楊淑芬 王海穎

（上海中醫(yī)藥大學(xué)，上海 201203）

芳香開竅類中藥性溫，味辛，擅走竄，歸于心肺二經(jīng)。一般古代醫(yī)家利用口服給藥，所用開竅藥多為安宮牛黃丸、蘇合香丸等方劑，在治療厥心痛等急危重癥上發(fā)揮了重要作用。而本次實驗設(shè)計通過鼻黏膜吸收芳香開竅藥，從而增高其血藥濃度，經(jīng)過血腦屏障發(fā)揮開竅醒神之功［1］。本文通過調(diào)查文獻(xiàn)，組成兩個芳香開竅方劑：配方一組（薄荷、白芷、冰片、梔子花）、配方二組（石菖蒲、肉桂、冰片、桂花）。并已通過實驗證明其精油氣霧能使5%戊巴比妥納催眠的小鼠的睡眠潛伏期和睡眠時間明顯縮短［2］。為了進(jìn)一步探究其醒神作用強(qiáng)弱，故設(shè)計與同樣具有芳香開竅作用的風(fēng)油精［3］進(jìn)行對比實驗?，F(xiàn)報告如下。

1 材料與方法

1.1 實驗動物 SPF級ICR小鼠36只，雌雄各半，25～33 g；清潔級短毛豚鼠32只，雌雄各半，體質(zhì)量200～250 g，年齡約1個月大，由上海中醫(yī)藥大學(xué)實驗中心提供，許可證號：SCXK（滬）2013-0016。

1.2 試劑與藥物 戊巴比妥鈉由Merck公司提供，以蒸餾水配制成0.5%溶液。薄荷精油（主要成分薄荷腦）、肉桂精油（主要成分肉桂醛）、白芷精油（主要成分白芷素）、石菖蒲精油（主要成分β細(xì)辛醚）、桂花精油（主要成分十六碳酸）、梔子花精油（主要成分芳樟醇）、合成冰片。以上精油皆為水蒸氣蒸餾法提取，由廣州精美中化有限公司提供。風(fēng)油精（由漳州水仙藥業(yè)有限公司生產(chǎn)）。

1.3 藥物溶液配制 配方一組加入薄荷精油、白芷精油、梔子花精油各 0.2 mL，冰片0.2 g，加蒸餾水至20 mL。配方二組加入肉桂精油、石菖蒲精油、桂花精油各0.2 mL，0.2 g冰片，加蒸餾水至20 mL。風(fēng)油精組加入風(fēng)油精0.8 mL，加蒸餾水至20 mL。

1.4 實驗儀器 超聲波霧化器×2（100 mL），由東莞市樂朝實業(yè)有限公司生產(chǎn)。電子天平，上海中醫(yī)藥大學(xué)動物實驗中心提供。密閉透明塑料箱×2，容積27 cm×35 cm×45 cm，由北京坤朋茶花家居用品有限公司生產(chǎn)。

1.5 實驗方法 1）過敏實驗。（1）實驗?zāi)康模簽樘骄颗浞?號、配方2號和風(fēng)油精的精油氣霧是否會對動物呼吸系統(tǒng)造成刺激反應(yīng)，故使用豚鼠作為實驗動物。豚鼠嗅覺發(fā)達(dá)，易過敏。常用于藥物過敏和平喘藥的研究。豚鼠過敏癥狀表現(xiàn)，見表1。（2）實驗步驟：32只豚鼠，置于動物實驗中心1周，使其適應(yīng)環(huán)境。1周后隨機(jī)分組，每組8只，雌雄各半，分為4組，分別為配方一組，配方二組，風(fēng)油精對照組，空白組。配方一組8只，置入透明塑料箱內(nèi)，給予配方一號氣霧吸入15 min；后取出。記錄噴霧前15 min狀態(tài)，噴霧15 min后的狀態(tài)，噴霧結(jié)束后15 min的狀態(tài)。將塑料箱洗凈，待箱內(nèi)氣味消失后重復(fù)上述步驟，進(jìn)行剩余3組的過敏實驗。隔天重復(fù)以上步驟，實驗共重復(fù)3次。（3）實驗結(jié)果：見表2。配方一號、配方二號和風(fēng)油精均不使豚鼠過敏。2）對比實驗。（1）實驗?zāi)康模簩Ρ扰浞揭唤M、配方二組和風(fēng)油精組的醒神功效。（2）實驗步驟：36只小鼠置于動物實驗中心1周，使其適應(yīng)環(huán)境。1周后稱質(zhì)量，標(biāo)記，并隨機(jī)分組，每組9只，雌雄至少4只，分為4組，分別為配方一組，配方二組，風(fēng)油精組，空白組。將配方一組小鼠置于充滿該組配方氣霧的透明塑料箱內(nèi)15 min，后取出置于空氣15 min，按50 mg/kg比例，腹腔注射5%戊巴比妥鈉溶液。以注射時間到小鼠翻正反射消失為睡眠潛伏期，翻正反射消失持續(xù)時間為睡眠時間。記錄注射時間、睡眠潛伏期和翻正反射消失持續(xù)時間。將塑料箱洗凈，待箱內(nèi)氣味消失后重復(fù)上述步驟，進(jìn)行剩余3組的對比實驗。隔天重復(fù)以上步驟，實驗共重復(fù)3次。每次實驗各組實驗順序隨意。

表1 豚鼠過敏分級

1.6 統(tǒng)計學(xué)處理 應(yīng)用SPSS20.0統(tǒng)計軟件。計量資料以（±s）表示，采用t檢驗檢驗。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 過敏實驗 見表2。配方一號、配方二號和風(fēng)油精均不使豚鼠過敏。

表2 豚鼠過敏強(qiáng)度

2.2 對比實驗 見表3，圖1～2。配方一組和配方二組均能較風(fēng)油精組縮短小鼠睡眠時間（均P＜0.01），配方一組較風(fēng)油精組能延長睡眠潛伏期（P＜0.05），而配方二組和風(fēng)油精組較空白組睡眠潛伏期延長（P＜0.05）。配方二組和風(fēng)油精組比較，睡眠潛伏期差別不大（P＞0.05）。

表3 各配方組對戊巴比妥所致小鼠睡眠時間的影響（±s）

表3 各配方組對戊巴比妥所致小鼠睡眠時間的影響（±s）

與空白對照組比較，*P＜0.05；與風(fēng)油精組比較，△P＜0.05，△△P＜0.01。

組別 n 睡眠時間（min） 睡眠潛伏期（min）配方一組 8 20.78±6.93△△ 11.11±6.14△配方二組 8 26.76±6.77△△ 5.86±1.32*風(fēng)油精組 8 40.54±7.97 5.72±2.77*空白對照組 8 48.23±5.69 4.16±1.10

圖1 各組對小鼠睡眠時間的影響

圖2 各組對小鼠睡眠潛伏期的影響

3 討 論

由實驗結(jié)果可得配方一組和配方二組的醒神效果優(yōu)于同等劑量的風(fēng)油精。風(fēng)油精主要成分為薄荷腦、樟腦、桉葉油醇、水楊酸甲酯［4］。其中薄荷腦能加強(qiáng)戊巴比妥鈉介導(dǎo)的中樞抑制作用［5］，樟腦在中樞受抑制時興奮呼吸，升高血壓［6］。桉葉油醇和水楊酸甲酯主要藥理作用為抗炎抗菌［7-8］。故風(fēng)油精在整體上以消炎鎮(zhèn)痛為其最突出功效，兼芳香醒神，但作用不大。

配方一號和配方二號中幾乎所有中藥都從不同角度達(dá)到開竅醒神之功。冰片不僅能通過開放血腦屏障而提高藥物的腦內(nèi)濃度，而且對中樞神經(jīng)興奮有雙向調(diào)節(jié)作用，既可以鎮(zhèn)靜安神（延長小鼠睡眠潛伏期），又具有醒腦作用（縮短小鼠睡眠時間）［9］。石菖蒲揮發(fā)油主要成分β-細(xì)辛醚通過血腦屏障興奮脊髓、抑制中腦和大腦從而達(dá)到開竅和抗驚厥的作用［10］。小劑量白芷具有興奮延腦呼吸中樞、血管中樞［11］。肉桂對中樞系統(tǒng)不同部位具有興奮或抑制作用［12］，對全身血管有擴(kuò)張作用［13］。梔子花有抗焦慮作用［14］，桂花能有效抗炎抗氧化［15］。因此通過現(xiàn)代藥理可知，配方一號和配方二號藥物成分的醒神作用強(qiáng)于風(fēng)油精。

本實驗證明了自擬的兩個中藥開竅配方精油的醒腦作用強(qiáng)于具有一定刺激氣味的風(fēng)油精，且根據(jù)實驗結(jié)果，風(fēng)油精的醒神效果較空白對照組水蒸氣而言，并無明顯差距。通過本次實驗，則表明風(fēng)油精確有醒神功效但作用不強(qiáng)?！侗静菥V目》記載“冰片，通諸竅，散郁火”?！渡褶r(nóng)本草經(jīng)》認(rèn)為“石菖蒲，補(bǔ)五臟，通九竅，明耳目”，都為本次實驗配方的醒神功效提供理論依據(jù)?；诿鞔_藥理實驗的基礎(chǔ)上，日后將進(jìn)一步以人體為對象設(shè)計精油實驗，明確人體對于精油氣霧的敏感度和其對人體的醒神作用，以期望提高大部分“倦怠嗜睡的疲勞綜合癥者”的生活質(zhì)量，且本實驗僅通過文獻(xiàn)來明確每味中藥對于中樞系統(tǒng)的藥理作用，今后實驗將側(cè)重于從復(fù)方角度，研究闡述配方整體聯(lián)合產(chǎn)生、互相影響的功效。

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