許 拓，樊翠華，熊林芝，柯淇勻，趙祖凱

（武漢天種畜牧股份有限公司，湖北 武漢 430344）

豬繁殖與呼吸綜合征（Porcine reproductive and respiratory syndrome，PRRS）俗稱豬藍(lán)耳病， 1991年被鑒定以來(lái)，給養(yǎng)豬業(yè)帶來(lái)了重大損失。自2006年夏天在我國(guó)養(yǎng)豬省份大范圍暴發(fā)高致病型藍(lán)耳病，從江西席卷全國(guó)十多個(gè)省市，感染案例達(dá)兩百多萬(wàn)，造成難以估量的損失。PRRS在臨床上表現(xiàn)為妊娠母豬發(fā)生流產(chǎn)、早產(chǎn)、死胎、木乃伊胎和弱仔等繁殖障礙，仔豬和育肥豬出現(xiàn)呼吸道癥狀，并伴隨生長(zhǎng)緩慢，病死率高等一系列臨床癥狀。感染PRRS的豬群常存在繼發(fā)或混合感染，常與豬細(xì)小病毒（Porcine parvovirus，PPV）、偽狂犬病毒（Pseudorabies virus，PRV）、豬圓環(huán)病毒（porcine circovirus，PCV）等繼發(fā)或混合感染；還常與豬鏈球菌（Streptococcus suis，SS）、副豬嗜血桿菌（Haemophilus parasuis，HPS）等細(xì)菌性疾病混合感染，往往是由于繼發(fā)或混合感染引起較高的發(fā)病率和死亡率，給生產(chǎn)造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。2017年5月，華中某規(guī)模化豬場(chǎng)產(chǎn)房仔豬發(fā)病，經(jīng)筆者現(xiàn)場(chǎng)和實(shí)驗(yàn)室診斷為接種PRRSV疫苗繼發(fā)引起HPS和SS混合感染，后緊急采取綜合性措施，使得該病得到控制，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 流行病學(xué)

華中某規(guī)模化豬場(chǎng)存欄母豬約1 200頭，飼養(yǎng)模式為自繁自養(yǎng)的一點(diǎn)式生產(chǎn)模式。該場(chǎng)自2017年5月起，多批35日齡左右保育豬出現(xiàn)倒地后急性死亡問(wèn)題，且多發(fā)生于膘情正常、長(zhǎng)勢(shì)良好的仔豬，發(fā)病率為2%，但病死率卻高達(dá)30%。該場(chǎng)免疫JXA1株P(guān)RRSV苗和副豬嗜血桿菌疫苗，并在飼料中添加抗生素全群保健，但效果仍然不明顯。

2 臨床剖檢

在保育舍挑取2頭發(fā)病豬和1頭死亡時(shí)間1 h以內(nèi)病死豬進(jìn)行剖檢，發(fā)病豬體溫升高、眼瞼周?chē)幸蝗诰€以及關(guān)節(jié)處有輕微腫大。對(duì)這3頭豬進(jìn)行臨床剖檢，均表現(xiàn)出肺臟明顯病變、壞死，胸腔積液、心包積液、絨毛心、肝臟被纖維性滲出覆蓋、關(guān)節(jié)液渾濁等一系列臨床癥狀。

3 初步診斷

根據(jù)上述臨床癥狀，初步疑似引起豬群死亡的為豬群免疫JXA1株P(guān)RRSV疫苗后，豬藍(lán)耳病疫苗對(duì)豬群機(jī)體造成傷害，從而繼發(fā)感染SS和HPS導(dǎo)致豬群死亡。

4 實(shí)驗(yàn)室診斷

采集剖檢病豬的腦、肺臟、肝臟和關(guān)節(jié)液進(jìn)行細(xì)菌分離。同時(shí)采集的肺臟、扁桃體和淋巴結(jié)等進(jìn)行豬藍(lán)耳病 PCR 檢測(cè)。

1）細(xì)菌分離

采集剖檢病豬的腦、肺臟、肝臟和關(guān)節(jié)液劃線接種于含NAD+血清的TSA固體營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基，置于37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)24 h后觀察是否有菌落生長(zhǎng)。若營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基上有菌落生長(zhǎng)，則觀察菌落形態(tài)，并挑取疑似菌落擴(kuò)大培養(yǎng)后PCR鑒定。

2）病原學(xué)檢測(cè)

將疑似SS的單菌落擴(kuò)大培養(yǎng)后制備模板進(jìn)行PCR檢測(cè)，提病死豬組織樣品DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增。結(jié)果顯示采集的3頭豬的樣品均有檢測(cè)到PRRSV陽(yáng)性（圖1，圖2），且分離到的單菌落經(jīng)擴(kuò)大培養(yǎng)后鑒定為SS（圖3）和HPS（圖4）。

3) 藥敏試驗(yàn)

對(duì)分離鑒定的HPS和SS采用紙片法進(jìn)行藥敏試驗(yàn)，記錄抑菌圈大小。依據(jù) CLSI 判定標(biāo)準(zhǔn)，該豬場(chǎng)HPS對(duì)頭孢拉定 (Φ25 mm) 、頭孢曲松 (Φ21mm) 、阿莫西林 (Φ24 mm) 、氨芐西林 (Φ21 mm)、恩諾沙星（Φ25 mm）這5種藥物敏感，SS也對(duì)頭孢拉定 (Φ24 mm) 、頭孢曲松 (Φ23mm) 、阿莫西林 (Φ21 mm) 、氨芐西林 (Φ21 mm)、恩諾沙星（Φ23 mm）敏感。

圖1—圖4 PCR擴(kuò)增結(jié)果

表1 PCR擴(kuò)增引物序列和擴(kuò)增片段

4） PRRSV測(cè)序

針對(duì)檢測(cè)到PRRSV陽(yáng)性的樣品擴(kuò)增ORF5測(cè)序，測(cè)序結(jié)果與江西毒株同源性為99.98%，確定病死豬組織中組織檢測(cè)到病原為PRRSV疫苗毒。

5 綜合診斷

對(duì)該豬場(chǎng)的發(fā)病情況、臨床癥狀、病理解剖以及實(shí)驗(yàn)室診斷進(jìn)行綜合分析，確診該場(chǎng)導(dǎo)致豬群死亡主要原因是豬群免疫高致病性豬藍(lán)耳病疫苗后繼發(fā)感染豬鏈球菌和副豬嗜血桿菌導(dǎo)致豬群死亡。

6 防控措施

為減少該場(chǎng)豬群急性倒地后死亡帶來(lái)的經(jīng)濟(jì)損失，采取如下措施。

1)藥物治療

對(duì)發(fā)病豬隔離單獨(dú)飼養(yǎng)，根據(jù)藥敏試驗(yàn)選擇敏感性藥物進(jìn)行治療，在飼料中添加阿莫西林進(jìn)行全群給藥保健。出現(xiàn)神經(jīng)癥狀的病豬使用磺胺類(lèi)藥物和敏感性藥物分邊注射治療。

2)加強(qiáng)飼養(yǎng)管理

保證豬舍通風(fēng)和空氣流通，及時(shí)清理前一天飼料，不留發(fā)霉飼料和變質(zhì)飼料。發(fā)病豬舍用過(guò)氧乙酸帶豬消毒，2 d一次，且嚴(yán)禁飼養(yǎng)員串欄以防止病原擴(kuò)散。同時(shí)在后期產(chǎn)房轉(zhuǎn)保育時(shí)盡量做到全進(jìn)全出，盡量不混欄，做好生物安全，避免仔豬混欄打架，以減少仔豬應(yīng)激。

3)推遲免疫時(shí)間

對(duì)產(chǎn)房初生仔豬進(jìn)行豬藍(lán)耳病連續(xù)監(jiān)測(cè)6批，若確定初生仔豬無(wú)PRRSV感染則將免疫JXA1株疫苗時(shí)間推遲至豬群轉(zhuǎn)保育舍后35～42日齡免疫，減少疫苗毒株對(duì)豬群造成的應(yīng)激。

7 防控結(jié)果

對(duì)發(fā)病豬執(zhí)行治療與飼養(yǎng)管理后豬群生產(chǎn)逐漸恢復(fù)穩(wěn)定，且無(wú)新增病例。其中據(jù)統(tǒng)計(jì)發(fā)病近1個(gè)月因倒地后急性死亡的豬達(dá)到46頭，采取措施1個(gè)月后再次統(tǒng)計(jì)因倒地而急性死亡頭數(shù)降低至15頭。初生仔豬連續(xù)監(jiān)測(cè)6批，均未檢測(cè)到PRRSV陽(yáng)性，因此推遲至保育35～42日齡免疫JXA1株P(guān)RRSV疫苗，且繼續(xù)執(zhí)行其他防控措施1個(gè)月后僅有6頭弱仔因倒地后死亡，且組織樣品中未檢測(cè)到PRRSV陽(yáng)性，在此連續(xù)跟蹤3批豬都未出現(xiàn)異常。上述結(jié)果充分說(shuō)明生產(chǎn)已穩(wěn)定，因免疫JXA1株P(guān)RRSV疫苗導(dǎo)致保育豬群出現(xiàn)的繼發(fā)感染HPS和SS問(wèn)題已基本解決。

8 討論

PRRSV感染壓力大的豬場(chǎng)免疫JXA1株P(guān)RRSV疫苗后雖然能起到好的防控作用，但是由于該疫苗為強(qiáng)毒力毒株弱毒疫苗，因此在使用疫苗后也會(huì)對(duì)豬群造成PRRSV的感染。在產(chǎn)房仔豬轉(zhuǎn)入保育階段對(duì)豬群的刺激以及環(huán)境改變的應(yīng)激也很容易導(dǎo)致豬群生產(chǎn)的不穩(wěn)定，保育階段HPS和SS的繼發(fā)感染導(dǎo)致豬群的發(fā)病和死亡，因此在轉(zhuǎn)欄時(shí)盡量避免豬群受到刺激。在養(yǎng)豬生產(chǎn)中，HPS和SS常常被稱作PRRSV的影子，因此無(wú)論在免疫還是未免疫PRRSV疫苗的豬場(chǎng)中，豬群在臨床上表現(xiàn)出現(xiàn)關(guān)節(jié)腫大并伴隨神經(jīng)癥狀，或倒地后急性死亡均可考慮豬群是否感染PRRSV或者受PRRSV疫苗毒影響導(dǎo)致豬群繼發(fā)感染HPS和SS從而導(dǎo)致豬群發(fā)病。在經(jīng)過(guò)實(shí)驗(yàn)室診斷后，對(duì)結(jié)果進(jìn)行分析并制定相應(yīng)的防控方案，說(shuō)明豬群被PRRSV感染后，是可防可控的。在我國(guó)“十三五”規(guī)劃中，PRRSV已被劃入不要求強(qiáng)制免疫傳染病，因此PRRSV凈化也迫在眉睫，好的防控措施和生物安全也是凈化PRRSV重要手段。

9 結(jié)論

該場(chǎng)保育豬倒地后急性死亡為免疫JXA1株P(guān)RRSV疫苗后繼發(fā)感染HPS和SS。

（略）