑戰(zhàn)時(shí)，它們表現(xiàn)出與大腦中病毒復(fù)制位點(diǎn)相關(guān)的神經(jīng)系統(tǒng)癥狀。另一方面，鴨表現(xiàn)出有限的呼吸道病變，并且沒(méi)有任何疾病癥狀。

1997年至2001年間分離的H5N1病毒可以感染兩周齡的鴨，但不會(huì)導(dǎo)致任何發(fā)病率或死亡率。從2002年的一些分離株開(kāi)始發(fā)現(xiàn)有死亡率，最近獲得的分離株具有100%的死亡率。

對(duì)于哺乳動(dòng)物（包括人和豬），自然感染的H5N1型HPAI與嚴(yán)重的非典型肺炎有關(guān)，這表明有呼吸道感染。其他哺乳動(dòng)物，包括雪貂、貓和狗，可能會(huì)發(fā)生病毒的系統(tǒng)傳播，這會(huì)加速死亡。

人們很難對(duì)所有物種中HPAI的致病性進(jìn)行描述，隨著病毒的變化，它引起的疾病的臨床表現(xiàn)也會(huì)發(fā)生變化。

10? 診斷方法

流感病毒的檢測(cè)和診斷可能由于存在疾病/感染，但沒(méi)有明顯的或特征性臨床癥狀而變得復(fù)雜。因此，我們需要求助于實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)。這可能包括尋找抗體或病毒，其取決于目標(biāo)。對(duì)于這兩種類型的檢測(cè)，可做進(jìn)一步檢測(cè)以確認(rèn)病毒亞型或病毒的其他生物學(xué)特征。

檢測(cè)方法在很大程度上是一致的。

11? 樣本類型

口咽或氣管拭子和泄殖腔拭子是最常檢測(cè)的樣本。也可以檢測(cè)組織樣本，但它們不是檢測(cè)LPAI病毒的最佳樣本。

口咽拭子包括擦拭后鼻孔裂隙。這比氣管拭子更佳，因?yàn)椋?/p>

● 可以從鼻竇獲取材料;

● 對(duì)禽類的侵入性較小;

● 不需要較高的操作技能;

● 試驗(yàn)顯示，就獲取流感病毒而言，它們的效果相當(dāng)于氣管拭子。

在大多數(shù)情況下，最好的方法是采用口咽拭子和泄殖腔拭子。然而，作為一般規(guī)則，水禽中的LPAI病毒具有更高的腸道復(fù)制趨勢(shì)，因此病毒將更多地通過(guò)泄殖腔排毒，這意味著可以使用泄殖腔拭子做更多的檢測(cè)。相反，在雞和火雞中，LPAI病毒的復(fù)制更多發(fā)生在呼吸道中，因此會(huì)有較多的病毒脫落到呼吸道，這意味著口咽拭子更合適。

對(duì)于野生禽類，將口咽拭子和泄殖腔拭子放在同一試管中可以增加陽(yáng)性樣本的數(shù)量。通常可以成功地合并拭子。

12? 野生禽類感染

自20世紀(jì)60年代初從南非常見(jiàn)燕鷗中分離出禽流感病毒以來(lái)，各種研究大大增加了我們對(duì)這種病毒在野生禽類中的認(rèn)識(shí)。

這種情況隨著在香港的野生禽類中分離出H5N1型HPAI并隨后擴(kuò)散到非洲和歐亞大陸之后變得更加重要。

13? 宿主范圍

禽流感的宿主從野生水禽（鵝、鴨、天鵝等）到黑腹濱鷸、紅腳鷸和磯鷂，到燕鷗、海鳩和海鷗，到鴿子、野雞、鷓、烏鴉、鶯和啄木鳥(niǎo)，等等不一而足。物種易感性的信息非常有限。而病毒的感染能力、病毒排毒的持續(xù)時(shí)間和主要的排毒途徑會(huì)出現(xiàn)物種間差異。

14? 禽流感的儲(chǔ)存宿主

現(xiàn)在公認(rèn)的是，感染哺乳動(dòng)物和禽類的禽流感病毒來(lái)自野生禽類儲(chǔ)存宿主。野生禽類儲(chǔ)存宿主是為維持流感病毒提供工具的多種群系統(tǒng)。隨著該病毒轉(zhuǎn)移到新宿主群體并在其中進(jìn)化，儲(chǔ)存宿主可能會(huì)發(fā)生變化。

有時(shí)儲(chǔ)存宿主可以重疊。例如，盡管綠頭鴨是野鴨儲(chǔ)存宿主的重要組成部分，但它們也是維持禽流感相關(guān)問(wèn)題的最重要的物種，而且綠頭鴨通常與許多種類的鴨共同生活。一些人認(rèn)為，鴨中禽流感病毒的維持可能取決于不遷徙的、當(dāng)?shù)氐暮瓦h(yuǎn)距離遷徙的亞種群之間的相互作用。

15? 病毒種群的變異

證據(jù)表明，H13和H16型禽流感可以在海鷗群中維持。在鴨、海鷗和濱鳥(niǎo)群中，流行的空間和時(shí)間變異發(fā)生相當(dāng)一致。

這些變異可能與越冬或繁殖區(qū)、當(dāng)?shù)厍蓊惙N類組成和行為以及影響禽類分布的不同環(huán)境因素有關(guān)。例如，人們發(fā)現(xiàn)夏末和初秋的病毒高峰與當(dāng)年孵化的大量易感禽類遷徙前的聚集有聯(lián)系。

16? 傳播周期

禽流感病毒主要通過(guò)糞-口傳播。在鴨中，病毒復(fù)制以腸道為中心，導(dǎo)致糞便排出高濃度的病毒。因此，受污染的水和沉積物可能是感染源。

綠頭鴨可通過(guò)鼻內(nèi)、氣管內(nèi)、眼內(nèi)和腹腔內(nèi)途徑感染，所有這些都可能是因?yàn)榕c受污染的水發(fā)生了接觸。受禽流感病毒污染的地表水或地下水可能是禽群長(zhǎng)期或短期的感染源。

可以影響感染、病毒排毒和與環(huán)境接觸的可能性的宿主因素多種多樣。盡管存在許多野生禽類易感染禽流感病毒，但病毒主要的排毒途徑、排毒持續(xù)時(shí)間和感染病毒的數(shù)量卻因種類而異。

例如，野鴨通常可以排毒28 d，但也有例外，在野生綠頭鴨的實(shí)驗(yàn)性感染期間，病毒排毒的持續(xù)時(shí)間通常不到14 d，大多數(shù)病毒在感染后2 d～6 d排出。

這種較短的排毒期可能與防止反復(fù)感染禽流感病毒有關(guān)。綠頭鴨的田間排毒期估計(jì)為3.1 d～8.3 d。

17? 環(huán)境因素

禽流感病毒的環(huán)境持久性對(duì)這些病毒的傳播和維持的重要性尚不完全清楚。

試驗(yàn)研究表明，禽流感病毒可以在糞便或水中存活很長(zhǎng)一段時(shí)間。較低的水溫、中性pH和低鹽度是增強(qiáng)病毒活性的重要因素。

溫度波動(dòng)、反復(fù)凍融和氨都會(huì)縮短感染期。

18? 病理學(xué)

鴨在感染大多數(shù)禽流感病毒（包括HPAI病毒）時(shí)，只會(huì)發(fā)生亞臨床或非常輕微的癥狀。然而，一些亞洲H5N1型HPAI病毒可以在全身復(fù)制并導(dǎo)致嚴(yán)重的癥狀和死亡。最近，與H5N1型禽流感密切相關(guān)的H5N8型禽流感也導(dǎo)致了死亡。

患病和感染的無(wú)癥狀鴨都會(huì)排出大量的禽流感病毒。

禽流感病毒具有高度的宿主適應(yīng)性。通常在感染時(shí)，這些病毒在野生水禽胃腸道的上皮細(xì)胞中復(fù)制并產(chǎn)生亞臨床感染。有時(shí)，病毒會(huì)從野生水禽傳播到家禽，在家禽上產(chǎn)生亞臨床感染或臨床感染，其特征是呼吸道癥狀，在蛋雞上會(huì)造成產(chǎn)蛋量下降。這些通常是LPAI病毒。有一些H5和H7型LPAI病毒，在家禽中進(jìn)行循環(huán)后會(huì)發(fā)生突變產(chǎn)生HPAI病毒。這些HPAI病毒會(huì)誘發(fā)嚴(yán)重的全身性疾病，在雞和鴨的皮膚、內(nèi)臟和大腦中造成炎癥和壞死。

在田間，禽流感感染的臨床表現(xiàn)受多種因素的影響，包括病毒株、宿主種類和年齡、宿主性別、并發(fā)感染、獲得性免疫環(huán)境因素等。

暴露后有4種可能的結(jié)果——無(wú)感染、無(wú)癥狀感染、輕度癥狀或出現(xiàn)死亡的嚴(yán)重癥狀。

當(dāng)HPAI病毒從水禽傳播到家禽時(shí)，病毒會(huì)變異成一種更具呼吸系統(tǒng)趨向性的毒株。

19? 毒力的遺傳決定

病毒的毒力是其引起疾病的能力，它由病毒生長(zhǎng)、侵入、感染易感細(xì)胞、逃避免疫系統(tǒng)和能夠引起細(xì)胞損傷的能力決定。

這些能力由病毒基因組中單獨(dú)的毒力基因編碼。禽流感病毒的致病性是多基因性狀，其影響宿主和組織趨向性、復(fù)制效率和免疫逃避機(jī)制。