趙君雅 孫鴻宇 李薇 李威 李欣 官杰

[摘要]白細胞介素-35（IL-35）是IL-12 p35和EBi3亞基組成的異源二聚體，由調(diào)節(jié)性T細胞（Treg）特異性產(chǎn)生，被譽為最強抗炎因子。其能擴增Treg細胞的數(shù)量，抑制效應(yīng)性T細胞的產(chǎn)生，并通過iTR35細胞正向促進抑炎效應(yīng)。另一方面，當IL-35過度表達時，效應(yīng)T細胞和巨噬細胞所受抑制顯著增強，甚至可導(dǎo)致機體出現(xiàn)免疫抑制狀態(tài)。本文就IL-35與相關(guān)疾病的國內(nèi)外最新進展進行綜述。

[關(guān)鍵詞]白細胞介素-35；免疫抑制；炎癥；腫瘤

[中圖分類號] R392.11 [文獻標識碼] A [文章編號] 1674-4721（2018）12（b）-0016-03

[Abstract] Interleukin 35 （IL-35） is produced exclusively by regulatory T cells， which is composed of two subunits， IL-12 p35 and EBi3. Known as the strongest anti-inflammatory factor， it leads to the amplification of regulatory T cells， the inhibition of production of effector T cells， and promotes anti-inflammatory effects through iTR35 cells. Besides， its overexpression can result in evidently inhibitory effects on T cells and macrophages， which even induces immunosuppression. This paper gives a general review about its latest advances in related diseases at home and abroad.

[Key words] Interleukin 35； Immunosuppression； Inflammation； Tumour

白細胞介素-35（interleukin 35，IL-35）是調(diào)節(jié)性T細胞（regulatory T cell，Treg）產(chǎn)生的細胞因子，于2007年由Collison等[1]首次報道。IL-35是IL-12 p35和EBi3亞基組成的異源二聚體[2]，被譽為抑制活性最強的新型抗炎細胞因子。其通過擴增Treg細胞的數(shù)量[3]，抑制效應(yīng)T細胞（effector T cell，Teff）的增殖[4]，從而抑制炎癥反應(yīng)并防止自身免疫反應(yīng)的過度發(fā)生。此外，IL-35還能誘導(dǎo)新型Treg細胞（inducible IL-35-producing Tregs，iTr35）的產(chǎn)生，后者也能分泌IL-35，故通過正反饋的方式能夠促進免疫抑制的進程[5-6]。另一方面，在少數(shù)疾病中，過度表達的IL-35能誘導(dǎo)機體免疫微環(huán)境失調(diào)，此時Treg細胞在局部大量聚集，導(dǎo)致其對效應(yīng)T細胞和巨噬細胞產(chǎn)生過高的抑制作用，甚至可能抑制自身免疫[7]。本文旨在更新關(guān)于其產(chǎn)生、調(diào)節(jié)及應(yīng)用的最新進展，進一步探討其在疾病中的作用，現(xiàn)就近期研究報道進行綜述。

1 IL-35的生物學(xué)特征

IL-35是由Treg細胞特異性產(chǎn)生的IL-12家族新成員，以IL-12的α鏈IL-12A亞基和IL-27的β鏈EBI3亞基參與組成[8]。該家族成員（如IL-12、IL-23）參與的多為促炎反應(yīng)，而IL-35多表現(xiàn)為對炎癥的抑制作用。Collison等[1]的研究顯示，IL-35任一條鏈的缺乏均會導(dǎo)致Treg細胞對Teff細胞抑制能力的減弱。盡管IL-35憑借對Treg功能的調(diào)控在免疫治療方面取得了良好的效果，但介導(dǎo)其抑制活性的因素很大程度上仍是未知，這也限定了IL-35的使用及發(fā)展。

2 IL-35與臨床疾病的關(guān)系

2.1 IL-35與胰腺癌

90%的胰腺癌為胰腺導(dǎo)管腺癌（pancreatic ductal carcinoma，PDAC）。大量實驗顯示PDAC與腫瘤內(nèi)部、周邊的炎癥反應(yīng)以及失調(diào)的免疫監(jiān)視明顯相關(guān)[9]。金鵬[10]通過PCR分離外周單核淋巴細胞發(fā)現(xiàn)患者外周血漿中EBi3的mRNA水平顯著高于對照組，提示患者外周血漿中IL-35含量高于常人，并與國際抗癌聯(lián)盟（UICC）中的腫瘤分期及轉(zhuǎn)移范圍成正相關(guān)。Nicholl等[11]認為IL-35在PDAC中表達增強，并有促腫瘤轉(zhuǎn)移的效果。Huang等[12]通過對病變組織的連續(xù)切片，發(fā)現(xiàn)構(gòu)成IL-35的亞基EBi3及p35在PDAC細胞中高度表達。研究者根據(jù)臨床及實驗數(shù)據(jù)，證實了IL-35是通過趨化單核-巨噬細胞浸潤，進而誘導(dǎo)其分泌促血管新生因子，來促進胰腺癌的血管新生[13]。因此認為，IL-35能夠發(fā)出信號誘導(dǎo)血管生成，并促進PDAC細胞的生長。

2.2 IL-35與炎癥性腸?。╥nflammatory bowel disease，IBD）

IBD是一種反復(fù)發(fā)作的慢性炎癥，包括潰瘍性結(jié)腸炎和克羅恩病[14]。CD4+調(diào)節(jié)T細胞（regulation T cell，Treg cell）是調(diào)節(jié)性T細胞亞群之一，主要來源于胸腺，具有抑制自身反應(yīng)性T細胞和維持自身免疫耐受的功能[15]。IL-35的亞基EBi3早先被視為同IBD發(fā)病相關(guān)的免疫調(diào)節(jié)劑[16]。但隨著近年來對IL-35的深入探索，這種理論受到質(zhì)疑。Wirtz等[17]針對EBi3基因缺陷小鼠在慢性炎性腸病中的表現(xiàn)進行分析，發(fā)現(xiàn)缺乏EBi3基因的小鼠有明顯的結(jié)腸炎病理表現(xiàn)且存活時間更短。其中，活化的CD4+ T細胞亞群可阻礙輔助性T細胞Th1和Th17從而加速炎癥反應(yīng)。不僅如此，經(jīng)IL-12 p35鏈（rIL-35）用藥治療后，Th1、Th17和與之相關(guān)的轉(zhuǎn)錄因子T-bet和ROR-γT也受到抑制。此結(jié)果與先前資料[18]證明的“IL-35可抑制膠原誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎”相吻合，這在一定程度上驗證了IL-35潛在的免疫抑制性。

2.3 IL-35與1型糖尿病

1型糖尿病屬于自身免疫疾病，是由于多種異常自身免疫抗體損傷胰島B細胞造成的胰島素分泌不足。Bettini等[6]的研究顯示，IL-35是通過借助大鼠胰島素啟動子RIP Ⅱ作用于胰島β細胞。研究人員通過建立RIP-IL-35轉(zhuǎn)基因小鼠模型（即轉(zhuǎn)IL-35基因小鼠）對胰島中IL-35細胞數(shù)量進行分析，結(jié)果顯示胰島中的IL-35含量減少。研究人員發(fā)現(xiàn)，由于IL-35可在G1期抑制T細胞的增殖進而造成T細胞減少，此效應(yīng)對疾病的進展能起到一定的阻滯作用。此外，Manzoor等[19]所建模型中也得到相似的結(jié)果，該研究發(fā)現(xiàn)，注射有胰島素啟動子AAV8mIP-IL-35疫苗鼠有良好的抑制β細胞自免反應(yīng)的效果，可一定程度延緩病情的演進。

2.4 IL-35與系統(tǒng)性硬化癥（systemicscleroderma，SSc）

SSc是由于反復(fù)慢性感染導(dǎo)致結(jié)締組織代謝及血管異常的自身免疫疾病。目前，多數(shù)學(xué)者認為SSc患者產(chǎn)生的細胞因子能促進膠原蛋白的合成[20]。Tomcik等[21]的研究顯示，轉(zhuǎn)化生長因子-β（TGF-β）的活動可以導(dǎo)致SSc中一型膠原過度表達。在人體正常皮膚中IL-35組成成分EBi3蛋白處于低水平狀態(tài)，而在病灶區(qū)，由于受TGF-β的作用使EBi3上調(diào)[22]，導(dǎo)致IL-35在真皮成纖維細胞中過度表達，進而誘導(dǎo)成纖維細胞活化并釋放膠原。

2.5 IL-35與類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎（rheumatic arthritis，RA）

Nakano等[23]對RA患者的研究顯示，IL-35在體外可以提高免疫抑制效應(yīng)。在活動性RA患者血漿中，Treg細胞數(shù)量顯著減少，IL-35水平降低[24]，且該含量與在DAS28-ESR評分系統(tǒng)（此系統(tǒng)用于評價RA的病情及療效）中的指標情況密切相關(guān)。IL-35通過與CD2、CD3和CD28的結(jié)合，從而抑制炎性因子（如IL-17和IFN-γ等）的含量以及效應(yīng)T細胞的生長[25]。現(xiàn)有數(shù)據(jù)顯示，RA患者中Treg數(shù)量的減少可以使IL-35含量降低[26]，而低含量的IL-35又反過來降低了促進Treg細胞增殖與分化的作用[27]，該結(jié)果造成反應(yīng)性T細胞的過度活化[28]，從而釋放大量炎性介質(zhì)，最終導(dǎo)致RA的發(fā)生。

3總結(jié)與展望

IL-35是由調(diào)節(jié)性T細胞分泌的一種新型抗炎因子，在炎癥性疾病和腫瘤中發(fā)揮重要作用[29]。炎癥是疾病以及其相關(guān)并發(fā)癥發(fā)展的關(guān)鍵步驟，精準分析參與炎癥反應(yīng)的環(huán)節(jié)對疾病的診治大有裨益。IL-35具有誘發(fā)Treg及其效應(yīng)物的抗炎特性，因此成為自身免疫性疾病及感染性疾病中抗炎難題的靶向目標。鑒于不同疾病，IL-35發(fā)揮的作用眾說紛紜。就目前而言，其表現(xiàn)的并非為絕對的免疫抑制作用，例如IL-35也可在一些疾病中推動病情進展[30]，如SSc、PDAC等。IL-35的生物學(xué)功能及其在疾病中的作用機制仍需進一步研究，隨著科技的進展，IL-35有望成為免疫系統(tǒng)疾病新的治療靶點，并為今后治療該類疾病提供新的選擇。

[參考文獻]

[1]Collison LW，Workman CJ，Kuo TT，et al.The inhibitory cytokine IL-35 contributes to regulatory T-cell function[J].Nature，2007，450（7169）：566-569.

[2]Choi J，Leung PS，Bowlus C，et al.IL-35 and autoimmunity：a comprehensive perspective[J].Clin Rev Allergy Immunol，2015，49（3）：327-332.

[3]李寶柱，趙娜，何向輝，等.白細胞介素35抑制小鼠心臟移植排斥反應(yīng)的研究[J].中華器官移植雜志，2017，38（1）：34-38.

[4]Bettini M，Castellaw AH，Lennon GP，et al.Prevention of autoimmune diabetes by ectopic pancreatic β-cell expression of interleukin-35[J].Diabetas，2012，61（6）：1519-1526.

[5]Bhme J，Robnagel C，Jacobs T，et al.Epstein-Barr virus-induced gene 3 suppresses T helper type 1，type 17 and type 2 immune responses after Trypanosoma cruzi infectionand inhibits parasite replication by interfering with alternative macrophage activation[J].Immunology，2016，147（3）：338-348.

[6]Tao LL，Zhu J，Chen YF，et al.IL-35 improves Tregs mediated immune suppression in atherosclerotic mice[J].Exp Ther Med，2016，12（4）：2469-2476.

[7]Okada K，F(xiàn)ujimura T，Kikuchi T，et al.Effect of interleukin （IL）-35 on IL-17 expression and production by human CD4+ T cells[J].Peer J，2017，5：e2999.

[8]Vignali DA，Kuchroo VK.IL-12 family cytokines：immunological playmakers[J].Nat Immunol，2012，13（8）：722-728.

[9]Farren MR，Mace T，Geyer S，et al.Systemic immune activity predicts overall survival in treatment nave patients with metastatic pancreatic cancer[J].Clin Cancer Res，2016，22（10）：2565-2574.

[10]金鵬.IL-35在胰腺導(dǎo)管腺癌患者外周血中的表達[D].天津：天津醫(yī)科大學(xué)，2014.

[11]Nicholl MB，Ledgewood CL，Chen X，et al.IL-35 promotes pancreas cancer growth through enhancement of proliferation and inhibition of apoptosis：evidence for a role as an autocrine growth factor[J].Cytokine，2014，70（2）：126-133.

[12]Huang C，Li Z，Li N，et al.Interleukin 35 expression correlates with microvessel density in pancreatic ductal adenocarcinoma，recruits monocytes，and promotes growth and angiogenesis of xenograft tumors in mice[J].Gastroenterology，2018，154（3）：675-688.

[13]Templin J，Atanackovic D，Hasche D，et al.Oscillating expression of interleukin-16 in multiple myeloma is associated with proliferation，clonogenic growth，and PI3K/NFKB/MAPK activation[J].Oncotarget，2017，8（30）：49253-49263.

[14]林俊超，吳開春.炎癥性腸病的中西醫(yī)結(jié)合治療[J].臨床內(nèi)科雜志，2018，35（4）：230-232.

[15]Khattri R，Cox T，Yasayko SA，et al.An essential role for Scurfin in CD4+CD25+ T regulatory cells[J].Nat Immunol，2003，4（4）：337-342.

[16]李艷梅.IL-35在炎癥性腸病患者血清和腸粘膜組織中的表達[D].濟南：山東大學(xué)，2015.

[17]Wirtz S，Billmeier U，Mchedlidze T，et al.Interleukin-35 mediates mucosal immune responses that protect against T-Cell-dependent colitis[J].Gastroenterology，2011，141（5）：1875.

[18]Kochetkova I，Golden S，Holderness K，et al.IL-35 stimulation of CD39+ regulatory T cells confers protection against collagen Ⅱ-induced arthritis via the production of IL-10[J].J Immunol，2010，184（12）：7144-7153.

[19]Manzoor F，Johnson MC，Li C，et al.β-cell-specific IL-35 therapy suppresses ongoing autoimmune diabetes in NOD mice[J].Eur J Immunol，2017，47（1）：144-154.

[20]李晶冰，丁敏，牟萍，等.積雪草甙對系統(tǒng)性硬皮病成纖維細胞增殖、膠原蛋白合成及分泌TGF-β1的影響[J].江蘇醫(yī)藥，2014，40（20）：2387-2389.

[21]Tomcik M，Zerr P，Palumbozerr K，et al.Interleukin-35 is upregulated in systemic sclerosis and its serum levels are associated with early disease[J].Rheumatology，2016，54（12）：2273.

[22]李二威.CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T細胞分泌的IL-10、IL-35在過敏性哮喘中作用機制的初步研究[D].鄭州：鄭州大學(xué)，2015

[23]Nakano S，Morimoto S，Suzuki S，et al.Immunoregulatory role of IL-35 in T cells of patients with rheumatoid arthritis[J].Rheumatology，2015，54（8）：1498.

[24]熊怡淞，宋燕，俞娟，等.類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者外周血Treg細胞及其分泌IL-35水平檢測與臨床意義[J].重慶醫(yī)學(xué)，2018，47（5）：622-625.

[25]王佳.抑制性細胞因子IL-35對急性髓細胞白血病免疫功能的影響及其機制研究[D].合肥：安徽醫(yī)科大學(xué)，2016.

[26]顧危頁，龐智，鄭家駒，等.CD4+CD25 high Tr和CTLA-4與炎癥性腸病的關(guān)系研究[J].實用臨床醫(yī)藥雜志，2010， 14（15）：28-30.

[27]姜申易，魯靜.IL-35在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎中的研究進展[J].中國免疫雜志，2015，31（12）：1714-1717.

[28]田園，胡建東.程序性細胞死亡分子-1在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎發(fā)病機制中的作用研究進展[J].中華風(fēng)濕病學(xué)雜志，2018，22（4）：280-283.

[29]姚國泰，陳勵.IL-35與人類自身免疫性疾病的關(guān)系[J].細胞與分子免疫學(xué)雜志，2016，32（7）：993-995.

[30]劉麗.多發(fā)性硬化患者血清IL-33及IL-35水平的變化及其臨床意義[D].鄭州：鄭州大學(xué)，2013.