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某些中草藥對(duì)犬貓皮膚病病原菌抑制效能試驗(yàn)

2018-03-19 03:32:02周其琛
今日畜牧獸醫(yī) 2018年6期
關(guān)鍵詞:煎劑平皿丁香

周其琛

(天津市河西區(qū)純美寵物診所 300221)

犬貓皮膚病種類(lèi)有很多,有因寄生蟲(chóng)而引起的,也有因真菌、細(xì)菌而導(dǎo)致的,還有過(guò)敏性皮膚病,犬貓所罹患的這些所有的皮膚病都會(huì)導(dǎo)致病患的皮膚出現(xiàn)紅腫以及瘙癢。隨著病情越發(fā)嚴(yán)重,犬貓皮膚上還會(huì)出現(xiàn)紅斑,皮膚潰爛導(dǎo)致脫毛等癥狀。這對(duì)犬貓以及飼主而言是都是極為痛苦的,不僅影響其犬貓的外貌還會(huì)造成犬貓瘙癢難耐。犬貓皮膚病比較常見(jiàn)的是感染了毛瘡白癬菌、犬小芽孢皮癬菌、白色念珠菌以及厚皮馬拉色氏霉菌等病原菌。犬貓皮膚病治療一般從屬于西醫(yī)內(nèi)科范疇,在以前被稱(chēng)為瘡瘍科,所有的皮膚病都可稱(chēng)為瘡,而瘍是指所有屬于內(nèi)科類(lèi)疾病,包括癤、痹、瘤等等,但是在臨床上西醫(yī)療法對(duì)犬貓皮膚病病原菌的抑制作用有限,會(huì)激發(fā)抗藥性菌株的出現(xiàn),治標(biāo)不治本,導(dǎo)致犬貓皮膚病容易陷入復(fù)發(fā)且再治療就會(huì)相對(duì)比較困難的情況。

在我國(guó)古代醫(yī)學(xué)發(fā)展史上就有很多關(guān)于皮膚病的相關(guān)論述,例如,《內(nèi)經(jīng)》中就有不少相關(guān)治療記載,《素問(wèn)·痹論》中寫(xiě)道:“體內(nèi)衛(wèi)氣,其性漂疾,不能形于脈也,故循于皮膚之中,分肉之間”,還有《靈樞·本臟篇》以及《諸病源侯論》中對(duì)皮膚病發(fā)病的原因以及其癥狀和病理均有表述。我國(guó)中醫(yī)認(rèn)為皮膚病是由風(fēng)、濕、熱等因素由內(nèi)而外發(fā)作的,是本體狀況的外在表現(xiàn)。犬貓的皮膚病是一種比較常見(jiàn)的病,同時(shí)也是易發(fā)病,往往存在反復(fù)發(fā)作的情況,徹底根治難,特別是在西醫(yī)治療中一旦形成抗藥性菌株,將會(huì)越來(lái)越難以治療。因此,我們可以從中醫(yī)調(diào)理入手,通過(guò)中醫(yī)固其源,止于表的方式來(lái)進(jìn)行治標(biāo)治本,避免西醫(yī)療法中使用抗菌素產(chǎn)生抗藥性菌株的情況。通過(guò)本實(shí)驗(yàn)主要是為了驗(yàn)證某些中草藥對(duì)犬貓皮膚病病原菌的抑制效能,嘗試從中醫(yī)角度探索出一條能夠有效治療犬貓皮膚病的途徑,使治療過(guò)程對(duì)犬貓不會(huì)產(chǎn)生毒副作用,尋找出更高效且不會(huì)產(chǎn)生耐藥性的中草藥,期望能夠在治療犬貓皮膚病問(wèn)題上得以創(chuàng)新,治標(biāo)又治本。筆者從患病犬貓身上通過(guò)分離獲取并培養(yǎng)了四種犬貓皮膚病病原菌,用來(lái)進(jìn)行某些中草藥的抑菌效能試驗(yàn)。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 試驗(yàn)菌株

實(shí)驗(yàn)所用菌株包括:毛瘡白癬菌、白色念珠菌、犬小芽孢皮癬菌、厚皮馬拉色氏霉菌,這些菌種均從罹患皮膚病犬貓皮膚上分離獲取,經(jīng)培養(yǎng)用于實(shí)驗(yàn)。

1.2 培養(yǎng)基

本試驗(yàn)采用的真菌培養(yǎng)基是瓊脂平皿培養(yǎng)基,瓊脂平皿培養(yǎng)基中的主要成分包括瓊脂(寒天)、胨、葡萄糖、酵母、硫酸鎂、磷酸鉀等。

1.3 中草藥試驗(yàn)品的制備

進(jìn)行中草藥試驗(yàn)品的制備需要根據(jù)每種中草藥不同的性質(zhì)特點(diǎn)進(jìn)行制備。本實(shí)驗(yàn)選用了12種中草藥,其中包括野生的鮮品,也包括已經(jīng)曬干的干品。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中由于丁香中含揮發(fā)油比較多,針對(duì)其特點(diǎn)對(duì)丁香進(jìn)行制備。首先要從丁香中提取出揮發(fā)油,留存?zhèn)溆?,其次是?duì)丁香進(jìn)行煎劑制備,準(zhǔn)備兩種形式的丁香實(shí)驗(yàn)材料進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。在具體實(shí)驗(yàn)過(guò)程中需要分步驟進(jìn)行依次實(shí)驗(yàn)。先將揮發(fā)油用于實(shí)驗(yàn),接著在單獨(dú)將煎劑用于實(shí)驗(yàn),之后再將揮發(fā)油和煎劑合并液進(jìn)行實(shí)驗(yàn),已確定丁香真正起作用的成分。通常在臨床治療的時(shí)候羊蹄、蘆薈以及鳳仙都多采用鮮品的形式入藥,因此在實(shí)驗(yàn)中我們也采用鮮品的形式進(jìn)行實(shí)驗(yàn),除此之外,再以煎劑的形式進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。其他中草藥則都要制備其煎劑,并將3次煎劑進(jìn)行合并,得到的煎劑合并液要進(jìn)行濃縮,使每毫升藥液含生藥1g,在經(jīng)過(guò)15min的120℃高壓滅菌以備實(shí)驗(yàn)用。

2 試驗(yàn)方法

2.1 菌懸液配制

配制菌懸液需要將用于實(shí)驗(yàn)的菌種根據(jù)其生長(zhǎng)習(xí)性進(jìn)行培養(yǎng)。使用試管斜面培養(yǎng)基分別進(jìn)行在27℃環(huán)境中培養(yǎng)一星期以及在37℃環(huán)境中培養(yǎng)24h,培養(yǎng)成功經(jīng)檢查后,使用滅菌生理鹽水將其調(diào)制成108CFU以備實(shí)驗(yàn)使用。

2.2 平皿打孔

使用平皿打孔法測(cè)試不同中草藥對(duì)不同菌株的藥敏試驗(yàn)。將調(diào)配好的用于實(shí)驗(yàn)的菌液均勻涂在SDA培養(yǎng)基表面,再使用平皿打孔法用直徑為6mm的瓊脂打孔器在平板上進(jìn)行打孔,之后進(jìn)行封底。

2.3 加樣

加樣的時(shí)候可以使用微量加樣器來(lái)吸取用于實(shí)驗(yàn)的已制備好的中草藥藥液,分別吸取并分別加入到各個(gè)孔里,每孔都平均加入 50u1。

2.4 抗菌中草藥的藥敏試驗(yàn)

進(jìn)行抗菌中草藥的藥敏試驗(yàn)采用常規(guī)藥敏紙片法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)測(cè)定,在各種用于實(shí)驗(yàn)的中草藥藥液中分別都浸入直徑為6mm的滅菌濾紙,在中草藥藥液中浸潤(rùn)40min后將滅菌濾紙取出待用,應(yīng)用于試驗(yàn)中時(shí)放入到之前準(zhǔn)備好的抑菌平皿中。

2.5 細(xì)菌培養(yǎng)

每種病原菌都有其獨(dú)特的生存習(xí)性,因此根據(jù)其各自不同的習(xí)性分別采取在27℃環(huán)境中培養(yǎng)一星期以及在37℃環(huán)境中培養(yǎng)24h,進(jìn)行恒溫培養(yǎng)。

2.6 依據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果判定

根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行藥敏實(shí)驗(yàn)判定,對(duì)照中藥抑菌圈的標(biāo)準(zhǔn)量進(jìn)行定論,當(dāng)抑菌圈直徑在10m1以下,則實(shí)驗(yàn)結(jié)果為耐藥,用“+”表示;當(dāng)抑菌圈直徑在 10~15m1之間,則實(shí)驗(yàn)結(jié)果為中敏,用“++”表示;當(dāng)抑菌圈直徑在16m1以上,則實(shí)驗(yàn)結(jié)果為高敏,用“+++”表示。12種中草藥抑菌效果表如下圖所示:

3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論

經(jīng)試驗(yàn)結(jié)果可知,這12種中草藥對(duì)犬貓皮膚病這幾種常見(jiàn)病原菌確實(shí)具有抑菌作用,其抑菌程度各不相同。在這12味中草藥中丁香、羊蹄以及梔子抑菌效果最為顯著,能夠更高效的抑制犬貓皮膚病病原菌。同時(shí)從實(shí)驗(yàn)結(jié)果中我們還能夠看出對(duì)中草藥使用不同的提取方法,其抑菌結(jié)果最后也不一樣,例如,丁香揮發(fā)油與煎劑提取液合并使用的抑菌效果要比單純使用丁香揮發(fā)油或煎劑的抑菌效果要好。

4 結(jié)語(yǔ)

綜上所述,我國(guó)地大物博,擁有很多豐富的中草藥,治療犬貓皮膚病僅僅依靠西醫(yī)治療容易導(dǎo)致病原菌形成耐藥性,造成治療效果的不理想。而中醫(yī)療法通過(guò)使用中草藥進(jìn)行調(diào)理,能夠使犬貓皮膚病治標(biāo)又治本,無(wú)副作用,避免治療過(guò)程中抗藥性菌株的產(chǎn)生,本實(shí)驗(yàn)通過(guò)探究,驗(yàn)證了幾種中草藥對(duì)犬貓皮膚病病原菌的抑制效能,以期能實(shí)現(xiàn)犬貓皮膚病治療的最佳方式。

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