劉 存，劉 暢，劉 琪，王 靜，李秀博，崔尚金，梁 琳*

（1.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京畜牧獸醫(yī)研究所，北京 100193；2.農(nóng)業(yè)部獸用藥物與獸醫(yī)生物技術(shù)北京科學(xué)觀測實(shí)驗(yàn)站，北京100193）

A型塞內(nèi)卡病毒（Senecavirus A， SVA）又稱為塞內(nèi)卡山谷病毒（Seneca Valley virus， SVV）是單股正鏈RNA病毒，是小RNA病毒科塞內(nèi)卡病毒屬唯一成員。該病毒能夠感染不同年齡的豬且可致新生仔豬死亡，其對養(yǎng)豬業(yè)的生產(chǎn)和經(jīng)濟(jì)效益具有很大地威脅。2002年，SVA原型毒株SVV-001在美國馬里蘭州蓋瑟斯堡，由美國遺傳治療公司科研人員從人胚胎視網(wǎng)膜細(xì)胞系（PER.C6）中首次分離[1]。之后對SVA原型毒株SVV-001的研究主要集中于其抗神經(jīng)內(nèi)分泌源性腫瘤的作用，研究人員將其應(yīng)用于治療不同類型的腫瘤[2-4]。SVA原型毒株對豬沒有明顯的致病性，但是加拿大和美國的研究人員分別在2008年和2012年報道了A型塞內(nèi)卡病毒相關(guān)的豬水皰病病例，這證實(shí)了SVA與豬水皰病有關(guān)[5-7]。2014年之前，SVA在豬群中的流行、傳播、對豬的致病性及其分子特征等相關(guān)的研究鮮有報道。然而，自2014年底以來，SVA在美國、巴西等國家豬群暴發(fā)給養(yǎng)豬業(yè)造成較大損失，同時在北美以外地區(qū)也發(fā)現(xiàn)SVA所致的豬水皰病[8-16]。SVA是新發(fā)的豬病毒性疾病，其所致的臨床癥狀與其他致水皰病相關(guān)病原——口蹄疫病毒（Foot and mouth disease virus， FMDV）、豬傳染性水皰病病毒（Swine Vesicular Disease Virus， SVDV）、 水皰性口炎病毒（vesicular stomatitis virus， VSV) 和豬水皰性皮疹（Vesicular Exanthema of Swine Virus， VESV）所致臨床癥狀相似，影響新生仔豬存活率，對養(yǎng)豬業(yè)存在重大地潛在威脅。為了進(jìn)一步了解SVA的病原學(xué)特征及其對豬的致病特性，本文就SVA的流行病學(xué)、致病性、診斷方法等方面進(jìn)行綜述。

1 SVA的發(fā)現(xiàn)與流行

豬原發(fā)性水皰?。≒orcine idiopathic vesicular disease， PIVD）用以指不明病因所致在豬皮膚、鼻鏡、口腔、蹄部冠狀帶等部位出現(xiàn)糜爛和水皰的病例。自1980年以來，美國、加拿大、澳大利亞、新西蘭、意大利的豬群就被報道發(fā)生PIVD，這些病例排除了FMDV、VSV、VESV、SVDV等豬水皰病相關(guān)病原的感染[6，7]。2002年，美國基因治療公司從PER.C6細(xì)胞中分離到SVA原性毒株SVV-001，已確實(shí)該病毒是通過被污染的牛血清或者豬胰酶被引入到其他細(xì)胞系中的[1]。最初研究發(fā)現(xiàn)，SVV-001對人和動物沒有致病性，也無證據(jù)表明其與任何有害的疾病有關(guān)系[2]。然而，加拿大和美國的研究人員分別在2008年和2012年報道了A型塞內(nèi)卡病毒相關(guān)的水皰病[5，7]。這些提供了SVA與PIVD相關(guān)的證據(jù)。

2014年以前，豬特發(fā)性水皰病的報道較少。2004年，美國印第安納州發(fā)生豬水皰病，排除了外來動物疫病病原的感染，但其病因未明確[17]。2006年，Knowles等通過對12株小RNA樣病毒的分析，發(fā)現(xiàn)這些病毒與SVV-001具有相同的抗原性，但并未確定這些病毒即是SVA[18]。2014年底以來，SVA相關(guān)的豬水皰病在巴西不同地區(qū)的斷奶仔豬和成年豬群暴發(fā)，且據(jù)統(tǒng)計(jì)，1-4日齡的新生仔豬死亡率升高[19，20]。巴西動物衛(wèi)生部門進(jìn)行的官方檢測排除了口蹄疫病毒、豬瘟病毒和豬流行性腹瀉病毒等動物疫病病原的感染，但由其他研究組從不同地區(qū)的發(fā)病豬中檢測出了SVA[17]。巴西一項(xiàng)10年（2007-2016）豬血清學(xué)回顧性研究表明，在2014年之前SVA并未在巴西豬群循環(huán)，而美國一項(xiàng)20年豬血清學(xué)回顧性研究表明，SVA在美國豬群中分布廣泛且自1980年以來一直在豬群中循環(huán)[5]。自2015年初，SVA相關(guān)的水皰病暴發(fā)增多，且發(fā)現(xiàn)SVA感染與新生仔豬的死亡率升高有關(guān)[8-18，19-22]。2016年，加拿大、泰國、哥倫比亞的豬場也受到了SVA感染的影響。

2015年，我國首次從廣東地區(qū)暴發(fā)PIVD豬場的樣品中檢測到SVA，感染母豬發(fā)生水皰病臨床癥狀，感染仔豬出現(xiàn)急性死亡[11]。自2015年以來，我國已在廣東、福建、河南、湖北等地區(qū)檢測出SVA。SVA與FMDV為同病毒科成員，SVA危害雖不及FMDV，但是其是否會隨貿(mào)易而擴(kuò)散并形成大范圍流行尚不可知。但防患于未然，需引起對SVA的重視，謹(jǐn)防其擴(kuò)散形成流行。

2 SVA流行病學(xué)

由于自2015初以來，關(guān)于SVA感染所致豬水皰病報道顯著增多，SVA的許多特征也得到了鑒定，因此2015年被認(rèn)為是SVA感染流行病學(xué)的轉(zhuǎn)折點(diǎn)。SVA易感動物可能十分廣泛，除不同年齡豬均易感外，研究者在其他動物如牛、鼠等和人的血清中也發(fā)現(xiàn)了SVA中和抗體[18]，這些發(fā)現(xiàn)也提示SVA可感染動物種類可能較多。

SVA感染的發(fā)病率和死亡率在不同種豬上存在差異。SVA潛伏期為4～5 d，在首次感染的豬場，依據(jù)豬的日齡和臨床癥狀，發(fā)病率介于4%到70%之間，斷奶仔豬發(fā)病率在0.5%～5%間，育肥豬發(fā)病率在5%～30%間，不同的地區(qū)間存在差異，母豬發(fā)病率高，可達(dá)70%～90%[9，19，23，24]。然而，這些感染豬的死亡率很低，約為0.2%，且恢復(fù)較快，臨床癥狀持續(xù)10～15 d[11]。對于新生仔豬，尤其是1至4日齡的新生仔豬發(fā)病率可達(dá)70%，死亡率在15%～30%之間[23]。目前尚無感染了SVA的豬場再次暴發(fā)豬水皰病的報道。在傳播媒介上，據(jù)Joshi等的調(diào)查，鼠、蒼蠅等均檢測到了SVA，其可能在SVA傳播中起重要作用[25]。發(fā)病豬通過口、鼻、糞便排毒。尿液也可能是排毒的途徑，帶有病毒的尿液成為豬場重要傳染源[25]。易感動物與帶有水皰或水皰破裂發(fā)病豬的直接接觸是SVA感染重要的傳播途徑之一。SVA是否能夠垂直傳播尚需進(jìn)一步的研究。

3 SVA病原學(xué)特征

分離之初，認(rèn)為SVV-001與心病毒屬成員親緣關(guān)系最近，但是經(jīng)過進(jìn)一步的深入分析，根據(jù)病毒特征和復(fù)制模式將其列入小RNA病毒科并將其歸入新的病毒屬——塞內(nèi)卡病毒屬。目前，該屬僅有代表種一個成員。

SVA作為塞內(nèi)卡病毒屬唯一成員，具有典型的小RNA病毒結(jié)構(gòu)特點(diǎn)。病毒粒子為無囊膜二十面體結(jié)構(gòu)蛋白衣殼，直徑約25～30 nm。同其他小RNA病毒科成員相似，SVA基因組由Vpg、5’ UTR、編碼一個多聚蛋白的開放閱讀框（ORF）、3’ UTR和Poly (A) Trailer，大小約7 200 nt，其5’ UTR區(qū)域具Ⅳ型核糖體結(jié)合位點(diǎn)[26]。SVA基因組結(jié)構(gòu)遵循L-4-3-4結(jié)構(gòu)，多聚蛋白由病毒編碼的蛋白酶加工成成熟蛋白。SVA多聚蛋白在蛋白酶作用下裂解為蛋白和多聚蛋白P1、P2、P3。P1先裂解為VP0、VP1、VP3，VP0進(jìn)一步裂解為VP2、VP4，4個結(jié)構(gòu)蛋白VP1（1D）、VP2（1B）、VP3（1C）、VP4（1A）共同組成SVA蛋白衣殼，VP1、VP2、VP3位于SVA蛋白衣殼的外側(cè)面，VP4位于蛋白衣殼的內(nèi)側(cè)面；P2裂解為3個非結(jié)構(gòu)蛋白2A、2B、2C；P3裂解為4個非結(jié)構(gòu)蛋白3A、3B、3C、3D（如圖1）。非結(jié)構(gòu)蛋白中，2Apro、3Cpro、3CDpro蛋白與蛋白質(zhì)加工有關(guān)；2B、2C、3AB、3BVPg、3CD-pro和3Dpol與病毒的復(fù)制有關(guān)。2A蛋白為9個氨基酸的短肽，其C端具有保守序列NPG/P，其可能與核糖體跳躍有關(guān)；2B可能起到提高膜通透性的作用；3C為解旋酶樣多肽，參與RNA合成。3A功能尚不清楚；3B以引物形式參與RNA合成；3D為RNA依賴性RNA聚合酶的主要組分，參與RNA合成。SVA病毒基因組特征與心病毒屬基因組特征非常相似，尤其是P1、2C、3C、3D，而SVA的2B、3A、核糖體結(jié)合位點(diǎn)類型與心病毒屬的不同。SVA的2A、2B、3A、3B與其他小RNA病毒的2A、2B、3A、3B存在明顯差異[5]。

SVA能夠適應(yīng)不同的細(xì)胞系?？衫秘i睪丸細(xì)胞、豬腎細(xì)胞（SK-RST、PK-15）、人肺癌細(xì)胞（NCI-H1299）、幼倉鼠腎細(xì)胞（BHK-21）等細(xì)胞系對SVA進(jìn)行分離。

4 臨床癥狀與病理變化

目前，僅有少數(shù)關(guān)于SVA試驗(yàn)性感染豬的研究。SVA感染豬的臨床癥狀主要表現(xiàn)為肌肉無力、嗜睡、跛足、腹瀉，舌、鼻鏡和蹄部冠狀帶出現(xiàn)充滿液體的水皰，水皰破潰后形成潰瘍（如圖2）。人工感染試驗(yàn)表明，SVA可通過滴鼻、肌肉注射等接種途徑使健康豬感染導(dǎo)致發(fā)病。Joshi等和Montiel等分別用SVA分離株感染9周齡和16周齡的豬成功復(fù)制出了SVA感染豬的臨床癥狀[24，27]。在Joshi等的SVA對豬致病性研究中，在攻毒后第4天試驗(yàn)豬出現(xiàn)了跛行、嗜睡等臨床癥狀，該癥狀持續(xù)2～10 d；攻毒后第4天，在蹄部和/或鼻部出現(xiàn)了水皰，水皰在攻毒后5～6 d破裂形成潰瘍并在攻毒后8～9 d形成結(jié)痂；病變在攻毒后12～16 d完全消除。攻毒豬在感染期間，直腸體溫與對照豬無明顯差異；攻毒豬出現(xiàn)短暫的病毒血癥，病毒血癥約持續(xù)7 d，在第3天血液中病毒達(dá)到高峰[24，27]。Tousignant 等對母豬和仔豬排毒模式的縱向研究發(fā)現(xiàn)，母豬水皰中的SVA濃度最高，但能檢測到時間最短，只持續(xù)2周。發(fā)病后，1周內(nèi)可檢測到病毒血癥，之后迅速下降。在哺乳仔豬發(fā)病后，病毒血癥在發(fā)病一周后迅速下降。在斷奶后第一周（暴發(fā)后4周）以低水平流行，并且也在混合飼養(yǎng)的SVA陰性仔豬也能檢測到。 母豬和仔豬發(fā)病后，直腸拭子和扁桃體上SVA檢出大約持續(xù)6周[29]。

圖1 SVA基因組結(jié)構(gòu)

圖2 SVA感染豬的臨床癥狀[9、27]

圖3 SVA感染母豬組織病理學(xué)變化[9、11]

SVA感染豬所致病理學(xué)變化的研究較少，Wu等通過對自然感染SVA發(fā)病母豬、仔豬的組織病理學(xué)檢查發(fā)現(xiàn)，感染母豬大腦組織出現(xiàn)“衛(wèi)星”和“嗜神經(jīng)”現(xiàn)象，肺氣腫，心臟出血、充血，肝臟出現(xiàn)局灶性壞死，腎臟出現(xiàn)局灶性淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞浸潤，小腸黏膜壞死、脫落（如圖3）[11]。

5 宿主抗SVA的免疫反應(yīng)

目前，僅有少數(shù)研究評估了宿主抗SVA感染的免疫反應(yīng)。目前的研究發(fā)現(xiàn)，SVA感染可誘導(dǎo)宿主的早期免疫反應(yīng)[22，24，30]。SVA感染約5 d后豬體內(nèi)產(chǎn)生抗體，隨著中和抗體滴度的升高，發(fā)病豬疾病嚴(yán)重程度降低，病毒血癥、臟器組織病毒載量和排毒量也會降低，這也表明隨著宿主免疫系統(tǒng)的激活，SVA逐漸被宿主機(jī)體清除。 SVA特異性免疫球蛋白IgM以最高水平約持續(xù)10 d（感染后5～15 d），隨后開始降低直至感染后21 d檢測不到，而特異性免疫球蛋白IgG產(chǎn)生較晚，但感染21 d后產(chǎn)生強(qiáng)陽性反應(yīng)[22，24，30]。

6 SVA的診斷與檢測

SVA所致豬水皰病與FMDV、VSV、VESV、SVDV等四大豬水皰病病原所致臨床癥狀不可區(qū)分。臨床診斷可根據(jù)臨床癥狀進(jìn)行初步診斷，需要通過實(shí)驗(yàn)室診斷，進(jìn)行5種豬水皰病病原的鑒別診斷。目前，針對SVA實(shí)驗(yàn)室診斷方法主要有病原學(xué)診斷方法和血清學(xué)診斷方法。SVA病原學(xué)診斷方法包括PCR方法、分子雜交技術(shù)等；Bracht A J 等構(gòu)建SYBR Green RT-qPCR 方法，可快速、高效、特異地檢測SVA抗原[31]。Feronato 等構(gòu)建了高效、特異地SVA巢式PCR檢測方法，可應(yīng)用于SVA的流行病學(xué)調(diào)查和監(jiān)測[32]。PCR方法中普通PCR和熒光定量RT-PCR（qRT-PCR）均可有效地檢測SVA。qRT-PCR快速、靈敏度高、特異性強(qiáng)，應(yīng)用于SVA的快速檢測、排毒檢測及病毒載量檢測中。分子雜交技術(shù)中RNA原位雜交技術(shù)已經(jīng)應(yīng)用于SVA的快速檢測當(dāng)中。RNA原位雜交是利用雜交探針識別、靶向經(jīng)固定、包埋、和制片的組織樣品中的SVA特異性序列，通過雜交信號判定SVA的有無。血清學(xué)方法中包括間接ELISA、競爭ELISA、間接免疫熒光和病毒中和試驗(yàn)等方法。Dvorak 等通過大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)，表達(dá)SVA VP1、VP2、VP3三種蛋白，并構(gòu)建了間接ELISA方法用于檢測血清中SVA抗體，發(fā)現(xiàn)SVA VP2 ELISA親和力更高，敏感性和特異性更好，與抗口蹄疫病毒、腦心肌炎病毒和豬流行性腹瀉病毒抗體陽性血清不存在交叉反應(yīng)[33]。Goolia 等SVA抗體競爭ELISA方法，該方法與病毒中和試驗(yàn)、間接免疫熒光等方法的一致性高。血清學(xué)的方法適于大規(guī)模的流行病學(xué)研究或監(jiān)測[34]。

7 預(yù)防與控制

目前，在我國SVA感染僅是零星散發(fā)，但是隨著時間的推移，不能排除其在我國豬群中形成流行，給養(yǎng)殖業(yè)帶來較大損害的可能。

對于SVA的預(yù)防和治療，尚無疫苗或特定的治療方法可用。因此，在SVA的預(yù)防和控制上，目前主要依靠衛(wèi)生防疫措施和生物安全措施。為重要的是，要從意識上重視SVA的預(yù)防與控制，同時在行動中嚴(yán)格執(zhí)行衛(wèi)生防疫措施和生物安全措施。在SVA預(yù)防控制中可采取以下措施：

1）重視SVA預(yù)防與控制。

SVA與FMDV屬同病毒科病毒，其危害性不及FMDV。SVA所致疫病雖為被OIE通報入動物疫病名錄和《中華人民共和國進(jìn)境動物檢疫疫病名錄》，但是其傳播和危害養(yǎng)豬業(yè)的風(fēng)險不能忽略。部分研究表明，國內(nèi)SVA分離毒株與美國的SVA毒株的親緣關(guān)系近，這提示SVA隨豬貿(mào)易傳播的可能性極大[11]。同時，SVA感染仔豬導(dǎo)致仔豬死亡率升高，能夠給養(yǎng)豬業(yè)造成較大經(jīng)濟(jì)損失，因此重視SVA預(yù)防與控制，同源頭控制SVA傳播對控制該病的防治和危害具有重要意義。

2）切實(shí)、嚴(yán)格執(zhí)行衛(wèi)生防疫措施和生物安全措施。

將病原拒于場外，是有效避免感染性病原在養(yǎng)殖場循環(huán)，傳染病發(fā)生的有效措施。嚴(yán)格控制入場車輛、設(shè)備、人員和食物等，切實(shí)、嚴(yán)格執(zhí)行消毒措施，防止病原隨車輛、設(shè)備等輸入場區(qū)。鼠、蒼蠅等攜帶SVA病原，在SVA傳播過程中起一定的作用；SVA可能能夠感染不同的動物，因此需采取措施控制鼠、蠅及其他非豬動物入場。

3）重視疫病監(jiān)測。

目前，我國SVA疫情主要是零星散發(fā)，其在我國的起源問題尚不清楚，因此有必要對其進(jìn)行全國范圍的流行病學(xué)調(diào)查以及回溯性研究，其一為了確定其起源問題，其二要確定其在我國豬群中的分布情況，其三為了預(yù)防控制SVA提供必要的流行病學(xué)數(shù)據(jù)，為制定和執(zhí)行防疫措施提供依據(jù)。

4）加快開發(fā)水皰病相關(guān)病原的鑒別診斷技術(shù)。

SVA感染豬后，豬體溫并無異常升高現(xiàn)象。在口腔、蹄部冠狀帶、鼻鏡等部位皮膚所表現(xiàn)臨床癥狀，與FMDV、VSV、SVDV、VESV等所致的臨床癥狀不可區(qū)分，因此利用快速鑒別診斷技術(shù)對水皰病病因進(jìn)行快速診斷，依據(jù)診斷結(jié)果制定和采取相應(yīng)的處置措施。

8 展望

SVA為小RNA病毒科成員，感染豬所表現(xiàn)的臨床癥狀與口蹄疫病毒、豬水皰病病毒、豬水皰疹病毒所致癥狀非常相似，需進(jìn)行鑒別診斷?？焖勹b別診斷對快速地控制疫情、制定防控措施具有重要意義。SVA危害雖不及口蹄疫病毒，但其感染仔豬導(dǎo)致仔豬死亡率升高，造成經(jīng)濟(jì)損失，給養(yǎng)豬業(yè)高效綠色健康發(fā)展帶來了新的挑戰(zhàn)。SVA已在我國多個省份豬場檢測到，一方面需要對SVA進(jìn)行回顧性研究，對其進(jìn)行溯源；另一方需要對其流行病學(xué)、免疫、快速診斷技術(shù)以及遺傳變異機(jī)制進(jìn)行深入研究，以為制定SVA防控方案提供理論依據(jù)。

[1] HALES L M， KNOWLES N J，REDDY P S， et al. Complete genome sequence analysis of Seneca Valley virus-001， a novel oncolytic picornavirus [J]. Journal of General Virology， 2008， 89(5)： 1265-1275.

[2] REDDY P S， BURROUGHS K D，HALES L M， et al. Seneca Valley Virus， a Systemically Deliverable Oncolytic Picornavirus， and the Treatment of Neuroendocrine Cancers[J]. Journal of the National Cancer Institute， 2007， 99(21)： 1623.

[3] BURKE M J. Oncolytic Seneca Valley Virus： past perspectives and future directions [J]. Oncolytic Virotherapy， 2016， 5： 81-89.

[4] POIRIER J T， REDDY P S， Idamakanti N， et al. Characterization of a full-length infectious cDNA clone and a GFP reporter derivative of the oncolytic picornavirus SVV-001 [J]. Journal of General Virology，2012， 93(12)： 2606-2613.

[5] HALES L M， KNOWLES N J，REDDY P S， et al. Complete genome sequence analysis of Seneca Valley virus-001， a novel oncolytic picornavirus [J]. Journal of General Virology， 2008， 89(5)： 1265-1275.

[6] PASMA T， DAVIDSON S， SHAW S L. Idiopathic vesicular disease in swine in Manitoba [J]. Canadian Veterinary Journal-revue Veterinaire Canadienne， 2008， 49(1)： 84-85.

[7] SINGH K. Seneca Valley Virus and Vesicular Lesions in a Pig with Idiopathic Vesicular Disease [J]. Journal of Veterinary Science & Technology，2012， 03(6)： 1-3.

[8] VANNUCCI F A， LINHARES D C L， BARCELLOS D E S N， et al.Identification and Complete Genomeof Seneca Valley Virus in Vesicular Fluid and Sera of Pigs Affected with Idiopathic Vesicular Disease， Brazil[J]. Transboundary & Emerging Diseases， 2015， 62(6)： 589-593.

[9] LEME R A， OLIVEIRA T E S，ALCANTARA B K， et al. Clinical Manifestations of Senecavirus A Infection in Neonatal Pigs， Brazil，2015 [J]. Emerging Infectious Diseases， 2016， 22(7)： 1238-1241.

[10] SUN D， VANNUCCI F， KNUTSON T P， et al. Emergence and whole-genome sequence of Senecavirus A in Colombia [J]. Transboundary & Emerging Diseases， 2017，00：1-4.

[11] WU Q， ZHAO X， BAI Y， et al.The First Identification and Complete Genome of Senecavirus A Affecting Pig with Idiopathic Vesicular Disease in China [J]. Transboundary& Emerging Diseases， 2017， 64(5)：1633-1640.

[12] ZHAO X， WU Q， BAI Y， et al.Phylogenetic and genome analysis of seven senecavirus A isolates in China[J]. Transboundary & Emerging Diseases， 2017： 1-8.

[13] ZHU Z， YANG F， CHEN P， et al. Emergence of novel Seneca Valley virus strains in China， 2017 [J].Transboundary & Emerging Diseases，2017， 64(4)： 1024-1029.

[14] HAUSE B M， MYERS O， DUFF J，et al. Senecavirus A in Pigs， United States， 2015 [J]. Emerging Infectious Diseases， 2016， 22(7)： 1323-1325.

[15] ZHANG J， PABLO P， CHEN Q， et al. Full-Length Genome Sequences of Senecavirus A from Recent Idiopathic Vesicular Disease Outbreaks in U.S.Swine [J]. Genome Announcements，2015， 3(6)： 1270-1275.

[16] SAENG CHUTO K， RODTION P，TEMEEYASEN G， et al. The first detection of Senecavirus A in pigs in Thailand， 2016 [J]. Transboundary &Emerging Diseases， 2017：1-4.

[17] AMASS S F， SCHNEIDER J L，MILLER C A， et al. Idiopathic vesicular disease in a swine herd in Indiana [J]. Journal of Swine Health& Production， 2004， 12(4)： 192-196.[18] KNOWLES N J， HALES L M，JONES B H， et al. Epidemiology of Seneca Valley Virus： Identification and Characterization of Isolates from Pigs in the United States [J]. 2006.

[19] LEME R A， ZOTTI E， ALCANTARA B K， et al. Senecavirus A：an emerging vesicular infection in Brazilian pig herds [J]. Transboundary & Emerging Diseases， 2015，62(6)： 603-611.

[20] LEME R A， OLIVEIRA T E， ALFIERI A F， et al. Pathological，Immunohistochemical and Molecular Findings Associated with Senecavirus A-Induced Lesions in Neonatal Piglets [J]. Journal of Comparative Pathology， 2016， 155(2-3)： 145-155.

[21] CANNING P， CANON A， BATES J L， et al. Neonatal Mortality， Vesicular Lesions and Lameness Associated with Senecavirus A in a U.S. Sow Farm [J]. Transboundary & Emerging Diseases， 2016， 63(4)： 373.

[22] GIMENEZ LIROLA G，RADEMACHER C， LINHARES D，et al. Serological and Molecular detection of Senecavirus A associated with an outbreak of Swine Idiopathic Vesicular Disease and Neonatal Mortality [J]. Journal of Clinical Microbiology， 2016， 54(8)： 2082.

[23] BAKER K L， MOWRER C， CANON A， et al. Systematic Epidemiological Investigations of Cases of Senecavirus A in US Swine Breeding Herds [J].Transboundary & Emerging Diseases，2016， 64(1)： 11.

[24] JOSHI L R， FERNANDES M H，CLEMENT T， et al. Pathogenesis of Senecavirus A infection in finishing pigs [J]. Journal of General Virology， 2016， 97： 3267-3279.

[25] JOSHI L R， MOHR K A， CLEMENT T， et al. Detection of the Emerging Senecavirus A in Pigs，Mice and Houseflies [J]. Journal of Clinical Microbiology， 2016， 54(6)：1536.

[26] WILLCOCKS M M， LOCKER N，GOMWALK Z， et al. Structural Features of the Seneca Valley Virus Internal Ribosome Entry Site (IRES)Element： a Picornavirus with a Pestivirus-Like IRES [J]. Journal of Virology， 2011， 85(9)： 4452.

[27] MONTIEL N， BUCKLEY A， GUO B， et al. Vesicular Disease in 9-Week-Old Pigs Experimentally Infected with Senecavirus A [J].Emerging Infectious Diseases， 2016，22(7)： 1246-1248.

[28] FOWLER V L， RANSBURGH R H，POULSEN E G， et al. Development of a novel real-time RT-PCR assay to detect Seneca Valley virus associated with emerging cases of vesicular disease in pigs [J]. Journal of Virological Methods， 2016， 239： 34.

[29] TOUSIGNANT S J P， BRUNER L，SCHWARTZ J， et al. Longitudinal study of Senecavirus a shedding in sows and piglets on a single United States farm during an outbreak of vesicular disease [J]. BMC Veterinary Research， 2017， 13(1)：277.

[30] YANG M， VAN B R， XU W.Generation and diagnostic application of monoclonal antibodies against Seneca Valley virus [J]. Journal of Veterinary Diagnostic Investigation Official Publication of the American Association of Veterinary Laboratory Diagnosticians Inc， 2012， 24(1)： 42.

[31] BRACHT A J， O’HEARN E S，F(xiàn)ABIAN A W， et al. Real-Time Reverse Transcription PCR Assay for Detection of Senecavirus A in Swine Vesicular Diagnostic Specimens [J].Plos One， 2016， 11(1)： 146-211.

[32] FERONATO C， LEME R A， DINIZ J A， et al. Development and evaluation of a nested-PCR assay for Senecavirus A diagnosis [J]. Tropical Animal Health & Production，2017：1-8.

[33] DVORAK C M T， AKKUTAYYOLDAR Z， STONE S R， et al. An indirect enzyme-linked immunosorbent assay for the identification of antibodies to Senecavirus A in swine[J]. BMC Veterinary Research， 2016，13(1)： 50.

[34] GOOLIA M， VANNUCCI F， YANG M， et al. Validation of a competitive ELISA and a virus neutralization test for the detection and confirmation of antibodies to Senecavirus A in swine sera [J]. Journal of Veterinary Diagnostic Investigation， 2017：250-253.