夏如楓 樊雪怡 江 瀅 沈思婷 韓 偉
(華東理工大學(xué)藥學(xué)院中藥現(xiàn)代化工程中心,上海200237)
《本草綱目》李時珍曰:“茶苦而寒,陰中之陰,沉也,降也,最能降火”。茶葉在我國歷史悠久,種植范圍廣,大多種植于云南、貴州和四川一帶。
茶葉作為一種傳統(tǒng)的保健性飲品,具有降低心腦血管發(fā)病率和死亡風(fēng)險,降低膽固醇和血壓等眾多功效。
茶葉含有茶多酚、咖啡因、茶色素、茶多糖、γ-氨基丁酸等多種成分。茶多酚(簡稱TP)是一種多羥基化合物,約占茶葉干重的25%,具有抗菌抗病毒、抗腫瘤、防治心血管疾病等藥理作用。由于茶多酚具有抗氧化性極強(qiáng)、毒副作用小、無異味等特點(diǎn),因此被廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)及食品工業(yè)中。
茶多酚包括兒茶素、黃酮類化合物、花青素、酚酸四大類化合物,其中兒茶素是茶多酚的主要成分。兒茶素是一類黃烷-3-醇衍生物,兒茶素類主要包括兒茶素、表兒茶素、表沒食子兒茶素等,其中表沒食子兒茶素沒食子酸酯(EGCG)是從茶葉中提取的最主要的活性物質(zhì)。
本文就國內(nèi)外學(xué)者對茶多酚的藥用價值、提取分離技術(shù)及其體外抗氧化活性研究進(jìn)行概述和探討。
癌癥的發(fā)病機(jī)制十分復(fù)雜,受控于多種因素與基因,而基因的表達(dá)涉及多種酶、生長因子、轉(zhuǎn)錄因子和信號傳導(dǎo)因子等。據(jù)研究調(diào)查顯示,茶多酚對大部分腫瘤,尤其是惡性腫瘤具有抑制作用。茶多酚的抗癌機(jī)制主要是抑制腫瘤細(xì)胞增殖、誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡分化、調(diào)節(jié)機(jī)體免疫系統(tǒng)等。但是,關(guān)于茶多酚對分子機(jī)制及信號通路[1]等方面的機(jī)理還沒有較確切的結(jié)論,尚待進(jìn)一步探索。另外,茶多酚在治療腫瘤時均使用口服途徑,不同給藥途徑的治療效果還有待研究[2]。
現(xiàn)今社會,電子產(chǎn)品的不斷增多使人們暴露在各種手機(jī)、電腦、電視塔、電磁波發(fā)射塔的輻射危害之中。長期暴露在輻射之下,細(xì)胞可能會被大面積殺傷甚至產(chǎn)生變異,從而引發(fā)一系列的疾病,如視力疾病、白血病、心腦血管疾病等。根據(jù)研究結(jié)果顯示,茶多酚主要是通過清除自由基與調(diào)節(jié)基因表達(dá)及蛋白合成來抗輻射的[3],但是茶多酚并沒有被開發(fā)利用為抗輻射藥物,只是在臨床上起到了輔助的作用。
茶多酚的抗輻射作用深入機(jī)理及應(yīng)用還需要進(jìn)一步研究。
茶多酚可以作用于與自由基有關(guān)的酶,抑制氧化酶系,激活抗氧化酶系;同時也可以直接作用于自由基,清除無機(jī)自由基和脂自由基;也可以與誘導(dǎo)氧化過程的過渡金屬離子,如鐵離子、銅離子、鈣離子等絡(luò)合[4]。茶多酚作為一種天然的抗氧化劑,目前多用于食品的保鮮保存和抗衰老、抗輻射、抗腫瘤等醫(yī)學(xué)應(yīng)用中,茶多酚的抗氧化作用也是茶多酚最為重要的一項應(yīng)用。
茶多酚抗菌抗病毒的機(jī)理尚不完全清楚,普遍認(rèn)為是茶多酚通過破壞細(xì)菌或病毒的結(jié)構(gòu),并與其中的DNA或RNA結(jié)合,來抑制細(xì)菌或病毒的增長繁殖。此外,茶多酚廣譜抗菌抗病毒、低毒、高效,且不易使病菌產(chǎn)生耐藥性[5],有很好的臨床抗菌抗病毒應(yīng)用前景。
如今,心腦血管疾病已成為造成死亡的重要疾病之一。越來越多的研究結(jié)果表明,常喝茶葉對預(yù)防心腦血管疾病有著顯著的作用。心腦血管所發(fā)生的主要疾病有冠心病、高血壓、腦栓塞、動脈粥樣硬化等。茶葉中的茶多酚可以降低血脂水平,從而保護(hù)心腦血管;可以降低使血凝黏度增強(qiáng)的血漿纖維蛋白原,溶解血栓,抑制動脈粥樣硬化;可以降低血壓,擴(kuò)張血管;同時也有保護(hù)心肌損傷的作用[6]。
溶液浸提法是利用茶葉中不同化合物在溶劑中的溶解度存在差異進(jìn)行提取分離的。傳統(tǒng)的溶液浸提法使用熱水為溶劑,后來因其提取率低、產(chǎn)品易氧化、耗時長等原因,逐漸使用有機(jī)溶劑進(jìn)行提取。茶多酚的提取工藝流程:用乙醇溶液浸提茶葉中的茶多酚,經(jīng)真空濃縮后,用氯仿萃取去除咖啡堿等雜質(zhì),干燥后再用乙酸乙酯進(jìn)行萃取除去色素,最后真空濃縮干燥回收得到粗品。該方法結(jié)果穩(wěn)定,但工藝復(fù)雜、產(chǎn)率較低,并且使用多種有機(jī)溶劑,能量消耗大,生產(chǎn)成本高。
黃秋森[7]用該方法進(jìn)行了茶多酚生產(chǎn)的工業(yè)試驗,通過設(shè)計單因素試驗,確定了較優(yōu)的提取條件:用75%的酒精浸提茶多酚,氯仿3級萃取去除雜質(zhì),乙酸乙酯3級萃取純化,干燥條件為使用質(zhì)量濃度為1.06~1.10kg/L的料液進(jìn)行霧化,霧化料液與熱風(fēng)混合接觸,控制熱風(fēng)的進(jìn)口溫度為180~220℃,出口溫度為90~110℃。最后產(chǎn)品得率達(dá)6.1%~12.6%。
微波輔助提取,又稱微波萃取,主要原理是微波輻射過程中產(chǎn)生的高頻電磁波使細(xì)胞內(nèi)部溫度迅速升高,細(xì)胞破裂,有效成分溶解;在微波場下,可加強(qiáng)萃取成分的驅(qū)動力,縮短萃取時間。這種方法提取率高、操作簡便、高效、節(jié)約溶劑,是近年來提取中藥成分的一種重要手段。在微波輔助提取茶多酚時,因微波產(chǎn)生高溫,茶多酚組分EGCG和ECG易發(fā)生異構(gòu)化,含量降低。但因微波萃取作用時間短,茶多酚下降的含量仍遠(yuǎn)少于熱水浸提法。
汪興平[8]等人通過正交試驗研究茶葉在不同微波條件下提取茶多酚的浸出效果,得到最佳浸提條件:茶葉平均粒徑為0.246mm,料液比為1:20,再用50℃水浴浸提2次,微波浸提2次,每次3min,最后茶多酚的浸出率達(dá)86.33%。
超聲波提取的原理普遍認(rèn)為是空化效應(yīng)、熱效應(yīng)和機(jī)械作用。超聲波利用其空化作用使細(xì)胞在溶劑中破裂,以便細(xì)胞中的化學(xué)成分溶于溶劑;利用其熱效應(yīng)使植物內(nèi)部溫度升高加速有效成分的溶解,以此來提高提取率。超聲波提取法的有機(jī)溶劑用量少、成本低、操作簡便,有效縮短了浸提時間,且避免了物質(zhì)長時間的高溫氧化。
陳素艷[9]等人通過單因素試驗法探究了超聲波提取茶多酚的工藝,得到最佳操作條件:茶葉粒數(shù)小于40目,用70%的乙醇作為浸提劑,pH值為1~2,浸提時間為40min,料液比為1:10。兩次超聲波輻射浸提后的提取率達(dá)89.2%。
劉渠道[10]等人通過響應(yīng)面法優(yōu)化超聲波輔助提取茶多酚的工藝。為了降低生產(chǎn)成本,采用水為浸提溶液提取茶多酚。首先設(shè)計單因素試驗,考察提取溫度、超聲波處理時間、超聲波功率、液料比4個因素,然后在此基礎(chǔ)之上設(shè)計四因素三水平的響應(yīng)面法,分析并確定最佳的提取工藝:超聲提取溫度71℃,提取時間30min,超聲功率800W,液料比16:1。最后得到的茶多酚提取率為22.89%,較熱水浸提法,提取率有了較大的提升。
離子沉淀法利用的是被提取物質(zhì)可以和某些物質(zhì)絡(luò)合形成沉淀的原理。提取茶多酚時常用無機(jī)鹽作為沉淀劑,先將茶葉浸提后加入沉淀劑沉淀分離,再加入酸溶解,最后萃取干燥,得到茶多酚。離子沉淀法操作簡便、易于沉淀及萃取、成本低,對工業(yè)生產(chǎn)有一定的意義。但是該方法在沉淀、轉(zhuǎn)溶等過程中茶多酚有較大的損失,且沉淀時pH值較難控制,茶多酚易氧化。
楊曉萍[11]等人利用Zn2+作為沉淀劑提取茶多酚。他們通過探究發(fā)現(xiàn),酸性環(huán)境不適合茶多酚-Zn絡(luò)合物的形成,而茶多酚在堿性條件下不穩(wěn)定,易發(fā)生氧化反應(yīng),故pH值調(diào)節(jié)為7.0較好。試驗中選擇茶多酚與鋅鹽質(zhì)量比為1:3,沉淀20min,沉淀完全后采用4mol/L的HCl以1:4的料酸比轉(zhuǎn)溶,轉(zhuǎn)溶15min。最后茶多酚經(jīng)純化得到的產(chǎn)率為23.04%,純度達(dá)90%。
余兆祥與王筱平[12]進(jìn)行了復(fù)合型沉淀劑提取茶多酚的研究。Zn2+、Al3+沉淀劑被認(rèn)為是較適宜的弱酸性沉淀劑,將兩者復(fù)合后的茶多酚產(chǎn)率比單一沉淀劑高,其最佳提取工藝條件:復(fù)合沉淀劑的用量為15g/100g茶葉末,沉淀pH值為5.5~6.2,沉淀30min,獲得了提取率為10.4%、純度大于96%的淡黃色茶多酚晶體。
超臨界萃取法利用介于氣液之間的一種物態(tài)作為萃取劑,通過改變萃取劑流體的壓力和溫度,在超臨界的狀態(tài)下,將流體與待分離的物質(zhì)接觸,使其有選擇性地按極性大小、沸點(diǎn)高低和分子量大小,把不同的物質(zhì)依次萃取出來。超臨界流體一般選用CO2作為溶劑,因為其不活潑,在萃取過程中不易發(fā)生化學(xué)反應(yīng),且無毒、無味、不易燃,較安全。此方法操作簡便,易于分離,試驗過程較安全環(huán)保,試驗成本低,具有良好的開發(fā)應(yīng)用前景。
王朝瑾[13]等人通過超臨界CO2萃取茶葉中的茶多酚。他們將超臨界流體加熱至適當(dāng)溫度,調(diào)節(jié)壓力至所需要的值,經(jīng)過靜態(tài)萃取、動態(tài)萃取收集萃取物,發(fā)現(xiàn)萃取出的CO2只需進(jìn)行簡單的真空冷凍干燥就可以得到兒茶素含量達(dá)77.35%的茶多酚制品。他們后續(xù)設(shè)計了正交試驗,探究壓力、溫度、時間等條件對萃取率的影響,得到最佳萃取條件:壓力35MPa,釜溫50℃,靜態(tài)萃取1h,動態(tài)萃取1h,選擇65%的乙醇溶液作為夾帶劑,茶多酚的萃取率達(dá)10.5%。同時,他們發(fā)現(xiàn)萃取率大小還取決于萃取速率與有關(guān)的分子擴(kuò)散、流動形態(tài)和夾帶劑等因素,在實際生產(chǎn)環(huán)節(jié)受物料量與反應(yīng)釜容積等因素的影響,故試驗還可進(jìn)一步優(yōu)化。
酶是一種高效專一的生物催化劑。合適的酶能分解細(xì)胞壁的纖維素、半纖維素及果膠,從而破壞細(xì)胞壁,加快有效成分溶出細(xì)胞的速率。酶解法提取率高,對兒茶素抗氧化活性造成的損失少,步驟簡單,具有廣闊的應(yīng)用前景。
張衛(wèi)紅[14]等人研究所得復(fù)合酶的最佳提取工藝條件為:酶添加量0.15%,一級酶解提取80min,二級水提取20min,溫度50℃,pH值范圍4.5~5.5。復(fù)合酶解法的茶多酚提取率可高達(dá)98%以上,茶多酚中兒茶素的相對含量較沸水提取法高出9%~10%。
在提取過程中,酶解法也經(jīng)常與其他方法聯(lián)用。舒紅英[15]等人采用了復(fù)合酶與微波聯(lián)合輔助法提取綠茶中的茶多酚,通過設(shè)計單因素試驗和正交試驗,確定了最佳提取工藝:在50℃時,用復(fù)合酶酶解40min,然后用500W的微波輻射8min,用25%的乙醇作為提取劑,控制料液比為1:30。當(dāng)復(fù)合酶法與微波萃取法聯(lián)用時,提取時間明顯縮短,提取率較單一提取法有了較大提升。
鹽析法是指在溶液中加入大量的無機(jī)鹽,促使高分子物質(zhì)的溶解度降低,以沉淀的形式析出,從而達(dá)到分離的目的。常用的無機(jī)鹽有硫酸鎂、硫酸鈉、硫酸銨等。現(xiàn)階段鹽析法主要用于蛋白質(zhì)的分離純化。
嚴(yán)明潮[16]等人探究了鹽析對茶多酚質(zhì)量的影響,他們發(fā)現(xiàn)適當(dāng)增加鹽濃度有利于茶多酚的主要成分脂溶性的兒茶素及兒茶素總量的提高,但達(dá)到一定的濃度后,鹽濃度的增加不利于兒茶素品質(zhì)的提高。同時,鹽析后茶多酚制品的抗潮性能有所下降,如何解決這一問題還有待研究。
樹脂吸附法是利用樹脂的吸附特性和有選擇性的洗脫劑來實現(xiàn)與其他浸提組分的分離,根據(jù)所采用的樹脂類型的不同,可分為吸附柱分離法、離子交換柱分離法和凝膠分離法。樹脂吸附法的重點(diǎn)是選擇合適的吸附劑和洗脫劑,吸附劑的吸附容量和分辨率、洗脫劑的洗脫能力決定了最后的提取率。該方法無污染,樹脂可反復(fù)利用,整個過程耗能少、成本低、工藝簡單。若要將該方法運(yùn)用于工業(yè)化生產(chǎn)中,則需要選擇吸附量大、再生容易、價格低廉的吸附劑。
董文賓[17]等人通過HZ802吸附樹脂、LSA-10吸附樹脂、NKA-2吸附樹脂提取茶多酚,比較發(fā)現(xiàn),NKA-2更適合作為茶多酚的吸附劑,得到最佳浸提方案:用7倍于茶末質(zhì)量的80%乙醇作為浸提溶劑,調(diào)節(jié)pH值為3,在70~80℃條件下浸提2次,每次30min,最后得到的產(chǎn)物提取率為13.65%,純度可達(dá)94.72%。
膜分離技術(shù)是指在分子水平上不同粒徑分子的混合物在通過半透膜時選擇性分離。分離膜可以根據(jù)孔徑大小分為微濾膜(0.1~1μm)、超濾膜(0.05μm~1nm)、納濾膜(幾納米)、反滲透膜等。膜分離技術(shù)是一門在20世紀(jì)60年代后迅速崛起的新型技術(shù),可用于分離、濃縮純化和精制等工藝中,因其具有節(jié)能環(huán)保、高效、過程簡單、易于控制等優(yōu)點(diǎn),被廣泛應(yīng)用于食品、醫(yī)藥、生物、化工等各個領(lǐng)域。
孫艷娟[18]等人設(shè)計試驗提取茶多酚,并比較了不同分離膜在茶多酚提取工藝中的效果,他們首先用熱水3次浸提,通過微濾膜、超濾膜、納濾膜、反滲透膜進(jìn)行微濾除雜、超濾除雜、納濾除雜、反滲透除雜,比較茶多酚的含量,最后再進(jìn)行膜的清洗,發(fā)現(xiàn)微濾膜用于茶多酚浸提液的初步除雜效果不明顯,造成一部分功能喪失;超濾膜可有效地澄清茶多酚浸提液,固體雜質(zhì)去除率高,可以使絕大部分茶多酚通過;納濾膜可以較好地截留有機(jī)物而讓無機(jī)鹽通過,但平均通量與對茶多酚的截留率偏低;反滲透膜的濃縮效果好,但截留了幾乎所有的離子。最后得出結(jié)論:應(yīng)組合設(shè)計合適的膜工藝路線并結(jié)合其他分離純化技術(shù),以提高提取物純度。
柱層析法是一種將固定相放于柱內(nèi),樣品作為流動相從而達(dá)到分離目的的一種色譜法。柱色譜主要分為吸附柱色譜和分配柱色譜,柱填料和洗脫劑的選擇是分離的關(guān)鍵。試驗中分配層析常常選擇硅膠和氧化鋁作為填料。柱色譜法一般只是粗分離,因其分離效果普通、分離時間較長,分離茶多酚時一般不選擇這種方法。
錢驊[19]等人通過試驗對比含有較多酰胺基的樹脂與含少量酰胺基的樹脂吸附,以及調(diào)節(jié)最后洗脫液的pH后得到的茶多酚純度,最后選擇酰胺基含量多的樹脂分子作為吸附劑,水洗至無色后,用pH值為8.5的乙醇溶液作為洗脫劑洗脫,回收乙醇得到成品。
大孔吸附樹脂法是運(yùn)用大孔吸附樹脂從原料中有選擇性吸附得到所需要的成分,是一種常見的純化中藥有效成分的方法。在分離過程中,根據(jù)原料和產(chǎn)物不同的化學(xué)性質(zhì),吸附條件和解吸附條件成為分離的關(guān)鍵。大孔吸附樹脂具有良好的大孔網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)和較大的比表面積,因此物理化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定、吸附容量大、吸附速率快且可重復(fù)使用。該方法操作簡便、設(shè)備簡單、成本低、產(chǎn)率高,現(xiàn)多運(yùn)用于醫(yī)學(xué)、化工等各個領(lǐng)域。
王平[20]等人運(yùn)用HPD-600大孔吸附樹脂分離茶多酚。他們研究了HPD-600大孔吸附樹脂對茶多酚的靜態(tài)吸附、動態(tài)吸附和洗脫劑的影響。最后發(fā)現(xiàn),在上柱之前用乙醇溶液除去粗提溶液中的雜質(zhì),可增加樹脂的使用壽命;洗脫時用80%的乙醇溶液洗脫,得到的茶多酚純度為95%,重要活性成分EGCG的含量大于40%。
葉鶴琳[21]等人研究了離子液體1,3-二甲基-咪唑四氟硼酸修飾的大孔樹脂對茶多酚的吸附機(jī)理,發(fā)現(xiàn)其對EGCG的吸附容量最大,原因在于EGCG在樹脂上的吸附作用以氫鍵為主。該研究結(jié)果可以用于分離茶多酚中的EGCG,提高其產(chǎn)率。
HPLC制備柱分離法常被稱為高壓液相制備分離,這種方法與柱層析類似,但加壓后提高了流速,分離的效果更好。該方法首先采用柱色譜法得到粗品,然后經(jīng)HPLC制備柱分離得到純度更高的兒茶素單體。此外,HPLC法常被用來在試驗中分析茶多酚中兒茶素的組分。
張建勇[22]等人為了探究兒茶素組分對化學(xué)氧化形成茶黃色的影響機(jī)理,運(yùn)用HPLC制備柱分離茶多酚,在選擇了合適的分離柱(SephadexLH-20)、上樣濃度、洗脫劑和洗脫流速后,分離得到了兒茶素單體,后經(jīng)過柱色譜二次分離得到了試驗所需要的原料EGC和ECG。
高速逆流色譜法簡稱HSCCC,是一種連續(xù)高效的色譜分離技術(shù),其固定相和流動相都是液體,不需要任何的固體物質(zhì),克服了不可逆吸附造成樣品損失的問題。這項分離技術(shù)具有快速、高效、綠色環(huán)保等優(yōu)點(diǎn),目前中藥成分的分離較多選用這種方法。但是因其成本高,得到的單體較少,不適合工業(yè)化生產(chǎn)。
杜琪珍[23]等人使用HSCCC法分離茶多酚的單體兒茶素。他們首先用傳統(tǒng)有機(jī)溶液進(jìn)行粗提,然后使用單一高效液相色譜系統(tǒng)進(jìn)行色譜分離,對比薄層色譜法分析結(jié)果,通過分析色譜圖上各個峰所代表的成分發(fā)現(xiàn),該方法能基本將茶多酚中的兒茶素單體分離出來,但還有較多的不明雜質(zhì)存在,并且當(dāng)進(jìn)樣量達(dá)到1kg時,兒茶素單體以及雜質(zhì)峰有較多重疊,不便分離,但若將兩臺機(jī)器串聯(lián)使用,則能一次分離獲得高純度的兒茶素單體。
侯善欣[24]等人采用HSCCC分離制備了茶多酚中的兩種黃酮物質(zhì)。他們以茶多酚為原料,第一次用高速逆流色譜從茶多酚中富集黃酮組分;第二次再通過相同的方法分離出兩種黃酮類單體,分離出來的單體純度均大于99%。
茶多酚作為一種天然的抗氧化活性物質(zhì),可以抑制或清除自由基,從而達(dá)到抗衰老、防止癌癥發(fā)生的目的。茶多酚具有多個活潑的羥基氫,能夠提供質(zhì)子與體內(nèi)過量的自由基結(jié)合,而其本身被氧化形成酚氧自由基,此類自由基由于含有鄰苯二酚結(jié)構(gòu)而具有穩(wěn)定性,進(jìn)而抑制了原來自由基的連鎖反應(yīng)。
李林分別測定D0、Ds、Dr,按式(1)計算DPPH自由基清除率Y1,利用系列溶液的清除率繪制曲線,由曲線讀取DPPH清除率為50%時所需茶多酚溶液的濃度,記為IC150,以IC150值表示茶多酚清除DPPH活性,IC150值越小表示清除能力越強(qiáng)。
式中Y1——DPPH自由基清除率;
D0——2.5mL6.5×10mol/LDPPH溶液和1.5mL體積分?jǐn)?shù)為50%的乙醇混勻20min后,于1cm比色皿中的測定值(517nm);
Ds——2.5mL6.5×10mol/LDPPH溶液和1.5mL待測試樣溶液的測定值;
Dr——2.5mL體積分?jǐn)?shù)為50%的乙醇和1.5mL待測試樣溶液的測定值。
胡蓉[26]通過Fenton反應(yīng)產(chǎn)生了-OH,再借助自由基氧化水楊酸鈉,從而獲得2-二羥基苯甲酸鈉和3-二羥基苯甲酸鈉,再根據(jù)其在510nm處的吸光值來反映·OH的量:吸光值越小,就表示·OH量越少,進(jìn)而表明其清除效果越好。
I.GILCIN[27]按照Oyaizu的方法測定茶多酚的還原能力,在還原能力分析中,反應(yīng)產(chǎn)物在700nm處的吸光度越大,表明樣品的還原能力越大。還原力與抗氧化活性存在很大的相關(guān)性,還原力越強(qiáng),表明被測樣品的抗氧化活性越好。
在測定茶多酚的抑制豬油氧化能力時,胡蓉[26]選擇純豬油、VE的甲醇溶液來進(jìn)行對照,按式(2)計算過氧化值,根據(jù)試驗結(jié)果可知,茶多酚抑制豬油氧化的能力遠(yuǎn)大于VE的相應(yīng)能力,在測試期限內(nèi),豬油基本沒有發(fā)生明顯氧化。
式中POV——過氧化值,mmol/kg;
V1——用于試驗測定的硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液體積,mL;
V0——用于滴定空白的硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液體積,mL;
C——硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度,mol/L;
m——試樣質(zhì)量,g。
李林[25]在超臨界CO2提取法中,利用茶多酚與乙酸維生素E及VC清除O2-1的活性,將清除率為50%時所需茶多酚的濃度記為IC250,IC250分別為0.54mg/mL、0.62mg/mL、0.03mg/mL,而且茶多酚與VE及VC清除O2-1的活性都隨著濃度的增加而增加。由此可見,SCF-CO2萃取茶多酚的清除O2-1活性稍強(qiáng)于VE而明顯弱于VC。
茶多酚是茶葉中多酚類物質(zhì)的總稱,包括黃烷醇類、花色苷類、黃酮類、黃酮醇類和酚酸類等,主要為黃烷醇(兒茶素)類。茶多酚具有抗腫瘤、抗毒抗炎、降低心腦血管疾病發(fā)病率、提高免疫能力等藥理作用,但目前大多用于輔助治療,還沒有被開發(fā)為一種獨(dú)立的藥物使用。
從茶葉中提取茶多酚的技術(shù)手段雖然眾多,在工業(yè)上常使用有機(jī)溶劑提取法和金屬離子沉淀法提取,這些方法能量消耗大、提取產(chǎn)率低,且有較多副產(chǎn)物產(chǎn)生。新型的提取技術(shù),如超臨界流體萃取、微波萃取、超聲波提取等方法雖然高效、環(huán)保,但大多停留于試驗室階段。茶多酚的分離方法在傳統(tǒng)層析基礎(chǔ)上有了更多的創(chuàng)新,HLPC、HSCCC等方法縮短了浸提時間,減少了產(chǎn)物的損失。
一個合理的生產(chǎn)工藝,不僅要最大限度地獲得目標(biāo)產(chǎn)物,還要在保證產(chǎn)品品質(zhì)的同時,最大限度地降低能耗,提高可操作性。如何更有效地提取分離茶多酚、更好地發(fā)揮茶多酚的藥理作用,還需進(jìn)一步的摸索與探究。
[參考文獻(xiàn)]
[1]王婧,王澤民,侯麗,等.茶多酚治療惡性腫瘤研究進(jìn)展[J].國際中醫(yī)中藥雜志,2013,35(9):851-854.
[2]徐力,李冬云,張燕明,等.茶多酚抗腫瘤研究進(jìn)展與前景分析[J].南京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報,2005,21(5):334-336.
[3]吳亮宇,林金科.茶多酚抗輻射研究進(jìn)展[J].茶葉,2011,37(4):213-217.
[4]胡秀芳,沈生榮,樸宰日,等.茶多酚抗氧化機(jī)理研究現(xiàn)狀[J].茶葉科學(xué),1999,19(2):93-103.
[5]梁文紅.茶多酚抗菌作用的研究概況[J].國際口腔醫(yī)學(xué)雜志,2004(S1):26-28.
[6]張星海,沈生榮,楊賢強(qiáng).茶多酚對心腦血管疾病防治作用的研究進(jìn)展[J].福建茶葉,2001(4):24-27.
[7]黃秋森.有機(jī)溶劑提取萃取法生產(chǎn)茶多酚工業(yè)試驗[J].現(xiàn)代化工,2006,26(9):49-51.
[8]汪興平,周志,張家年.微波對茶多酚結(jié)構(gòu)及其兒茶素組成的影響[J].食品科學(xué),2002,23(1):37-39.
[9]陳素艷,鄧清蓮,巫晶晶,等.超聲波法從茶葉中提取苯多酚[J].渤海大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版),2005,26(4):316-319.
[10]劉渠道,王建中,許諾.響應(yīng)面法優(yōu)化超聲波輔助提取茶多酚的工藝研究[J].中國食物與營養(yǎng),2008(9):40-44.
[11]楊曉萍,鐘梅,周帥祥,等.Zn2+沉淀法提取茶多酚工藝研究[J].食品與發(fā)酵工業(yè),2006,32(4):122-125.
[12]余兆祥,王筱平.復(fù)合型沉淀劑提取茶多酚的研究[J].食品工業(yè)技術(shù),2001,22(3):32-34.
[13]王朝瑾,馬紅青,陳溫嫻.超臨界萃取茶葉中茶多酚的提取與應(yīng)用[J].分析科學(xué)學(xué)報,2009,25(3):281-284.
[14]張衛(wèi)紅,張效林.復(fù)合酶法提取茶多酚工藝條件研究[J].食品研究與開發(fā),2006,27(11):5-7.
[15]舒紅英,羅旭彪,王永珍.綠茶中茶多酚的復(fù)合酶-微波法提取工藝研究[J].中草藥,2011,42(7):1309-1312.
[16]嚴(yán)明潮,羅明志.鹽析對兒茶素提取的影響[J].中國茶葉,1999(4):29.
[17]董文賓,胡英,張建華.吸附樹脂法制備茶多酚精品的工藝研究[J]. 食品科學(xué),2002,23(11):68-73.
[18]孫艷娟,毛志方,沈瑞敏,等.不同分離膜在茶多酚提取工藝中的應(yīng)用研究[J].中國茶葉加工,2009(1):27-29.
[19]錢驊,趙伯濤,張衛(wèi)明.茶多酚提取、分離工藝研究[J].中成藥,1998,20(5):8-9.
[20]王平,陳成飛,戴春偉,等.HPD-600大孔吸附樹脂分離茶多酚的研究[J].中成藥,2010,32(4):683-686.
[21]葉鶴琳,邸多隆.一種離子液體修飾的大孔樹脂對茶多酚的吸附機(jī)理研究[J].西北師范大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版),2014,50(4):59-64.
[22]張建勇,江和源,崔宏春,等.兒茶素組成對化學(xué)氧化形成茶黃素的影響機(jī)理[J].食品工業(yè)科技,2011,32(12):85-89.
[23]杜琪珍,李名君,程啟坤.高速逆流色譜法分離茶葉中的兒茶素[J].中國茶葉,1996,18(2):20-21.
[24]侯善欣,應(yīng)浩,黃美蓉,等.高速逆流色譜分離制備茶多酚中兩種黃酮[J].食品科技,2015(10):186-189.
[25]李林.綠茶茶多酚超臨界CO2提取及體外抗氧化活性檢測[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2009,37(34):17061-17063.
[26]胡蓉.綠茶中茶多酚的提取工藝及體外抗氧化活性研究[J].食品界,2017(6):138-139.
[27]GILCINI.Comparisonofinvitroantioxidant andantiradicalactivitiesofL-tyrosineand L-Dopa[J].AminoAcids,2007,32:431-438.