汪小兵 (長江大學化學與環(huán)境工程學院，湖北荊州434023 荊楚理工學院湖北省荊門醫(yī)藥工業(yè)技術研究院，湖北荊門448000)

尹先清 (長江大學化學與環(huán)境工程學院，湖北 荊州 434023)

許方亮，李俊，李立威 (荊楚理工學院湖北省荊門醫(yī)藥工業(yè)技術研究院，湖北 荊門 448000)

鹽酸纈更昔洛韋，化學名為(S)-2-氨基-3-甲基丁酸 (R,S)-2-[(2-氨基-6-氧代-1,6-二氫-9H-嘌呤-9-基)甲氧基]-3-羥基丙酯鹽酸鹽，是瑞士羅氏公司研制開發(fā)的抗病毒藥物更昔洛韋的前體藥物，2001年3月獲美國FDA許可，2001年5月首次在美國上市，是治療獲得性免疫缺陷綜合征(AIDS)病人發(fā)生的巨細胞病毒(CMV)視網膜炎的第1個口服使用的藥物，在2003年5月擴大了其適應癥，用于預防和治療器官移植者繼發(fā)CMV感染[1～4]。

關于鹽酸纈更昔洛韋的合成文獻報道主要有3種方案，第1種方案是以更昔洛韋為起始原料[5，6]，分別有3種方法：①更昔洛韋直接與氨基被保護的纈氨酸成雙酯[7，8]，再選擇性脫去一個羥基上的纈氨酸，最后脫保護得鹽酸纈更昔洛韋。路線中選擇性水解得單酯條件苛刻，單雙酯分離困難，收率較低。②先保護更昔洛韋的一個羥基[9，10]，然后再經酯化、脫保護得鹽酸纈更昔洛韋。③將更昔洛韋2-位氨基和一個羥基保護起來[11，12]，再經酯化、脫保護得目標產物鹽酸纈更昔洛韋。選擇性地添加或者脫保護基比較困難，產物難以純化,不適于工業(yè)生產。第2種或第3種方案分別是以鳥嘌呤或者取代鳥嘌呤為起始原料[13，14]，要經過縮合、氫化、水解、縮合及氫化幾步得目標產物，路線長，總收率低，且2次氫化都用到H2/Pd-C體系，操作麻煩，原料成本高，不利于工業(yè)化生產。

為此，筆者參考第1種方案中的方法②，設計了一條簡便合成鹽酸纈更昔洛韋(目標產物(1))的路線(見圖1)，該路線以單乙酰更昔洛韋(中間體(2))為起始原料，和叔丁氧羰基-L-纈氨酸在羰基二咪唑(CDI)和三乙胺(TEA)的作用下發(fā)生酯化反應生成單乙酰叔丁氧羰基-L-纈氨酸更昔洛韋，然后先在三氟乙酸(TFA)的二氯甲烷溶液中脫去氨基上的叔丁氧羰基得到單乙酰L-纈氨酸更昔洛韋，再經過碳酸鉀堿性條件水解脫去單羥基上的乙酰保護基得到纈氨酸更昔洛韋，最后再與氯化氫成鹽得到目標產物(1)，路線總收率為35.2%，產物純度為98.9%，其中非對映異構體比例為49∶49，更昔洛韋含量為0.71%。合成的目標產物符合USP35標準規(guī)定(純度不低于97%，更昔洛韋含量≤1.5%，非對映異構體比例在45∶55到55∶45之間)。

圖1 目標產物(1)的合成路線

1 實驗部分

1.1 主要儀器及試劑

儀器：AVANCEⅢHDD核磁共振儀-400MHz(TMS為內標，瑞士Bruker公司)；Ultimate3000型高效液相色譜儀(美國賽默飛)；DF101S型集熱式恒溫磁力攪拌器(鞏義市予華)。RE52CS型旋轉蒸發(fā)儀(上海亞榮)；Accurate-Mass O-TOF 型LC /MS 質譜(Agilent)。

試劑：單乙酰更昔洛韋(98%)；叔丁氧羰基-L-纈氨酸(Boc-L-纈氨酸)(98%)；羰基二咪唑(CDI)(98%)；三乙胺(TEA)(98%)；N,N-二甲基甲酰胺(DMF)、甲醇、乙酸乙酯、鹽酸、二氯甲烷、碳酸鉀(K2CO3)(AR，國藥試劑)。

1.2 單乙酰-Boc-L-纈氨酸更昔洛韋(中間體(3))的合成

100ml三口燒瓶中加入Boc-L-纈氨酸(5.5g，25.2mmol)、CDI(3.3g，20.2mmol)和DMF(20ml)，N2保護下低溫攪拌反應1.0h后升溫至40℃，然后再加入中間體(2)(5.0g，16.8mmol)和三乙胺(5.1g，50.4mmol)，置換氣體后繼續(xù)反應3.0h，TLC監(jiān)控反應進程。反應畢，反應液加入到去離子水(100ml)中，加入乙酸乙酯(20ml)攪拌10min，分出有機相，水相再用乙酸乙酯(10ml×2)萃取，合并有機相，水洗2次，無水硫酸鎂干燥，過濾，濾液減壓濃縮得固體，用甲醇重結晶得6.3g白色固體，收率為75.4%，HPLC純度為97.2%[HPLC歸一化法：色譜柱Diamonsil C18柱(250mm×4.6mm，5μm)；流動相A: 用磷酸調節(jié)pH值為2.8的10mmol/L的磷酸二氫鉀水溶液，B：甲醇，梯度洗脫(0→5min：B 8%，5→15min：B 8%→20%，15→30min：B 20%→70%，30→40min：B 70%)，檢測波長：254nm，流速：1.0ml，柱溫：35℃]。ESI-MS(m/z)：497.1[M+H]+；1HNMR(400MHz ,CD3OD)δ：7.88(s，1H，NCHN)，5.55～5.62(m，NCH2O)，4.29～4.37(m，1H，CHNH)，4.16～4.23(m，2H，CH2)，4.04～4.15(m，2H，CH2)，3.98～4.01(m，1H，OCH)，1.98～2.09(m，1H，CHCH3)，1.94(d，J=4.0Hz，3H，OCCH3)1.45(s，9H，CCH3)，0.90～0.95(m，6H，CHCH3)。

1.3 鹽酸纈更昔洛韋的合成

在100ml單口燒瓶中加入中間體(3)(3.0g，6.0mmol)和15%的TFA二氯甲烷溶液(10ml)，室溫下攪拌2.0h，TLC監(jiān)控反應進程。反應畢，減壓濃縮得殘余物，然后加入甲醇(15ml)和水(6.0ml)溶解后，再加入K2CO3(2.78g，20.2mmol)固體，40℃下攪拌2.0h后，將反應液加入去離子水(60ml)中，用1mol/L的鹽酸調節(jié)pH值至6左右，加入二氯甲烷(15ml)攪拌，分出有機層，水層用二氯甲烷萃取(2×10ml)，合并有機相，有機相用飽和氯化鈉水溶液洗2次，無水硫酸鎂干燥，過濾，向濾液中通入氯化氫氣體使溶液pH值為2～3，再將二氯甲烷旋蒸濃縮至干，將殘余物用異丙醇和水的混合溶劑重結晶，得目標產物1.1g，收率為46.3%，HPLC純度為98.9%，其中更昔洛韋含量為0.71%，非對映異構體的比例為49∶49，符合USP35標準規(guī)定(更昔洛韋含量≤1.5%，非對映異構體比例在45∶55到55∶45之間，總純度不低于97%)。ESI-MS(m/z)：355.7[M+H]+；1HNMR(400MHz，D2O)δ：7.86(d，J=3.6Hz，1H，NCHN)，5.55(dd，J=4.8Hz、11.6Hz，1H，NCH2O)，5.45(dd，J=7.2Hz、12.0Hz，1H，NCH2O)，4.21～4.26(m，1H，CH2OH)，4.01～4.08(m，1H，CH2OH)，3.94～4.01(m，1H，OCH)，3.69(dt，J=4.0Hz、12.4Hz，1H，CHNH2)，3.62(dd，J=4.8Hz、17.2Hz，1H，CH2OOC)，3.57(dd，J=4.0Hz、8.0Hz，1H，CH2OOC)，1.76～1.92(m，1H，CHCH3)，0.70～0.80(m，6H，CH3)。

2 結果與討論

在中間體(3)的合成中，文獻報道[7,10～12]采用的催化體系為二環(huán)己基碳二亞胺(DCC)和4-二甲氨基吡啶(DMAP)，該體系總是生成一種不易去除干凈的二環(huán)己基脲(DCU)混在產物中，為產品純化帶來麻煩。而筆者采用的CDI和TEA體系可以避免這種麻煩，并且在合成過程中為了提高收率，對其反應條件進行了一定的優(yōu)化。結果表明，當Boc-L-纈氨酸與單乙酰更昔洛韋的摩爾比為1.5，CDI與單乙酰更昔洛韋的摩爾比為1.2，反應溫度為40℃時，該反應有較好的收率。

在第2步反應中，該研究將脫Boc保護基和脫單乙酰保護基通過先后加入TFA和K2CO3來實現(xiàn)。2步反應在“一鍋煮”中完成，反應不再需要在加壓釜中用貴重的Pd/C催化劑催化進行，降低了反應成本，并且使反應在本質上變得更加安全。

3 結語

在單乙酰-Boc-L-纈氨酸更昔洛韋的合成過程中，當反應條件為Boc-L-纈氨酸與中間體(2)的配比為1.5、CDI與中間體(2)的摩爾比為1.2、反應溫度為40℃、在40℃下反應時長為3.0h時有較好的收率，收率可達75.4%，產物經HPLC檢測的純度為97.2%。在最后一步的合成關鍵步驟中，通過“一鍋煮”的方式先后脫去了氨基保護基和羥基保護基，縮短了反應步驟。合成路線總收率為35.2%，目標產物(1)純度為98.9%，其中非對映異構體比例為49∶49，更昔洛韋含量為0.71%。合成的目標產物符合USP35標準規(guī)定。研究路線具有原料易得、步驟少、反應條件溫和、操作簡單等優(yōu)點，適宜于工業(yè)生產。

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