王青芳　夏凱凱　張佳蘭

摘要：B超檢測(cè)技術(shù)應(yīng)用于妊娠羊生產(chǎn)中有利于羊的科學(xué)飼養(yǎng)管理，提高繁殖率。妊娠診斷可通過(guò)直腸或腹壁B超進(jìn)行診斷，在母羊妊娠30 d之后最敏感。妊娠最顯著的特點(diǎn)是胎兒的心跳，其次是胎盤的發(fā)育。在妊娠早期至中期，可以確定胎兒數(shù)，從而估計(jì)產(chǎn)羔數(shù)。此外，在妊娠早期可由生殖結(jié)節(jié)的位置，在妊娠中期由外生殖器決定胎兒的性別。因此，B超診斷技術(shù)有利于不孕羊的淘汰和繁殖決策，可以估計(jì)胎兒數(shù)和識(shí)別胎兒性別，并根據(jù)檢測(cè)結(jié)果在整個(gè)妊娠期給母羊提供適當(dāng)?shù)臓I(yíng)養(yǎng)，最終有利于羊的健康和生長(zhǎng)，提高生產(chǎn)效率和效益。

關(guān)鍵詞：B超檢測(cè)技術(shù)；羊妊娠診斷；胎兒性別識(shí)別；胎兒數(shù)

中圖分類號(hào)：S826 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：B 文章編號(hào)：1007-273X（2018）04-0009-03

隨著養(yǎng)羊業(yè)由粗放飼養(yǎng)管理向集約化飼養(yǎng)轉(zhuǎn)型及羔羊育肥技術(shù)的發(fā)展，品種改良對(duì)優(yōu)良品種的需求增加，繁殖成為養(yǎng)羊業(yè)中最重要的環(huán)節(jié)。妊娠診斷可以提高羊的繁殖效率，減少空懷，降低飼養(yǎng)成本，提高養(yǎng)羊效益。相對(duì)于牛來(lái)說(shuō)，羊的懷孕期短，懷孕后期有可能出現(xiàn)妊娠毒血癥，較多品種的羊一胎多羔，所以羊的妊娠診斷在集約化飼養(yǎng)中特別重要。超聲，也稱超聲波，是超過(guò)人耳聽(tīng)閾的聲波，即每秒振蕩次數(shù)（即振動(dòng)頻率）在20 000赫茲（Hz）以上聲波。超聲檢測(cè)儀是將超聲轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘?hào)，并以波形、光點(diǎn)、聲音等形式表示出來(lái)，形成影像的儀器[1]。超聲檢測(cè)技術(shù)從20世紀(jì)80年代開(kāi)始用于臨床獸醫(yī)檢測(cè)，具有快速、直觀、準(zhǔn)確、無(wú)損傷等特點(diǎn)[2]。獸醫(yī)超聲檢測(cè)儀有幾種型號(hào)。B型（Brightness mode）超聲檢測(cè)儀，簡(jiǎn)稱B型（B-mode）超聲或B超，是將回聲信號(hào)以光點(diǎn)明暗的形式顯示出來(lái)。光點(diǎn)的強(qiáng)弱反映回聲界面反射和衰減超聲的強(qiáng)弱。這些光點(diǎn)、光線、光面構(gòu)成了被探測(cè)部位二維斷層圖像或切面圖像，這種圖像稱為聲像圖[1]。B超檢測(cè)與家畜生產(chǎn)結(jié)合用于家畜的發(fā)情鑒定、早期妊娠診斷、胎兒性別鑒定、卵巢及子宮疾病診斷、胎齡判斷及胎兒發(fā)育情況監(jiān)測(cè)等方面。近年來(lái)，隨著超聲檢測(cè)圖像清晰度的增加以及超聲檢測(cè)儀器的方便攜帶，超聲檢測(cè)技術(shù)在家畜上的應(yīng)用越來(lái)越普遍。在羊方面?zhèn)鹘y(tǒng)的妊娠診斷技術(shù)存在勞動(dòng)強(qiáng)度大，準(zhǔn)確率低等缺點(diǎn)，且不利于空懷羊的重配，因此，B超檢測(cè)技術(shù)應(yīng)用于羊的妊娠，可以提高羊的繁殖效率，減少空懷，降低飼養(yǎng)成本。

1 妊娠羊B超使用方法及注意事項(xiàng)

B超檢測(cè)技術(shù)在羊上可以通過(guò)直腸掃描和腹部掃描進(jìn)行。直腸掃描需要保定羊并掏出直腸內(nèi)蓄積的糞便。檢查者蹲于羊體一側(cè)，探頭涂抹耦合劑后，將探頭緊貼皮膚，朝向盆腔入口方向。因?yàn)樾枰６ㄑ虿⑻图S，比較費(fèi)時(shí)；在直腸掃描技術(shù)不熟練的情況下有可能造成直腸穿孔。腹壁B超檢查時(shí)，讓羊側(cè)臥（左側(cè)臥），經(jīng)潤(rùn)滑的探頭在羊右側(cè)腹股溝從后向前向著腹腔中間進(jìn)行掃描。妊娠早期可在乳房?jī)蓚?cè)和乳房直前的少毛區(qū)掃描，妊娠中后期可在右側(cè)腹壁進(jìn)行定點(diǎn)扇形掃描。在少毛區(qū)檢測(cè)不需要剪毛，側(cè)腹壁檢測(cè)需要剪毛。檢查者也可蹲于羊的臀后，手持探頭從羊兩后肢中間伸向乳房進(jìn)行掃查，側(cè)腹壁被毛過(guò)長(zhǎng)，影響檢測(cè)部位時(shí)可提起檢測(cè)一側(cè)的后肢，暴露檢測(cè)部位。在懷孕早期，妊娠的羊子宮充滿液體，并被瘤胃擠向腹腔右側(cè)，因此在右側(cè)進(jìn)行掃描比較適合。隨著妊娠期的延長(zhǎng)，子宮延伸到腹腔，靠近腹壁，這時(shí)就需要剔除腹壁的羊毛以便探頭與皮膚充分接觸。腹壁B超檢查時(shí)探頭不必進(jìn)入羊體內(nèi)，對(duì)羊的刺激較小，因此相對(duì)于直腸B超檢查用在每只羊上的時(shí)間較少，速度較快。但是，因?yàn)榭吹降淖訉m圖像重疊，因此觀察胎兒數(shù)容易誤差。一般來(lái)說(shuō)，胎兒數(shù)和妊娠診斷的準(zhǔn)確率隨著胎兒數(shù)的增加而降低，但隨著掃描經(jīng)驗(yàn)的增加可以提高診斷準(zhǔn)確性[3，4]。因此，當(dāng)采用腹壁B超檢查時(shí)，需要考慮品種的產(chǎn)羔率、母羊年齡和妊娠階段等因素。

2 早期妊娠診斷

妊娠診斷是羊飼養(yǎng)管理的一部分。及時(shí)準(zhǔn)確的妊娠診斷可以加強(qiáng)羊的飼養(yǎng)管理，提高羔羊成活率。B超檢查發(fā)現(xiàn)子宮具有胚胎植入和胎兒的心跳的特征，說(shuō)明胎兒已經(jīng)生存，以此在羊上可以進(jìn)行早期妊娠診斷。在懷孕的頭20 d里，子宮位于盆腔內(nèi)，與未孕羊子宮位置相同，因此很難區(qū)分母羊是否懷孕[5，6]。由于子宮位置的原因，直腸B超掃描非常適合早期妊娠診斷（一般在妊娠30 d之前），因?yàn)檫@時(shí)B超探頭靠近子宮壁[6，7]。隨著妊娠天數(shù)的增加，子宮延伸到腹壁，腹壁B超掃描圖像受限制，也適合直腸B超掃描方法進(jìn)行妊娠診斷[4，8]。對(duì)同一群羊在妊娠早期通過(guò)直腸和腹壁B超檢查進(jìn)行比較，直腸B超檢查比較費(fèi)時(shí)（分別為2.1 min/只、1.04 min/只），但在妊娠30 d前準(zhǔn)確率高[9]，孕囊長(zhǎng)度與妊娠日齡的關(guān)系較大[10]。然而，近年來(lái)成像技術(shù)的進(jìn)步和曲線探頭的發(fā)展提高了掃描的穿透深度，使腹壁B超掃描的范圍更廣。因此，使用新設(shè)備，腹壁B超掃描進(jìn)行妊娠診斷可與直腸B超掃描相媲美。

不管是直腸B超或腹壁B超掃描，母羊在妊娠40 d之前都能觀察到相同的胎兒發(fā)育特點(diǎn)。妊娠可觀察到的第一個(gè)特征是子宮角發(fā)育，變長(zhǎng)變大，因此可以區(qū)分膀胱和妊娠的子宮。直腸B超掃描時(shí)，在妊娠17～19 d時(shí)可以觀察到增加的子宮液性暗區(qū)[9，11-13]，腹壁B超掃描在妊娠25～28 d時(shí)才能觀察到[4，12]。然而，子宮液性暗區(qū)并不是妊娠的惟一指標(biāo)，子宮液性暗區(qū)也與發(fā)情和子宮異常有關(guān)。伴隨著子宮液性暗區(qū)出現(xiàn)孕囊和胎兒的心跳才能確認(rèn)母羊妊娠。許多報(bào)道關(guān)于羊妊娠15～30 d之間妊娠診斷及胎兒檢測(cè)有差異，可能是B超的型號(hào)、羊的品種、胎兒數(shù)和操作人員技能差異造成的[14]。經(jīng)直腸B超檢查，在妊娠16 d時(shí)可以檢測(cè)到胎兒心跳，在妊娠24～36 d時(shí)，妊娠準(zhǔn)確率達(dá)90%。經(jīng)腹壁B超檢查，在妊娠27～30 d時(shí)可以檢測(cè)到胎兒心跳。另外，多胎比單胎更早檢測(cè)到胎兒，導(dǎo)致B超妊娠診斷時(shí)，多胎比單胎診斷時(shí)間早3 d[4]。

隨著檢測(cè)到胎兒可以觀察到胎盤結(jié)構(gòu)的發(fā)育，胎盤進(jìn)一步確認(rèn)妊娠并建立母嬰連接[11，15]。不管直腸或腹壁B超掃描，綿羊在妊娠32～33 d，可以直觀地看到胎盤，最初呈不規(guī)則形狀出現(xiàn)在子宮壁，在妊娠39～40 d時(shí)，形成中空半球結(jié)構(gòu)[4，11]。類似的，山羊直腸B超掃描，可以看到在妊娠35 d時(shí)胎盤成像為小結(jié)節(jié)，在妊娠42 d后形成胎盤結(jié)構(gòu)[11，16，17]。

另外，妊娠早期，超聲掃描可以觀察到胎兒的四肢、生殖器和臍帶的發(fā)育。在綿羊，妊娠32～33 d時(shí)，可以觀察到肢芽是從胎兒軀干開(kāi)始延伸；在妊娠38 d時(shí)可以觀察到生殖結(jié)節(jié)，在妊娠40 d時(shí)可以觀察到胎兒腹部伸出的臍帶，在妊娠42 d后可以觀察到胎兒的肋骨[4]。在山羊，在妊娠39 d時(shí)可以觀察到臍帶，在妊娠42 d時(shí)可以觀察到肢芽開(kāi)始延伸，在妊娠48 d時(shí)可以觀察到骼結(jié)構(gòu)包括肋骨、脊柱和頭骨[16]。

總之，在確定配種時(shí)間的情況下，在配種后30～40 d進(jìn)行早期妊娠診斷比較準(zhǔn)確；在不知道配種時(shí)間的情況下，可在配種季節(jié)公母羊混群后的75 d，或者在公、母羊分群后的40 d進(jìn)行妊娠診斷[18]。

3 檢查胎兒數(shù)量

妊娠診斷及清楚母羊懷羔數(shù)有利于孕期飼養(yǎng)管理和助產(chǎn)。可以根據(jù)胎兒數(shù)的多少提供母羊適當(dāng)?shù)臓I(yíng)養(yǎng)以滿足胎兒生長(zhǎng)需要，減少飼料成本。已知胎兒數(shù)可以估計(jì)妊娠母羊的預(yù)產(chǎn)期，在妊娠后期監(jiān)控母羊妊娠危險(xiǎn)因子或妊娠毒血癥，并在母羊臨產(chǎn)時(shí)及時(shí)管理。這些技術(shù)應(yīng)用到羊生產(chǎn)實(shí)踐中可以提高羔羊成活率和促進(jìn)出生后的生長(zhǎng)，提高后備母羊質(zhì)量和商品羊的經(jīng)濟(jì)效益。

一般來(lái)說(shuō)，直腸或腹壁B超掃描確定胎兒數(shù)準(zhǔn)確率隨著胎兒數(shù)和妊娠期的增加而降低。在妊娠早期，妊娠診斷時(shí)可以識(shí)別單羔，識(shí)別多羔則要在妊娠31 d后，多羔識(shí)別的準(zhǔn)確率大于80%[4，19-22]。然而，在妊娠70 d后，確定胎兒數(shù)的準(zhǔn)確率下降，因?yàn)橥ㄟ^(guò)B超很難辨別胎兒之間的輪廓[20]。

胎兒損失率使得預(yù)期的胎兒數(shù)減少，導(dǎo)致妊娠早期使用B超高估了胎兒數(shù)，在生產(chǎn)管理中應(yīng)該考慮到這種情況。在羊上，妊娠25 d前胚胎和胎兒損失率最大，達(dá)到20%，妊娠25 d到產(chǎn)羔這段時(shí)間胎兒損失率下降[23，24]。另外，妊娠25 d后，大多數(shù)胎兒的損失導(dǎo)致胎兒數(shù)減少，而不是完全流產(chǎn)[23]。高估胎兒數(shù)量也可能是重復(fù)計(jì)算胎兒導(dǎo)致。在腹壁B超掃描時(shí)，觀察點(diǎn)是子宮交叉部分而不是每個(gè)子宮角。為了避免高估胎兒數(shù)，Jones等[4]以在同一B超屏幕上看到的胎兒數(shù)作為腹壁B超掃描時(shí)的計(jì)數(shù)標(biāo)準(zhǔn)。雙羔可以在妊娠的23～44 d時(shí)觀察到，而三羔則能觀察到的時(shí)間范圍較窄，在妊娠25～34 d?？傊?，胎兒數(shù)預(yù)測(cè)準(zhǔn)確率為78%，用這樣的標(biāo)準(zhǔn)來(lái)確定胎兒數(shù)導(dǎo)致胎兒數(shù)比母羊真正懷胎數(shù)要少，反而使精確飼養(yǎng)管理比較困難。現(xiàn)在技術(shù)的發(fā)展使得B超儀器方便攜帶、靈明度高，適用于生產(chǎn)中檢測(cè)大群羊，并能容易地檢測(cè)母羊懷胎數(shù)。

4 識(shí)別胎兒性別

在妊娠35 d之后，生殖器結(jié)節(jié)的發(fā)展和遷移使得通過(guò)超聲來(lái)辨別胎兒性別成為可能。生殖結(jié)節(jié)向臍帶方向遷移則是雄性的象征，而向尾部遷移則是雌性的象征[25，26]。這種遷移發(fā)生在15 d的時(shí)間內(nèi)，且在綿羊（妊娠35～51 d）比在山羊（妊娠40～55 d）更早觀察到。在同一羊種中，雄性和雌性的生殖器結(jié)節(jié)的遷移發(fā)生的時(shí)間段相同[26]。在綿羊中，鑒定雄性比雌性更容易，100%的雄性單羔在妊娠60～69 d之間能被準(zhǔn)確識(shí)別，而雌性只有77%被準(zhǔn)確識(shí)別[25]。識(shí)別生殖器結(jié)節(jié)位置的能力可以通過(guò)實(shí)踐來(lái)掌握。一旦掌握這項(xiàng)技能，不管任何品種就可以在妊娠早期結(jié)束之后和妊娠中期開(kāi)始之前成功地識(shí)別胎兒性別[26，27]。妊娠50 d之后綿、山羊胎兒性別的識(shí)別主要靠識(shí)別外部生殖器結(jié)構(gòu)，包括陰囊和外陰，因?yàn)樯辰Y(jié)節(jié)已經(jīng)沒(méi)法辨認(rèn)[27]。然而，胎兒性別的準(zhǔn)確性隨著妊娠期的增加而減少，因?yàn)樘何恢玫脑蚝茈y直接看到外生殖器。在山羊中，胎兒性別指數(shù)在單羔和多羔之間沒(méi)有差異[7]。然而，隨著妊娠期的增加，胎兒性別識(shí)別的準(zhǔn)確性下降。即在妊娠40～60 d之間，直腸B超聲檢查胎兒性別的準(zhǔn)確率為93.3%；妊娠61～70 d之間，準(zhǔn)確率下降到81.6%；在妊娠90～109 d準(zhǔn)確率僅為56.8%[7]。由于胎兒性別鑒定比較費(fèi)時(shí)，而母羊懷多羔時(shí)，有利的信息較少，所以在大群的商品羊群中沒(méi)有必要進(jìn)行胎兒性別鑒定，而對(duì)育種群進(jìn)行胎兒性別鑒定有利，例如選留種公羊，培育繁殖群等。

5 小結(jié)

B超檢測(cè)技術(shù)在綿、山羊生產(chǎn)中還沒(méi)有廣泛應(yīng)用。在羊飼養(yǎng)管理比較粗放的條件下，早期妊娠診斷可以預(yù)測(cè)分娩日期和胎兒數(shù)，從而確保母羊妊娠后期及產(chǎn)前的飼養(yǎng)管理。生產(chǎn)中就可以根據(jù)胎兒數(shù)和NRC建議科學(xué)地飼養(yǎng)管理母羊，增強(qiáng)妊娠后期飼喂的準(zhǔn)確性，最終降低飼料成本，可以根據(jù)早孕診斷結(jié)果淘汰不孕羊或重配空懷羊?？傊?，B超診斷技術(shù)用于妊娠羊中可以進(jìn)行早期妊娠診斷、估計(jì)胎兒數(shù)以及鑒定胎兒性別。早期妊娠診斷最好在妊娠30～40 d時(shí)，通過(guò)直腸超聲檢測(cè)的方式來(lái)進(jìn)行準(zhǔn)確率最高。胎兒數(shù)的檢測(cè)在妊娠早期最準(zhǔn)確，多胎最好在同一超聲屏中都能看到胎兒以保證同一胎兒只計(jì)數(shù)一次。在綿山羊妊娠35～60 d時(shí)通過(guò)檢測(cè)生殖結(jié)節(jié)或外生殖器鑒別性別最準(zhǔn)確。

參考文獻(xiàn)：

[1] 熊道煥，王書(shū)林，陳兆英，等.獸醫(yī)超聲診斷學(xué)[M]. 北京： 中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，1992.

[2] GINTHER O J. How ultrasound technologies have expanded and revolutionized research in reproduction in large animals[J].Theriogenology，2014，81：112-125.

[3] FRIDLUND C， HUMBLOT P， BAGE R， et al. Factors affecting the accuracy of pregnancy scanning in ewes[J].Vet Rec，2013，173：607.

[4] JONES A K， GATELY RE， MCFADDEN K K， et al. Transabdominal ultrasound for detection of pregnancy， fetal and placental landmarks， and fetal age before day 45 of gestation in the sheep[J].Theriogenology，2016，85：939-945.

[5] BUCKRELL B C. Applications of ultrasonography in reproduction in sheep and goats[J].Theriogenology，1988，29：71-84.

[6] GARCIA A，NEARY M K，KELLY G R，et al. Accuracy of ultrasonography in early pregnancy diagnosis in the ewe[J].Theriogenology，1993，39：847-861.

[7] AMER H A. Determination of first pregnancy and foetal measurements in Egyptian Baladi goats （Capra hircus）[J].Vet Ital，2008，44：429-437.

[8] KANDIEL M M，WATANABE G，TAYA K. Ultrasonographic assessment of fetal growth in miniature Shiba goats（Capra hircus）[J].Anim Reprod Sci，2015，162：1-10.

[9] 田 超，楊開(kāi)紅. 湖羊體表和直腸超聲妊娠檢查方法對(duì)比[J]. 中國(guó)獸醫(yī)雜志，2015，51（11）：64-65.

[10] PETRUJKIC B T，COJKIC A，PETRUJKIC K，et al. Transabdominal and transrectal ultrasonography of fetuses in Wurttemberg ewes：correlation with gestational age[J].Anim Sci J，2016，87：197-201.

[11] DOIZE F，VAILLANCOURT D，CARABIN H，et al. Determination of gestational age in sheep and goats using transrectal ultrasonographic measurement of placentomes[J].Theriogenology，1997，48：449-460.

[12] PADILLA-RIVAS G R，SOHNREY B，HOLTZ W.Early pregnancy detection by real-time ultrasonography in Boer goats[J].Small Rumin Res，2005，58：87-92.

[13] AMER H A. Ultrasonographic assessment of early pregnancy diagnosis，fetometry and sex determination in goats[J].Anim Reprod Sci，2010，117：226-231.

[14] FRIDLUND C，HUMBLOT P，BAGE R，et al. Factors affecting the accuracy of pregnancy scanning in ewes[J].Vet Rec，2013，173：607.

[15] GANAIE B A，KHAN M Z，ISLAM R，et al. Evaluation of different techniques for pregnancy diagnosis in sheep[J].Small Rumin Res，2009，85：135-141.

[16] KUMAR K， CHANDOLIA R K， KUMAR S， et al. Two-dimensional and three-dimensional ultrasonography for pregnancy diagnosis and antenatal fetal development in Beetal goats[J]. Vet World，2015，8：835-840.

[17] KARADAEV M，F(xiàn)ASULKOV I，VASSILEV N，et al. Ultrasound monitoring of the first trimester of pregnancy in local goats through visualisation and measurements of some biometric parameters[J].Bulg J Vet Med，2016，19：209-217.

[18] BARBAGIANNI M S，IOANNIDI K I，VASILEIOU N G C，et al. Ultrasonographic examination of pregnant ewes：From early diagnosis of pregnancy to early prediction of dystocia[J].Small Ruminant Research，2017，152：41-55.

[19] TAVERNE M A，LAVOIR M C，VAN OORD R，et al. Accuracy of regnancy diagnosis and prediction of foetal numbers in sheep with linear-array real-time ultrasound scanning[J].Vet Q，1985，7：256-263.

[20] GEARHART M A，WINGFIELD W E，KNIGHT A P，et al. Real-time ultrasonography for determining pregnancy status and viable fetal numbers in ewes[J].Theriogenology，1988，30：323-337.

[21] KAREN A，SAMIR H，ASHMAWY T，et al. Accuracy of B-mode ultrasonography for diagnosing pregnancy and determination of fetal numbers in different breeds of goats[J].Anim Reprod Sci，2014，147：25-31.

[22] MEDAN M，WATANABE G，ABSY G，et al. Early pregnancy diagnosis by means of ultrasonography as a method of improving reproductive efficiency in goats[J].J Reprod Dev，2004，50：391-398.

[23] DIXON A B，KNIGHTS M，WINKLER J L，et al. Patterns of late embryonic and fetal mortality and association with several factors in sheep[J].J Anim Sci，2007，85：1274-1284.

[24] SAMIR H，KAREN A，ASHMAWY T，et al. Monitoring of embryonic and fetal losses in different breeds of goats using real-time B-mode ultrasonography[J].Theriogenology，2016，85：207-215.

[25] COUBROUGH C A，CASTELL M C.Fetal sex determination by ultrasonically locating the genital tubercle in ewes[J].Theriogenology，1998，50：263-267.

[26] AZEVEDO E M，DOS SANTOS M H，F(xiàn)ILHO C R，et al. Migration time of the genital tubercle in caprine and ovine fetuses：comparison between breeds， sexes and species[J].Acta Vet Hung，2009，57：147-154.

[27] DE FREITAS NETO L M，DOS SANTOS M H，DE AGUIAR FILHO C，et al. Ultrasonographic fetal sex identification in pregnant sheep derived from natural mating and embryo transfer[J].J Reprod Dev，2010，56：347-350.