王貽蓮，劉寶軍，李玲，扈進(jìn)冬，李紀(jì)順*，張薇，盧德鵬

(1. 齊魯工業(yè)大學(xué)(山東省科學(xué)院)，山東省科學(xué)院生態(tài)研究所，山東省應(yīng)用微生物重點實驗室，山東 濟(jì)南 250103；2.農(nóng)業(yè)部農(nóng)藥檢定所，北京 100026；3.山東泰諾藥業(yè)有限公司，山東 諸城262200)

根結(jié)線蟲(Meloidogynespp.)是一種高度?；偷耐羵餍圆≡?。據(jù)報道，我國約有50%的溫室蔬菜被根結(jié)線蟲為害，每年造成的經(jīng)濟(jì)損失約4 億美元[1]。目前，生產(chǎn)上對番茄根結(jié)線蟲的防治仍以化學(xué)防治為主，隨著綠色食品、有機(jī)食品需求的增加，生物安全性高、環(huán)境友好的生防制劑成為近年來的研究熱點。大量研究表明，利用微生物防治及生態(tài)調(diào)控根結(jié)線蟲是最為安全、有效的防控措施[2]。但由于土壤環(huán)境復(fù)雜，土壤中存在的抑菌物質(zhì)限制了微生物菌劑藥效的發(fā)揮，導(dǎo)致微生物菌劑田間防效較低，農(nóng)民不愿采用。為提高微生物菌劑對番茄根結(jié)線蟲的防治效果，科研人員正在研究與其配套應(yīng)用的施用技術(shù)。余真等[3]研究了以腐熟餐廚廢棄物有機(jī)肥為載體，添加淡紫擬青霉對番茄根結(jié)線蟲病的防治效果；肖同建等[4]利用新鮮雞糞作為生物熏蒸材料并結(jié)合拮抗菌X5覆膜日光消毒，研究了施用生防菌劑與日光消毒和生物熏蒸相結(jié)合防治根結(jié)線蟲的新技術(shù)；馬駿等[5]研究了有機(jī)添加劑對番茄根結(jié)線蟲病的防效。本文以番茄根結(jié)線蟲為研究對象，采用在整地時添加營養(yǎng)基質(zhì)、有機(jī)肥和蠟樣芽胞桿菌BCJB01粉劑，移栽時再穴施該粉劑的處理方式，對BCJB01粉劑的配套應(yīng)用技術(shù)進(jìn)行了初步研究，以期為蠟樣芽胞桿菌菌劑的推廣應(yīng)用提供技術(shù)支持。

1 材料與方法

1.1 供試菌劑、有機(jī)肥、營養(yǎng)基質(zhì)及對照藥劑

微生物菌劑： BCJB01粉劑，活菌數(shù)量為15億cfu/g(自制)；對照藥劑：10%噻唑膦顆粒劑(日本石原產(chǎn)業(yè)株式會社)；有機(jī)肥：海藻生物有機(jī)肥(濟(jì)南澳利新型肥料有限公司)。營養(yǎng)基質(zhì)：有機(jī)添加物(市售，主要成分暫不公開)。

1.2 供試作物

番茄，品種為“天寶一號”(濟(jì)南大江種子有限公司)。

1.3 防治對象

番茄根結(jié)線蟲(Meloidogynespp.)

1.4 試驗方法

試驗在山東省科學(xué)院生態(tài)研究所試驗田中進(jìn)行，該試驗田已連續(xù)5年種植番茄，根結(jié)線蟲病株率在80%以上。在2016年6月10日開始整地，同時施用有機(jī)肥、營養(yǎng)基質(zhì)、BCJB01粉劑及對照藥劑10%噻唑膦顆粒劑。6月24日移栽番茄苗，同時穴施BCJB01粉劑,空白對照和對照藥劑處理除外。至8月24日調(diào)查期間，試驗不再施用防治根結(jié)線蟲的藥劑。

1.5 試驗處理

設(shè)BCJB01菌劑共4個處理，常規(guī)農(nóng)藥對照1個處理，空白對照1個處理，每處理3行，3次重復(fù)，隨機(jī)分布，每組處理面積約0.1畝(1畝=666.7 m2)。

空白對照：未施用BCJB01菌劑、有機(jī)肥及營養(yǎng)基質(zhì)；

處理1:營養(yǎng)基質(zhì) 300千克/畝+有機(jī)肥 200 千克/畝+ BCJB01菌劑 20 千克/畝；

處理2：有機(jī)肥200 千克/畝+ BCJB01菌劑 20 千克/畝；

處理3：營養(yǎng)基質(zhì) 300 千克/畝+ BCJB01菌劑 20千克/畝；

處理4：BCJB01菌劑 20 千克/畝；

農(nóng)藥對照：10%噻唑膦顆粒劑2 千克/畝。

1.6 調(diào)查及病害統(tǒng)計方法

2016年8月24日，調(diào)查植株受害級別，每處理組調(diào)查總株數(shù)不低于90株，記錄調(diào)查總株數(shù)和各級病株數(shù)，計算根結(jié)指數(shù)和防治效果；病株根結(jié)分級標(biāo)準(zhǔn)由輕到重劃分為5個等級[6]:0級，無根結(jié)；1級，有少數(shù)根結(jié)；2級，大部分根上有根結(jié)；3級，在蟲癭上有再生根結(jié)；4級，根結(jié)互相連接成根結(jié)團(tuán)塊。

根結(jié)指數(shù)=[Σ(各級病株數(shù)×相應(yīng)級數(shù)值)/(調(diào)查總株數(shù)×最高病級)]×100%；

防治效果=(對照根結(jié)指數(shù)-處理根結(jié)指數(shù))/對照根結(jié)指數(shù)×100%。

數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析用SPSS16.0 軟件進(jìn)行，多重比較采用鄧肯氏新復(fù)極差檢驗法。

2 結(jié)果與分析

由表1可知，不同處理方式的BCJB01粉劑對番茄根結(jié)線蟲的防治效果存在差異。其中，在整地時同時添加有機(jī)肥和營養(yǎng)基質(zhì)的處理對番茄根結(jié)線蟲的防治效果最好，防效為77.45%，優(yōu)于對照藥劑10%噻唑膦顆粒劑；在整地時單加有機(jī)肥的處理好于單加營養(yǎng)基質(zhì)的處理，對番茄根結(jié)線蟲的防治效果分別為61.73%和49.72%。單施用BCJB01粉劑處理對根結(jié)線蟲的防治效果最弱，防效為46.97%。

表1 不同處理方式的BCJB01粉劑對番茄根結(jié)線蟲的防治效果Table 1 Control effect of BCJB01 pulvis with different treatments on tomato root-knot nematode

注：每行數(shù)據(jù)后不同字母表示差異顯著(P≤ 0.05)。

3 結(jié)果與討論

近年來，利用芽胞桿菌防治根結(jié)線蟲的報道日益增加，但田間防治效果均不太理想，為穩(wěn)定防治效果，人們開始研究與其配套應(yīng)用的施用技術(shù)。肖同建等[4]應(yīng)用蠟樣芽胞桿菌X5制劑與日光消毒和生物熏蒸相結(jié)合防治番茄根結(jié)線蟲，防效達(dá)82.7%；劉元兵等[7]報道，蠟質(zhì)芽胞桿菌AT31產(chǎn)品在田間使用前利用二次發(fā)酵的方法可以有效地控制黃瓜根結(jié)線蟲病害，防效達(dá)73.46%。本研究采用在整地時添加營養(yǎng)基質(zhì)、有機(jī)肥、微生物菌劑，移栽時再穴施微生物菌劑的處理方式，對蠟樣芽胞桿菌BCJB01粉劑的配套應(yīng)用技術(shù)進(jìn)行了初步研究，結(jié)果顯示，在整地時同時添加有機(jī)肥和營養(yǎng)基質(zhì)的處理對番茄根結(jié)線蟲的防治效果最好，防效為77.45%，優(yōu)于對照藥劑10%噻唑膦顆粒劑對番茄根結(jié)線蟲的防治效果；在整地時單加有機(jī)肥的處理對番茄根結(jié)線蟲的防治效果優(yōu)于單加營養(yǎng)基質(zhì)的處理。研究表明，同時添加有機(jī)肥和營養(yǎng)基質(zhì)更有利于提高BCJB01粉劑對番茄根結(jié)線蟲的防治效果。

Thoden等[8]研究表明,使用有機(jī)添加劑是改善土壤狀況和防治植物寄生線蟲的有效途徑之一。但本研究中選用的營養(yǎng)基質(zhì)(有機(jī)添加劑)對蠟樣芽胞桿菌BCJB01粉劑防效的提高并不明顯，這可能與選用的營養(yǎng)基質(zhì)種類不同有關(guān)。本研究中選用的海藻生物有機(jī)肥，因其含有豐富的有機(jī)質(zhì)，能夠提高蠟樣芽胞桿菌BCJB01粉劑對番茄根結(jié)線蟲的防治效果，防效提高了14.76%。研究發(fā)現(xiàn)，同時添加海藻生物有機(jī)肥和營養(yǎng)基質(zhì)更有利于提高BCJB01粉劑對番茄根結(jié)線蟲的防治效果，防效提高了30.48%，可能兩者同時添加為蠟樣芽胞桿菌BCJB01的定殖生存提供了充足的營養(yǎng)。

[1]HUANG W K, SUN J H, CUI J K, et al. Efficacy Evaluation of FungusSyncephalastrumracemosumand nematicide avermectin against the root-knotnematodeMeloidogyneincognitaon cucumber[J]. PLOS ONE, 2014, 9(2): e89717.

[2]冀宇，武云鵬，王胤，等.功能型復(fù)合微生物菌劑防治黃瓜根結(jié)線蟲的研究[J].中國生物防治學(xué)報，2016，32(4)：493-502.

[3]余真，張又弛，羅文邃.餐廚垃圾制菌肥對番茄根結(jié)線蟲病的防效以及對土壤生物活性的影響[J]. 農(nóng)業(yè)環(huán)境科學(xué)學(xué)報,2015，34(6):1217-1224.

[4]肖同建，李蕊，王小慧，等.施用生防菌菌劑與日光消毒和生物熏蒸相結(jié)合防治番茄根結(jié)線蟲的研究[J]中國生物防治學(xué)報，2012，28(2)：262-268.

[5]馬駿，文才藝，劉偉成,等.有機(jī)添加劑對番茄根結(jié)線蟲病的防效[J].北方園藝，2013(8)：130-131.

[6]王明霞，嚴(yán)從生，江海坤，等.番茄抗根結(jié)線蟲病基因(Mi)分子標(biāo)記的評估[J].中國蔬菜，2009,1(18):21 -24.

[7]劉元兵，舒暢，高揚(yáng)，等. 蠟質(zhì)芽孢桿菌AT31防治根結(jié)線蟲的應(yīng)用技術(shù)探討[J].農(nóng)藥科學(xué)與管理，2015,36(10):52-57.

[8]THODEN T C,KORTHALS G W,TERMORSHUIZEN A J.Organic amendments and their influences on plant-parasiticand free-living nematodes:A promising method for nematode management[J].Nematology,2011,13(2):133-153.