易四鳳 易維學(xué) 徐德清 張力青 李德學(xué)

摘要：選取80只母山羊，隨機(jī)分為對照組和2個(gè)試驗(yàn)組，對照組為經(jīng)產(chǎn)母山羊子宮頸輸精；試驗(yàn)Ⅰ組為初產(chǎn)母山羊腹腔鏡輸精；試驗(yàn)Ⅱ組為經(jīng)產(chǎn)母山羊腹腔鏡輸精，比較腹腔鏡輸精技術(shù)對山羊繁殖性能的影響。結(jié)果表明，經(jīng)產(chǎn)母山羊腹腔鏡輸精后的受胎率為76.67%，子宮頸輸精后的受胎率為60.00%，差異不顯著；經(jīng)產(chǎn)母山羊腹腔鏡輸精后的產(chǎn)羔率和成活率分別為2.22只/母羊、82.35%，與子宮頸輸精的產(chǎn)羔率和成活率（分別為1.83只/母羊和75.77%）差異不顯著；初產(chǎn)母山羊腹腔鏡輸精后的產(chǎn)羔率為1.46只/母羊，顯著低于經(jīng)產(chǎn)母山羊腹腔鏡輸精的產(chǎn)羔率（2.22只/母羊）。說明腹腔鏡輸精技術(shù)對經(jīng)產(chǎn)母山羊的繁殖性能有一定的積極效果，但在山羊生產(chǎn)中廣泛推廣應(yīng)用仍需加強(qiáng)研究。

關(guān)鍵詞：山羊；腹腔鏡輸精；子宮頸輸精；繁殖性能；受胎率；產(chǎn)羔率

中圖分類號：S827.3+4 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A 文章編號：0439-8114（2018）06-0090-04

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2018.06.022

Abstract： To study the influence of laparoscopic artificial insemination on reproductive performance of goat， 80 healthy ewes were randomly divided into control group and two experimental groups. In the control group， cervical insemination was used for multiparous ewe； in the experiment groupⅠ， laparoscopic artificial insemination was used in primiparous ewe； and the experiment group Ⅱ， laparoscopic artificial insemination was used in multiparous ewe. The results showed as follows， the conception rate of laparoscopic artificial insemination and cervical insemination in multiparous ewe and the control group was 76.67% and 60.00%， respectively； and the difference was not significant. The lambing rate and survival rate of laparoscopic artificial insemination in multiparous ewe was 2.22 goats/ewes and 82.35%， respectively， which showed no difference to the cervical insemination for multiparous ewe （1.83 goats/ewes and 75.77%）. The lambing rate of laparoscopic artificial insemination of primiparous ewe was dramatically decreased compared with the laparoscopic artificial insemination of multiparous ewe. The effective of laparoscopic artificial insemination was positive for the reproductive performance of multiparous ewe， but it needed further research for popularization and application in goat production.

Key words： goat； laparoscopic artificial insemination； cervical insemination； reproductive performance； conception rate； lambing rate

湖北省地處亞熱帶和熱帶，常年有豐富的飼草，羊品種已從早期的肉用、毛肉兼用品種逐漸演變?yōu)楝F(xiàn)在以山羊?yàn)橹鞯慕Y(jié)構(gòu)。特別是自進(jìn)入2000年以來，宜昌白山羊、馬頭山羊、麻城黑山羊陸續(xù)被列為國家保護(hù)品種，同時(shí)農(nóng)村畜牧養(yǎng)殖各項(xiàng)鼓勵(lì)政策的不斷出臺和落實(shí)，使得湖北省肉羊業(yè)得到了全面發(fā)展。但在畜牧生產(chǎn)實(shí)踐中，特別是家畜品種改良工作中，山羊人工授精主要采用傳統(tǒng)的子宮頸輸精法，這種方法雖然簡單方便，但精液消耗量大、受胎率低、復(fù)配率高、勞動強(qiáng)度大[1-3]。腹腔鏡人工輸精技術(shù)（Laparoscopic artificial insemination）主要是借助腹腔鏡技術(shù)，通過手術(shù)采用套管穿刺的方法，將精液直接輸?shù)侥感蟮淖訉m角使其受孕的技術(shù)。在澳大利亞、加拿大等畜牧業(yè)發(fā)達(dá)國家，腹腔鏡輸精技術(shù)在一些大型養(yǎng)殖場和較高水平的育種場已得到廣泛推廣應(yīng)用[4]。國內(nèi)已有蘇和等[5]、烏達(dá)巴拉等[6]報(bào)道了腹腔鏡輸精對綿羊、梅花鹿的授精效果，而山羊方面的腹腔鏡輸精技術(shù)應(yīng)用很少。為突破山羊人工授精技術(shù)瓶頸，客觀評估該技術(shù)的實(shí)際應(yīng)用效果，試驗(yàn)探討了腹腔鏡輸精技術(shù)在山羊品種改良中的配種效果，以改進(jìn)山羊人工授精受胎率低、復(fù)配率高、精液消耗量大等難題，從而為該技術(shù)在山羊生產(chǎn)中廣泛推廣應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動物

選取健康狀況良好的馬頭山羊開展腹腔鏡人工輸精技術(shù)試驗(yàn)，其中采精種公山羊若干只，另有80只經(jīng)調(diào)整、同期發(fā)情的母山羊（包括初產(chǎn)、經(jīng)產(chǎn)）作為配種母羊。

1.2 儀器、藥品

試驗(yàn)用藥品有陰道孕激素海綿栓、孕馬血清、促超排卵素稀釋液、維生素A、維生D、青霉素、碘酒等。

腹腔鏡手術(shù)儀器有腹腔鏡輸精器械一套、腹腔鏡輸精裝置、手術(shù)車、氣腹機(jī)、顯微鏡一臺（帶恒溫操作裝置）、小型恒溫水浴鍋（帶試管架）、羊用假陰道、集精杯、稀釋器具一套、充氣泵、鴨嘴開腔器、恒溫操作臺、LED燈、陰道輸精針。

常用手術(shù)器械有止血鉗、剪毛器、手術(shù)刀片、持針器、剃須刀片、噴壺、縫合針、縫合線、注射器以及消毒用具等。

1.3 調(diào)整同期發(fā)情

在母山羊陰道內(nèi)放入孕激素海綿栓，第15天撤拴，撤拴時(shí)肌肉注射孕馬血清， 促進(jìn)配種母羊超數(shù)排卵，撤栓后進(jìn)行試情，并在48～54 h內(nèi)進(jìn)行子宮頸和腹腔鏡輸精操作。

1.4 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

將選取的80只同期發(fā)情的母山羊分為對照組和2個(gè)試驗(yàn)組。對照組為30只經(jīng)產(chǎn)母山羊，輸精方式為傳統(tǒng)的子宮頸輸精；處理Ⅰ組為20只初產(chǎn)母山羊，輸精方式為腹腔鏡輸精；處理Ⅱ組為30只經(jīng)產(chǎn)母山羊，輸精方式為腹腔鏡輸精。

1.5 方法

1.5.1 精液準(zhǔn)備 在輸精前30～60 min對公山羊進(jìn)行采精，并根據(jù)精液品質(zhì)用已經(jīng)加熱滅菌過的羊奶進(jìn)行稀釋，精子活率為0.7。

1.5.2 母山羊輸精前處理 母山羊配種前需空腹12 h，此期間可將手術(shù)器械進(jìn)行消毒備用。

1.5.3 子宮頸輸精 撤栓后48～54 h內(nèi)，對30只同期發(fā)情的經(jīng)產(chǎn)母山羊進(jìn)行子宮頸輸精，每次輸精量為0.3 mL，5 h后復(fù)配。

1.5.4 腹腔鏡輸精 在撤拴后48～54 h內(nèi)，對20只同期發(fā)情的初產(chǎn)母山羊和30只經(jīng)產(chǎn)母山羊分別進(jìn)行腹腔鏡輸精操作。具體是將配種母山羊呈仰臥斜倒立45°固定在專用手術(shù)車上，用帶套管的錐頭穿透腹壁進(jìn)入腹腔，拔出錐頭，并分別放入內(nèi)窺鏡和撥棒，開啟電源，用撥棒進(jìn)到子宮角，將裝好精液的輸精槍對準(zhǔn)子宮角方向扎入腹腔，在一側(cè)子宮角2～3 cm處輸入1/2（0.15 mL）精液，然后拔出針頭，用同樣的方法，將剩余的精液輸入另一側(cè)子宮角內(nèi)，緩慢抽出輸精管、內(nèi)窺鏡及套管等，再用碘酒對傷口消毒，從而完成整個(gè)輸精過程。

1.6 試驗(yàn)管理

在試驗(yàn)期內(nèi)，所有參試羊只管理水平完全一致，實(shí)行半舍飼飼養(yǎng)，自由采食和飲水，并由專人飼喂。輸精45 d后，用獸用B超妊娠診斷儀檢測母山羊的受胎情況。2017年4-10月，跟蹤記錄試驗(yàn)羊群產(chǎn)羔及羔羊成活情況，同時(shí)記錄圈舍溫度、濕度，觀察試驗(yàn)羊只的健康狀況。

1.7 數(shù)據(jù)處理

試驗(yàn)所得數(shù)據(jù)采用Microsoft Office Excel 2007程序處理，并制表；運(yùn)用SAS 9.2統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行單因素方差分析（ANOVA）和鄧肯氏多重比較（Duncan′s multiple range test）檢驗(yàn)。

2 結(jié)果與分析

2.1 腹腔鏡輸精對山羊受胎率的影響

腹腔鏡輸精技術(shù)對山羊受胎率的影響情況見表1。由表1可知，初產(chǎn)母山羊和經(jīng)產(chǎn)母山羊腹腔鏡輸精后，受胎率分別為65.00%、76.67%，比經(jīng)產(chǎn)母山羊子宮頸輸精的受胎率分別提高了8.33%、27.78%；經(jīng)產(chǎn)母山羊腹腔鏡輸精的受胎率又比初產(chǎn)母山羊腹腔鏡輸精提高了17.95%，說明采用腹腔鏡輸精技術(shù)可以提高受胎率，且經(jīng)產(chǎn)母山羊又比初產(chǎn)母山羊效果好；但統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果表明，腹腔鏡輸精技術(shù)與子宮頸輸精之間、初產(chǎn)母山羊和經(jīng)產(chǎn)母山羊之間的受胎率沒有顯著差異（P>0.05）。

2.2 腹腔鏡輸精對山羊多羔率的影響

腹腔鏡輸精技術(shù)對山羊多羔率的影響情況見表2。由表2可見，經(jīng)產(chǎn)母山羊腹腔鏡輸精后，多羔率最高，為82.60%，比經(jīng)產(chǎn)母山羊子宮頸輸精的多羔率（72.22%）提高了14.37%，不過差異不顯著（P>0.05）；比初產(chǎn)母山羊腹腔鏡輸精的多羔率（46.15%）提高了78.98%，差異顯著（P<0.05）。表明腹腔鏡輸精對經(jīng)產(chǎn)母山羊多羔率效果最好，而對初產(chǎn)母山羊沒有效果。

2.3 腹腔鏡輸精對山羊產(chǎn)羔的影響

腹腔鏡輸精技術(shù)對山羊產(chǎn)羔的影響情況見表3。由表3可見，經(jīng)產(chǎn)母山羊腹腔鏡輸精的產(chǎn)羔率為2.22只/母羊，比子宮頸輸精的產(chǎn)羔率（1.83只/母羊）提高了21.31%，不過差異不顯著（P>0.05）；比初產(chǎn)母山羊腹腔鏡輸精的產(chǎn)羔率（1.46只/母羊）提高了52.05%，差異顯著（P<0.05）。而初產(chǎn)母山羊腹腔鏡輸精的產(chǎn)羔率反而比子宮頸輸精的產(chǎn)羔率降低了20.22%。由此可知，經(jīng)產(chǎn)母山羊采用腹腔鏡輸精技術(shù)能提高產(chǎn)羔率，而初產(chǎn)母山羊采用腹腔鏡輸精后，反而降低了產(chǎn)羔率。

3 討論

3.1 腹腔鏡輸精技術(shù)對山羊受胎率的影響

烏達(dá)巴拉等[6]報(bào)道，綿羊用腹腔鏡輸精的受胎率為92.70%，顯著高于子宮頸輸精的76.78%；而毛鳳顯等[7]同樣研究了2種輸精方式在貴州白山羊中的配種效果，結(jié)果腹腔鏡輸精技術(shù)的受胎率雖有提高，但差異不顯著。在本試驗(yàn)中，馬頭山羊腹腔鏡輸精經(jīng)產(chǎn)母山羊受胎率為76.67%，初產(chǎn)母山羊受胎率只有65.00%，與子宮頸輸精受胎率的60.00%相比，受胎率雖有提高，但未達(dá)到顯著差異；個(gè)中原因，一方面可能是因?yàn)椴捎酶骨荤R輸精的母山羊需禁食12 h和腹部開刀手術(shù)；另一方面，由于養(yǎng)殖場管理不善，導(dǎo)致部分母山羊配種后手術(shù)傷口恢復(fù)不佳；這兩方面造成的應(yīng)激反應(yīng)均會對母山羊的受孕造成不良影響。由此表明，腹腔鏡輸精技術(shù)在一定程度上提高了山羊的受胎率，但效果不明顯。

3.2 腹腔鏡輸精技術(shù)對山羊產(chǎn)羔率的影響

劉玉峰[8]認(rèn)為，腹腔鏡輸精技術(shù)顯著提高了輸精綿羊的受胎率和母羊雙羔率。本試驗(yàn)中，經(jīng)產(chǎn)母山羊腹腔鏡輸精處理的多羔率和成活率均高于子宮頸輸精和初產(chǎn)母山羊腹腔鏡輸精處理，且多羔率也是最高，但初產(chǎn)母山羊腹腔鏡輸精的產(chǎn)羔率、多羔率又顯著低于經(jīng)產(chǎn)母山羊腹腔鏡輸精處理，由此說明，腹腔鏡輸精技術(shù)并不適宜于初產(chǎn)母山羊，而在經(jīng)產(chǎn)母山羊上有一定的應(yīng)用成效。

3.3 山羊腹腔鏡輸精技術(shù)推廣的可行性

從受胎率來看，腹腔鏡輸精技術(shù)應(yīng)用在鹿、綿羊上均獲得了較高的受胎率，特別是綿羊受胎率可高達(dá)90%以上，賈海明[9]的研究表明，梅花鹿的腹腔鏡輸精受胎率達(dá)到86.67%，極顯著高于子宮頸輸精的36.84%；烏達(dá)巴拉等[6]認(rèn)為，綿羊腹腔鏡輸精的受胎率顯著提高，可達(dá)90%以上。而本試驗(yàn)中，山羊腹腔鏡輸精經(jīng)產(chǎn)母山羊受胎率為76.67%，初產(chǎn)母山羊受胎率為65.00%，這可能與山羊天性剛烈、生性好動有關(guān)，其受胎率普遍偏低于其他動物，具體原因還有待今后更深入的研究來查證。

從羔羊成活率來看，經(jīng)產(chǎn)母山羊采用腹腔鏡輸精的產(chǎn)羔率、成活率和多羔率高于子宮頸輸精，但效果不明顯，而初產(chǎn)母山羊采用腹腔鏡輸精的產(chǎn)羔率、多羔率又顯著低于經(jīng)產(chǎn)母山羊。所以，該技術(shù)在經(jīng)產(chǎn)母山羊上應(yīng)用效果較好，但在初產(chǎn)母山羊上效果不理想。

從輸精量來看，賈海明[9]報(bào)道了梅花鹿腹腔鏡輸精的效率明顯高于子宮頸輸精，發(fā)現(xiàn)腹腔鏡輸精的有效精子數(shù)在1 000萬/只時(shí)受胎率可達(dá)90%，顯著少于子宮頸輸精的有效精子數(shù)（1 200萬/只）。本試驗(yàn)中腹腔鏡精液輸精量只有子宮頸輸精量的一半，且受胎率高于子宮頸輸精。由此說明，經(jīng)產(chǎn)母山羊腹腔鏡輸精能減少精液量，提高優(yōu)質(zhì)山羊的利用率，降低種公羊的飼養(yǎng)數(shù)量，節(jié)約養(yǎng)殖成本。

試驗(yàn)結(jié)果表明，腹腔鏡輸精技術(shù)在山羊繁殖性能中的應(yīng)用效果還有待進(jìn)一步探討與確認(rèn)；如劉玉峰[10]曾報(bào)道腹腔鏡輸精技術(shù)可以提高超數(shù)排卵供體綿羊母羊的胚胎受精率，因此，可考慮在科研單位和部分育種場中，將腹腔鏡輸精技術(shù)與胚胎移植技術(shù)結(jié)合應(yīng)用于山羊品種改良及新品種的培育中。

總的來看，采用腹腔鏡輸精技術(shù)在一定程度上可以提高經(jīng)產(chǎn)母山羊的受胎率、產(chǎn)羔率、成活率和產(chǎn)多羔率，但效果并不顯著。所以，該技術(shù)對山羊繁殖性能的應(yīng)用效果還有待深入探討；初產(chǎn)母山羊采用腹腔鏡輸精技術(shù)降低了產(chǎn)羔率和多羔率，說明該技術(shù)更適宜用于經(jīng)產(chǎn)母山羊；可考慮先將腹腔鏡輸精技術(shù)與胚胎移植技術(shù)結(jié)合應(yīng)用于山羊品種改良及新品種的培育，待該技術(shù)在山羊繁殖性能中的應(yīng)用效果得到進(jìn)一步驗(yàn)證后，便可建議在山羊生產(chǎn)中廣泛推廣應(yīng)用。

參考文獻(xiàn)：

[1] 張建濤，王洪斌，范洪剛，等.腹腔鏡技術(shù)在羊中的應(yīng)用[J].黑龍江畜牧獸醫(yī)，2007（5）：73-74.

[2] 李建軍，王洪斌，熊慧軍，等.動物腹腔鏡技術(shù)的應(yīng)用研究進(jìn)展[J].動物醫(yī)學(xué)進(jìn)展，2006（7）：51-54.

[3] 石國慶，曾培堅(jiān)，楊永林，等.綿羊腹腔內(nèi)窺鏡子宮角深部冷凍精液輸精試驗(yàn)[J].新疆農(nóng)業(yè)科學(xué)，2001（S）：72-73.

[4] MOSES D，MARTINEZ A G，LORIO G et al. A large-scale program in laparoscopic intrauterine insemination with frozen-thawed semen in Australian Merino sheep in Argentine Patagonia[J].Theriogenology，1997，48（4）：651-657.

[5] 蘇 和，達(dá) 來，邵 凱，等.腹腔鏡輸精對綿羊超數(shù)排卵受精率的影響[J].畜牧與飼料科學(xué)（奶牛版），2006（5）：42-43.

[6] 烏達(dá)巴拉，達(dá) 來，邵 凱，等.羊子宮頸輸精和腹腔鏡輸精技術(shù)對受胎率的影響[J].中國草食動物科學(xué)，2012（S）：280-281.

[7] 毛鳳顯，陳浩林，廖 梅，等.腹腔鏡輸精在貴州白山羊胚胎移植中的受精效果研究[J].黑龍江畜牧獸醫(yī)，2014（20）：26-27.

[8] 劉玉峰.子宮內(nèi)輸精技術(shù)在綿羊生產(chǎn)中的應(yīng)用研究[J].黑龍江農(nóng)業(yè)科學(xué)，2007（5）：77-79.

[9] 賈海明.梅花鹿腹腔鏡子宮角輸精技術(shù)研究[D].哈爾濱：東北農(nóng)業(yè)大學(xué)，2009.

[10] 劉玉峰.綿羊子宮內(nèi)輸精技術(shù)的研究[D].哈爾濱：東北農(nóng)業(yè)大學(xué)，2003.