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(四川省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，四川 成都 610041)

0 引言

口蹄疫(Foot and mouth disease，F(xiàn)MD)是由小RNA病毒科口蹄疫病毒屬的口蹄疫病毒(FMDV)引起的以感染豬、牛、羊等偶蹄動(dòng)物為主的急性、熱性、高度傳染性疫病。其典型臨床特征是在動(dòng)物口腔和蹄部等皮膚及黏膜處形成水皰，該病流行廣、傳播快、血清型多且發(fā)病率高，嚴(yán)重危害畜牧業(yè)發(fā)展及國(guó)際貿(mào)易。世界動(dòng)物衛(wèi)生組織(OIE)將口蹄疫列為A類(lèi)傳染病之首，我國(guó)將其列為一類(lèi)動(dòng)物傳染病。2017年四川省開(kāi)展了春、秋兩季口蹄疫疫苗的集中強(qiáng)制免疫工作，且分別在6月和12月對(duì)全省21個(gè)市(州)的4707份豬、牛、羊血清進(jìn)行免疫抗體檢測(cè)，以掌握免疫效果，做好我省口蹄疫防控工作，防止疫情發(fā)生。

1 材料

1.1 樣品

豬血清3 160份,牛、羊血清1 547份。

1.2 檢測(cè)試劑

口蹄疫O型單抗競(jìng)爭(zhēng)ELISA抗體檢測(cè)試劑盒，生產(chǎn)廠(chǎng)家：中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所，批號(hào)：20170324105-1、2170728105-1；口蹄疫A型單抗競(jìng)爭(zhēng)ELISA抗體檢測(cè)試劑盒，生產(chǎn)廠(chǎng)家：中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所，批號(hào)：20170324107-1、20171011107-1；口蹄疫Asia 1型病毒抗體檢測(cè)試劑盒,生產(chǎn)廠(chǎng)家：荷蘭賽迪，批號(hào)：FS151201L、FS161001L。

1.3 主要儀器設(shè)備

單道微量移液器、12道微量移液器、96孔全自動(dòng)洗板機(jī)、37℃恒溫培養(yǎng)箱、全自動(dòng)加樣儀、Modle680酶標(biāo)儀。

2 方法

2.1 采樣方法

在春、秋兩季口蹄疫疫苗的集中強(qiáng)制免疫工作后35～50 d，在全省21個(gè)市(州)隨機(jī)抽取一個(gè)縣(區(qū))分別采集規(guī)模場(chǎng)、散養(yǎng)戶(hù)、屠宰場(chǎng)的豬、牛、羊全血樣品。采樣要求為：規(guī)模場(chǎng)：每個(gè)縣(區(qū))隨機(jī)抽查3個(gè)養(yǎng)殖場(chǎng)(其中2個(gè)豬場(chǎng)，1個(gè)牛場(chǎng)或羊場(chǎng))，每個(gè)規(guī)模場(chǎng)至少采集全血樣品20份；散養(yǎng)戶(hù)：每個(gè)縣(區(qū))抽查2個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)，抽中鄉(xiāng)鎮(zhèn)隨機(jī)抽查2個(gè)村，每村抽查不少于5個(gè)散養(yǎng)戶(hù)，每個(gè)村至少采集全血樣品10份；每個(gè)縣(區(qū))隨機(jī)抽查一個(gè)屠宰場(chǎng)，采集不少于10份樣品。

全血樣品采集后盡快分離血清，冷凍保存。

2.2 檢測(cè)方法及結(jié)果判定

用蘭州獸醫(yī)研究所的單抗競(jìng)爭(zhēng)ELISA抗體檢測(cè)試劑盒檢測(cè)所有樣品的O型及A 型抗體，用荷蘭賽迪公司的口蹄疫Asia 1型病毒抗體檢測(cè)試劑盒檢測(cè)牛、羊血清的Asia 1型抗體并計(jì)算阻斷率。試驗(yàn)步驟、操作方法、血清抗體效價(jià)及結(jié)果的判定方法均按照試劑盒說(shuō)明書(shū)嚴(yán)格執(zhí)行。

3 檢測(cè)結(jié)果

3.1 O型口蹄疫抗體

全年春秋兩次集中檢測(cè)豬、牛、羊血清共計(jì)4 707份，合格4 256份，平均合格率為90.4%。

共檢測(cè)豬血清3 160份，合格2 938份，合格率為93.0%。其中規(guī)模場(chǎng)檢測(cè)1 630份，合格1 510份，合格率為92.6%；散養(yǎng)戶(hù)檢測(cè)1 140份，合格1 066份，合格率為93.5%；屠宰場(chǎng)檢測(cè)390份，合格362份，合格率92.80%，結(jié)果見(jiàn)表1。

共檢測(cè)牛、羊血清1 547份，合格1 318份，合格率為85.2%。其中規(guī)模場(chǎng)檢測(cè)890份，合格753份，合格率為84.6%；散養(yǎng)戶(hù)檢測(cè)627份，合格546份，合格率為87.1%；屠宰場(chǎng)檢測(cè)30份，合格19份，合格率63.3%。結(jié)果見(jiàn)表2。

3.2 Asia 1型口蹄疫

全年春秋兩次集中檢測(cè)牛、羊血清1 547份，合格1 387份，平均合格率為89.7%。

其中規(guī)模場(chǎng)檢測(cè)890份，合格805份，合格率為90.4%；散養(yǎng)戶(hù)檢測(cè)627份，合格554份，合格率為88.4%；屠宰場(chǎng)檢測(cè)30份，合格28份，合格率93.3%。結(jié)果見(jiàn)表3。

表1 2017年四川省豬O型口蹄疫抗體檢測(cè)結(jié)果 份、%

表2 2017年四川省牛、羊O型口蹄疫抗體檢測(cè)結(jié)果 份、%

表3 2017年四川省牛、羊Asia 1型口蹄疫抗體檢測(cè)結(jié)果 份、%

表4 2017年四川省牛A型口蹄疫抗體檢測(cè)結(jié)果 份、%

3.3 A型口蹄疫

全年春秋兩次集中檢測(cè)牛血清517份，合格479份，平均合格率為92.6%。

其中規(guī)模場(chǎng)檢測(cè)310份，合格278份，合格率為89.7%；散養(yǎng)戶(hù)檢測(cè)196份，合格190份，合格率為96.9%；屠宰場(chǎng)檢測(cè)11份，合格11份，合格率100%。結(jié)果見(jiàn)表4。

4 討論

按農(nóng)業(yè)部要求，畜禽群體免疫抗體合格率應(yīng)在70%或以上，從監(jiān)測(cè)結(jié)果看，四川省2017年春、秋季O型、Asia 1型、A型口蹄疫群體免疫抗體合格率均達(dá)到農(nóng)業(yè)部的規(guī)定。表明全省口蹄疫強(qiáng)制免疫工作扎實(shí)，為確保口蹄疫的穩(wěn)定控制和畜產(chǎn)品質(zhì)量安全打下了堅(jiān)實(shí)基礎(chǔ)。

同上半年春季集中檢測(cè)結(jié)果相比，下半年O型口蹄疫抗體水平有較大幅度提升，Asia 1型口蹄疫也有所上升，但A型口蹄疫抗體平均合格率有略微下降，這可能與下半年A型口蹄疫退出強(qiáng)制免疫有關(guān)。總體來(lái)說(shuō)，三個(gè)型的口蹄疫抗體均處于較高水平。

對(duì)于牛、羊血清的Asia 1型、A型口蹄疫抗體，出現(xiàn)屠宰場(chǎng)的檢測(cè)抗體水平高于規(guī)模場(chǎng)和散養(yǎng)戶(hù)，甚至出現(xiàn)100%合格，分析可能的原因是牛羊血清的屠宰場(chǎng)樣本量偏少，或代表性不足，不能準(zhǔn)確反映整個(gè)群體的真實(shí)抗體水平。

5 建議

為提高免疫質(zhì)量，降低疫情發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)，對(duì)四川省的重大動(dòng)物疫病防控提出三點(diǎn)建議：一是雖然全省整體免疫質(zhì)量較高，但也存在各地免疫水平不均衡的問(wèn)題，因此各地應(yīng)及時(shí)對(duì)免疫水平較低的牲畜進(jìn)行補(bǔ)免，降低疫情發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)。二是繼續(xù)加大培訓(xùn)力度，使基層防疫人員能熟練掌握規(guī)范化的免疫操作技術(shù)，以及疫苗運(yùn)輸、保存等注意事項(xiàng)。三是持續(xù)加大對(duì)規(guī)模場(chǎng)動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)力度，定期開(kāi)展疫病監(jiān)測(cè)、流行病學(xué)調(diào)查及逐步規(guī)范規(guī)模場(chǎng)建立疫病預(yù)警預(yù)報(bào)體系，積極推進(jìn)規(guī)模場(chǎng)疫病凈化工作。