洪智敏 福州大北農(nóng)生物技術(shù)有限公司 福州 350014
豬支原體肺炎 (Mycoplasmal pneumonia of swine,MPS)又稱豬流行性肺炎,在我國俗稱豬氣喘病,由豬肺炎支原體 (Mycoplasma hyopneumoniae,Mhp)所引發(fā)的呼吸系統(tǒng)疾病,是影響我國養(yǎng)豬業(yè)發(fā)展的主要疫病之一。Mhp是一種原核生物,能夠自行復(fù)制,分離培養(yǎng)困難,對(duì)生長需求苛刻;無細(xì)胞壁,在顯微鏡下呈現(xiàn)多形態(tài),直徑0.2~0.5 μm,大小介于細(xì)菌和病毒之間。革蘭氏染色為陰性,瑞特或吉姆薩染色良好,大環(huán)內(nèi)酯類、氟喹諾酮類可抑制Mhp的生長,影響蛋白質(zhì)合成的藥物可影響Mhp生長[1]。MPS的病死率不高,傳播緩慢,在豬群中會(huì)呈現(xiàn)隱性感染而被養(yǎng)殖戶忽視。在規(guī)?;i場(chǎng)中Mhp常與其他病原體如豬繁殖與呼吸綜合征病毒、圓環(huán)病毒、副豬嗜血桿菌(HPS)等混合感染,使豬的免疫功能受損,免疫力降低,導(dǎo)致豬瘟免疫失敗,病菌感染率升高,并引發(fā)常見的豬呼吸道疾病綜合征,致使豬病防治的難度進(jìn)一步提高,對(duì)養(yǎng)殖戶造成重大的經(jīng)濟(jì)損失[2]。
豬支原體肺炎的傳播主要是帶菌豬的病原體經(jīng)呼吸道分泌物或氣霧接觸而傳播,感染不受年齡、性別及品種的影響,主要經(jīng)哺乳母豬傳染給仔豬。該病沒有季節(jié)性特點(diǎn),以冬春交際時(shí)常見,呈地方性流行,根據(jù)病程可分為急性、慢性和隱性3個(gè)類型。其嚴(yán)重程度常與管理水平如豬群密集、豬舍濕冷等衛(wèi)生環(huán)境以及飼養(yǎng)管理規(guī)范等因素相關(guān)。易感豬與帶菌豬接觸后,潛伏期可達(dá)10 d或更長,感染較普遍是6~10周齡豬,癥狀最早可見于2~3周齡仔豬,許多豬感染后在4~6月齡才出現(xiàn)癥狀。如病情以急性、暴發(fā)形式出現(xiàn),短時(shí)間內(nèi)會(huì)傳染大量豬群,且病死率高,給豬場(chǎng)造成重大損失[3]。Mhp傳播距離可達(dá)9.2 km,該病在傳染后應(yīng)及時(shí)采取相應(yīng)的應(yīng)急措施,否則易引發(fā)大面積感染,使得疫病防控更難[4]。
豬肺炎支原體是細(xì)胞外病原體,早期感染主要是病原體聚集并粘連在呼吸道上皮細(xì)胞,識(shí)別呼吸道黏膜纖毛細(xì)胞特異性受體,損傷纖毛和上皮細(xì)胞,逐漸引起感染細(xì)胞病變、死亡,纖毛萎縮及功能受損,引起支氣管炎。而隨后分泌的一些有害因子,進(jìn)一步破壞黏膜層,纖毛大量脫落,無法通過擺動(dòng)功能排除肺泡分泌物、空氣源性的微粒粉塵及各種致病菌,使其他病原菌易于侵入,導(dǎo)致豬體的體液免疫和細(xì)胞免疫功能降低,而引起繼發(fā)感染。伴隨著感染引發(fā)的炎癥面積逐漸擴(kuò)大至肺組織,肺泡出現(xiàn)感染,呼吸功能受到影響,肺活量隨之降低,患豬出現(xiàn)咳嗽、氣喘[5]。肺炎感染進(jìn)一步加重時(shí),患豬呼吸和血液循環(huán)系統(tǒng)機(jī)能會(huì)受到影響,嚴(yán)重缺氧時(shí)會(huì)導(dǎo)致心力衰竭和窒息死亡[3]。
臨床初期癥狀主要表現(xiàn)為氣喘、無痰慢性干咳,尤其在進(jìn)食或運(yùn)動(dòng)后,癥狀表現(xiàn)更為明顯;夜間可聽見患豬哮喘聲,嚴(yán)重時(shí)會(huì)有明顯缺氧癥狀。此外,患豬還會(huì)出現(xiàn)低燒,精神萎靡、皮毛粗亂,趴窩不愿站立,食欲出現(xiàn)減退,身體逐漸消瘦,且飼料轉(zhuǎn)化率低,特別是幼豬,造成大量飼料和人力的浪費(fèi)。該病主要是經(jīng)哺乳母豬傳染給小豬,但感染不受年齡限制,包括乳豬和種豬均可感染。豬感染肺炎支原體后會(huì)有一定潛伏期,在病癥持續(xù)2~3個(gè)月后,患豬免疫力會(huì)降低,在機(jī)體抵抗力變?nèi)鯐r(shí)易引發(fā)肺炎[6]。
患豬感染支原體肺炎,通常會(huì)有大量中性粒細(xì)胞聚集腔體、氣管周圍及肺泡中,解剖時(shí)以肺部病變?yōu)橹?,其他組織器官一般沒有特殊病變,肺部病變主要出現(xiàn)在肺臟、肺門淋巴結(jié)和縱膈淋巴結(jié)。其中肺有不同程度的水腫和氣腫并膨大,兩肺肺尖葉和心葉出現(xiàn)胰樣變和肉樣變,與非病灶有明顯界限,顏色為紫紅到黃褐色;肺門和縱膈淋巴結(jié)明顯腫大、質(zhì)硬、灰白色切面[7]。隨著病情的惡化,在支氣管附近會(huì)出現(xiàn)淋巴細(xì)胞增加而產(chǎn)生的淋巴增生,肺泡間的間隙增厚,支氣管擴(kuò)張困難,肺泡正常氣體交換受到影響,患豬表現(xiàn)出氣喘現(xiàn)象。
5.1 病原學(xué)診斷檢測(cè)
5.1.1 分離培養(yǎng) 豬肺炎支原體是難分離和鑒定的病原體,Mhp活力也會(huì)因分離方法不同而有差異。從豬支原體肺炎感染豬分離肺炎支原體時(shí),常伴有其他病菌如豬鼻支原體和絮狀支原體的感染,且豬肺炎支原體生長較豬鼻支原體緩慢,對(duì)培養(yǎng)條件要求更苛刻,分離培養(yǎng)過程中易被豬鼻支原體所覆蓋。感染肺炎經(jīng)治愈的豬以及使用抗生素治療的患豬也很難分離出Mhp[8]。
5.1.2 普通PCR診斷技術(shù) 隨著分子生物學(xué)的發(fā)展,PCR診斷技術(shù)已成為病原學(xué)檢測(cè)的主要方法,該方法克服了支原體分離培養(yǎng)難、血清學(xué)檢測(cè)易產(chǎn)生交叉反應(yīng)及對(duì)血清質(zhì)量要求嚴(yán)的缺點(diǎn),能快速地檢測(cè)出微量的微生物,敏感性強(qiáng),尤其在豬發(fā)生肺炎的急性期,PCR診斷方法具有高度敏感性。豬肺炎支原體的P36蛋白是Mhp的特征性蛋白,該蛋白片段基因的擴(kuò)增可將豬肺炎支原體與絮狀支原體及豬鼻支原體等感染區(qū)別。劉茂軍等[9]根據(jù)豬肺炎支原體P36蛋白基因序列設(shè)計(jì)一對(duì)引物,擴(kuò)增到Mhp,特異性強(qiáng),建立豬肺炎支原體PCR檢測(cè)方法,并將該方法運(yùn)用到Mhp的特異性檢測(cè)中,為臨床上Mhp的鑒定提供了快速簡便的方法。
5.1.3 免疫熒光技術(shù) 早在1970年就有報(bào)道通過熒光技術(shù)檢測(cè)豬肺中的Mhp。但熒光抗體技術(shù)在患豬肺部存在大量Mhp時(shí),檢測(cè)準(zhǔn)確度高;在患豬接受抗生素等藥物治療或轉(zhuǎn)慢性感染時(shí),由于體內(nèi)Mhp數(shù)量減少,熒光抗體技術(shù)檢測(cè)易出現(xiàn)假陰性,因此,該方法適合于Mhp急性期感染檢測(cè)[8]。
5.2 血清學(xué)診斷檢測(cè)
5.2.1 間接血凝試驗(yàn)(IHA) IHA方法優(yōu)點(diǎn)是敏感性高,操作簡便快速,價(jià)格便宜,是診斷豬支原體肺炎常用方法之一。缺點(diǎn)是該檢測(cè)方法與其他支原體之間存在交叉反應(yīng),有研究發(fā)現(xiàn)感染豬的血清中含有易溶血的特異性吸附因子,對(duì)紅細(xì)胞要求嚴(yán)格,個(gè)體差異致紅細(xì)胞不易標(biāo)準(zhǔn)化[10],且血清中的雜質(zhì)、細(xì)菌污染等常引起反應(yīng)失敗或非特異性凝集,這使間接血凝試驗(yàn)在臨床應(yīng)用中受到了一定的限制[1]。
5.2.2 補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)(CFT) 目前主要有微管補(bǔ)體結(jié)合和微量修正補(bǔ)體結(jié)合兩種有效補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)應(yīng)用于檢測(cè)豬血清中Mhp抗體,CFT陽性率與豬肺部病變有較好的相關(guān)性,但在敏感性和特異性方面存在一定局限性,存在很高的假陽性和假陰性,早期檢測(cè)敏感,后期敏感性較差[8]。
5.2.3 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA) ELISA方法能進(jìn)行定量分析,特異性強(qiáng),并且在后期檢測(cè)中的效價(jià)仍然很高。該方法克服了熒光抗體技術(shù)不能有效檢測(cè)抗生素等藥物治療中的感染豬以及樣品不能長期保存的缺點(diǎn),且比熒光抗體法更敏感,是目前國內(nèi)外最常用于診斷Mhp的方法之一。靳岷等以Mhp 168株為材料,利用Mhp的全菌蛋白作為包被建立了間接ELISA方法,并經(jīng)臨床試驗(yàn)證明有一定的實(shí)用性[11]。
6.1 預(yù)防措施 由于肺炎支原體可通過健康豬與患豬直接接觸或氣溶膠傳播,且傳播距離遠(yuǎn),又常與其他病原體混合感染或繼發(fā)感染,引起豬呼吸道綜合征,致使病情進(jìn)一步加重,防控難度加大。因此,豬支原體肺炎的控制要做到種豬凈化、環(huán)境控制、疫苗免疫、藥物預(yù)防與治療四步。即推行自繁自養(yǎng)及全進(jìn)全出的管理模式,加強(qiáng)檢疫檢驗(yàn)及源頭凈化,改善養(yǎng)殖環(huán)境及掐斷中間傳播媒介,開展預(yù)防保健及相關(guān)疫苗免疫程序,長期堅(jiān)持,才能有效控制該病的發(fā)生。在已發(fā)病的地區(qū),要采取積極主動(dòng)措施,對(duì)未發(fā)病的豬場(chǎng)或圈舍內(nèi)的豬接種豬支原體肺炎活疫苗,進(jìn)行緊急預(yù)防[12]。
6.2 藥物的治療 目前許多藥物如四環(huán)素、替米考星、泰妙菌素、喹諾酮類等對(duì)豬支原體肺炎均有較好的治療效果,能有效抑制該病,但四環(huán)素類藥物停藥后效果不佳。泰妙菌素、林可霉素或氟苯尼考等輔以氨茶堿,以及中藥清肺止咳散、定喘散等可治療輕微型豬氣喘病。喹諾酮類藥物多用于針劑,口服時(shí)用量過大懷孕母豬易導(dǎo)致停食[13]。用泰樂菌素+魚腥草注射液,按每千克體重肌肉注射0.2 mL,1次/d,5 d為一個(gè)療程,但泰樂菌素耐藥情況嚴(yán)重,后期藥效下降[3]。合理用藥,藥物投放的時(shí)間、種類、劑量、療程應(yīng)根據(jù)豬群狀況確定。由于支原體并未進(jìn)入血液,主要定植于呼吸道纖毛上,藥物代謝能發(fā)揮的有效濃度并不高,因此,藥物對(duì)支原體肺炎的防治效果有一定局限性。
豬支原體肺炎普遍存在于世界各地,發(fā)病率高,但因病死率低,一度不被養(yǎng)殖戶重視。近年隨著養(yǎng)豬業(yè)規(guī)?;潭炔粩嗵岣撸B(yǎng)殖戶已逐步認(rèn)識(shí)到了豬支原體肺炎造成的經(jīng)濟(jì)損失,防疫意識(shí)明顯提升。馮志新[14]研究員調(diào)查報(bào)道顯示,“目前全球豬支原體肺炎感染率在70%~90%,除了北歐的瑞士、芬蘭、丹麥等幾個(gè)國家凈化了該病,大部分養(yǎng)豬國家的感染率相差無幾?!泵磕曦i呼吸道疾病引起的直接損失達(dá)到100億元以上,在高密度飼養(yǎng)的集約化豬場(chǎng),一旦暴發(fā)該病,引起的經(jīng)濟(jì)損失不容小覷。
作為能夠通過氣溶膠傳播的呼吸道疾病,單靠藥物或疫苗是無法做到豬場(chǎng)豬肺炎支原體的凈化,需要從傳染源、傳播途徑、飼養(yǎng)管理、環(huán)境等全面防控。一旦傳入該病后,豬場(chǎng)要采取積極嚴(yán)密的措施,否則豬支原體肺炎與其他病原體繼發(fā)感染其他疾病,很難徹底撲滅。因此,有必要掌握其流行特點(diǎn),認(rèn)識(shí)其產(chǎn)生的危害,做好生物防控,加強(qiáng)飼養(yǎng)管理及相關(guān)預(yù)防治療措施。同時(shí)對(duì)MPS的正確診斷和及早防控是全球需迫切解決的重要難題。
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