鄭玉紅 黑龍江省林口縣朱家鎮(zhèn)畜牧站 157699
(1)采精量。采集精液后稱重,按每克1mL計(jì),避免以量筒等測(cè)量精液的體積。
(2)顏色。正常的精液是乳白色或淺灰色,精子密度越高,色澤愈濃,透明度愈低。帶有綠色、黃色、淺紅色、紅褐色等異常顏色的精液應(yīng)予廢棄。
(3)氣味。豬精液略帶腥味,如有異常氣味,應(yīng)廢棄。
(4)pH值(酸堿度)。用pH計(jì)或pH試紙測(cè)量,正常范圍為 7.0~7.8。
(5)精子活力檢查。精子活力是指呈直線運(yùn)動(dòng)的精子所占百分率,在顯微鏡下觀察,一般用0.1~1.0的十級(jí)評(píng)分法估計(jì),鮮精活力要求不低于0.7。檢查活力時(shí)要求載玻片和蓋玻片都應(yīng)在37℃下預(yù)熱。
(6)精子密度。指每毫升精液中所含的精子數(shù),是確定稀釋倍數(shù)的重要標(biāo)準(zhǔn)。要求用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)或精液密度儀測(cè)定。血細(xì)胞計(jì)數(shù)方法:以微量加樣器取具有代表性的原精液200ul,用3%NaCl稀釋10倍;在血細(xì)胞計(jì)數(shù)板上放一蓋玻片,取1滴稀釋后的精液置于計(jì)數(shù)板的槽中,靠虹吸將精液吸入計(jì)數(shù)室內(nèi);在高倍鏡下計(jì)數(shù)5個(gè)中方格內(nèi)的精子總數(shù),將該數(shù)乘以50萬(wàn),即得到原精液每毫升的精子數(shù)(即精液密度)。
(7)精子畸形率。畸形率是指異常精子的百分率,一般要求畸形率不超過(guò)18%。其測(cè)定可用普通顯微鏡,但需進(jìn)行伊紅或姬姆薩染色,用相差顯微鏡可直接觀察活精子的畸形率。公豬利用過(guò)頻或高溫環(huán)境會(huì)產(chǎn)生精子尾部帶有原生質(zhì)滴的畸形精子?;尉臃N類很多。要求對(duì)每頭公豬每2周檢查一次精子畸形率。
(1)稀釋液。稀釋液按稀釋液配方配制(D-葡萄糖37.15,檸檬酸三鈉6.00,EDTA鈉鹽1.25,碳酸氯鈉1.25,氯化鉀 0.75,青霉鈉 0.60,硫酸鏈霉素 1.00),用稱量紙、電子天平準(zhǔn)確稱量藥品;按1000mL和2000mL劑量稱量稀釋粉,置于密封袋中;在大燒杯或塑料杯中套入一到兩層一次性食品袋,然后將稀釋粉加入,再將燒杯(或塑料杯)放在電子秤上,除皮重;通過(guò)與蒸餾水容器連接的軟管將蒸餾水導(dǎo)入杯中(最初放出的幾毫升水用其它杯接取廢棄),直到將水加至規(guī)定的重量(如1000g即約1000mL);將杯子放入水浴中加熱,加熱后輕輕搖動(dòng),使其徹底溶解。某些稀釋粉遇水后結(jié)塊,溶解較慢,需將加熱時(shí)間延長(zhǎng)一些。稀釋粉全部溶解后,在水浴中繼續(xù)加熱至所需的溫度。用0.1N稀鹽酸或0.1N氫氧化鈉調(diào)整稀釋液的pH值達(dá)7.2(6.8~7.4)左右,稀釋液配好后應(yīng)及時(shí)貼上標(biāo)簽、標(biāo)明品名、配制日期和時(shí)間、經(jīng)手人等。將稀釋液置于冰箱內(nèi)4℃下保存,時(shí)間不超過(guò)24小時(shí)。
(2)原精液稀釋后體積計(jì)算。原精液總有效精子數(shù)=原精液體積(或重量 g)×精子密度(單位:個(gè)/mL)×活率。原精液稀釋后可分裝的份數(shù)=原精總有效精子數(shù)/每份精液中的有效精子數(shù)。原精液稀釋后的體積(或重量)=原精液稀釋后可分裝的份數(shù) (取整數(shù))×每份精液的體積(或重量)。每份精液中有效精子數(shù)推薦為30億。
(3)精液稀釋。精液采集后應(yīng)盡快稀釋,原精儲(chǔ)存不超過(guò)30分鐘。未經(jīng)品質(zhì)檢查或檢查不合格(活力在0.7以下)的精液不能稀釋。稀釋液與精液要求等溫稀釋,兩者溫差不超過(guò)1℃,即稀釋液應(yīng)加熱至33~37℃,以精液溫度為標(biāo)準(zhǔn)來(lái)調(diào)節(jié)稀釋液的溫度,絕不能反過(guò)來(lái)操作。稀釋時(shí)用一個(gè)塑料杯(1000~1500mL)放在電子秤上,除皮后將裝精液的采精袋從保溫杯中取出,放入大塑料杯中,并將袋口翻在杯外。如果集精容器為一次性紙杯,則需將紙杯中的精液倒入裝有食品袋的塑料杯中并放在電子秤上。也可在此時(shí)稱量并記錄精液重量。然后向杯中徐徐加入與精液等溫的稀釋液,直到達(dá)到所計(jì)算的最終重量。
(4)精液分裝。一次性輸精瓶的分裝。將塑料杯中稀釋后的精液分別加入不同的輸精瓶中,使精液面達(dá)到輸精瓶上相應(yīng)的刻度(如100mL),然后擰上輸精瓶蓋。一次性輸精袋分裝。將輸精袋的兩個(gè)懸掛孔掛在專門用于分裝精液的支架上,在輸精袋中插上一次性塑料漏斗,放在電子秤上,然后除皮。將塑料杯中稀釋后的精液通過(guò)漏斗徐徐加入輸精袋中,直到達(dá)到規(guī)定的重量(如100g),取下漏斗和輸精袋,掛上一個(gè)新的輸精袋,再將漏斗插入,分裝另一袋精液。分裝后的輸精袋用塑料熱封口機(jī)封口。在輸精瓶或袋上標(biāo)明公豬品種、耳號(hào)、生產(chǎn)日期、保存有效期、稀釋液名稱和生產(chǎn)單位等。
(5)精液儲(chǔ)存。將分裝后的輸精容器放入泡沫塑料盒中,在室溫下緩慢降溫30分鐘后,再將輸精容器放入17℃恒溫箱內(nèi)的擱架上保存。保存過(guò)程中不要頻繁打開(kāi)冰箱,并且每隔12小時(shí)輕輕翻轉(zhuǎn)一次,防止精子沉淀而引起死亡。短效稀釋液可保存3天,中效稀釋液可保存4~6天,長(zhǎng)效稀釋液可保存7~9天,無(wú)論用何種稀釋液保存精液,都應(yīng)盡快用完。