馮偉杰

（鎮(zhèn)江市計(jì)量檢定測試中心， 江蘇 鎮(zhèn)江 212000）

引言

物質(zhì)色譜分析的重要設(shè)備就是液相色譜儀，其在食品安全檢測、化學(xué)品等檢測領(lǐng)域被廣泛的應(yīng)用著。計(jì)量檢定人員在使用液相色譜儀檢測時(shí)，經(jīng)常會(huì)遇見包括儀器計(jì)量性能在內(nèi)的很多問題，從而無法滿足JJ G705—2014《液相色譜儀檢定規(guī)程》規(guī)定的計(jì)量指標(biāo)。文章以JJG 705—2014《液相色譜儀檢定規(guī)程》為依據(jù)詳細(xì)分析了液相色譜儀的檢定經(jīng)驗(yàn)，并以紫外-可見光檢測器為研究對(duì)象，結(jié)合實(shí)際工作對(duì)主要檢定項(xiàng)目如：泵流量、柱溫箱溫度設(shè)定值誤差和溫度穩(wěn)定性、基線噪聲和基線漂移、最小檢測濃度、整機(jī)性能（定性、定量重復(fù)性）的檢定及檢定中的注意事項(xiàng)談了幾點(diǎn)看法，希望能對(duì)液相色譜儀的檢定和發(fā)展起到一定的促進(jìn)作用。

1 液相色譜儀檢定中的注意事項(xiàng)

1.1 泵流量檢定經(jīng)驗(yàn)分析

1.1.1 泵流量檢定的步驟

啟動(dòng)儀器，流量結(jié)合規(guī)程要求進(jìn)行設(shè)定，壓力平穩(wěn)后，在一定時(shí)間內(nèi)將流動(dòng)相進(jìn)行收集，并通過秒表計(jì)時(shí)；而出口處的流動(dòng)相使用清洗干凈的稱重容量瓶收集，并用天平進(jìn)行稱重，重復(fù)測量三次；此時(shí)可通過JJ G705—2014《液相色譜儀檢定規(guī)程》中給出的公式，能夠?qū)α髁糠€(wěn)定性SR、泵流量設(shè)定值誤差SS進(jìn)行計(jì)算[1]。

1.1.2 泵流量檢定中的注意事項(xiàng)

1）首先需要保管好有關(guān)的試驗(yàn)材料，再進(jìn)行數(shù)據(jù)收集。并最好用一個(gè)人同時(shí)進(jìn)行計(jì)時(shí)和流動(dòng)相的收集，這樣可以最大程度地防止誤差出現(xiàn)；同時(shí)由于甲醇有揮發(fā)性，必須要對(duì)實(shí)驗(yàn)的時(shí)間和速度進(jìn)行良好把控。該人員還要按部就班地根據(jù)試驗(yàn)程序進(jìn)行操作，從而使實(shí)驗(yàn)失誤以及經(jīng)濟(jì)損失降低。在對(duì)流動(dòng)相進(jìn)行收集時(shí)需要將瓶口用封口膠密封，并且收集滿一瓶后立即稱重，并對(duì)收集的流動(dòng)相進(jìn)行換算時(shí)，需要注意保留到小數(shù)點(diǎn)以后的三位，并詳細(xì)地整理實(shí)驗(yàn)記錄，從而最大程度保證實(shí)驗(yàn)記錄的真實(shí)可靠。

2）與設(shè)定值相比，若實(shí)際流速較低，則需要對(duì)過濾頭、單向閥進(jìn)行清洗或更換；一旦流速偏高，就要對(duì)壓縮補(bǔ)償調(diào)節(jié)和流速補(bǔ)償進(jìn)行檢查，看是否有效。流量一旦出現(xiàn)不穩(wěn)定狀態(tài)，需要看是否有聚集氣泡存在泵頭內(nèi)，有的話，將空閥打開，使泵高流速運(yùn)行，確保氣泡排出。

1.2 柱溫箱檢定中的注意事項(xiàng)

1）柱溫箱溫度設(shè)定值誤差和溫度穩(wěn)定性檢定中的注意事項(xiàng)。在柱溫箱內(nèi)固定數(shù)字溫度計(jì)的探頭，確保使其和色譜柱的位置相同，并選擇35℃和45℃進(jìn)行檢定（也可按照用戶使用的溫度設(shè)置）。并參照液相色譜儀的使用說明書進(jìn)行操作，在溫度升高并穩(wěn)定時(shí)，對(duì)數(shù)值進(jìn)行記錄同時(shí)進(jìn)行計(jì)時(shí)，并間隔10 min記錄一次數(shù)值，總計(jì)7次，并將平均值求出，通過JJ G705—2014《液相色譜儀檢定規(guī)程》中給出的公式進(jìn)行計(jì)算，柱溫箱溫度設(shè)定值誤差△TS為平均值和設(shè)定值差，而柱溫箱溫度穩(wěn)定性TC是7次讀數(shù)中最小值、最大值差。

2）柱溫箱理論塔板數(shù)檢定中的注意事項(xiàng)。一般情況下，理論塔板數(shù)會(huì)因溫升而加大，導(dǎo)致峰與峰間距離縮小，但需要確保不改變每個(gè)峰面積。因此，在峰距縮小時(shí)，會(huì)增加峰高，故：溫度升高可以縮短保留時(shí)間；溫度降低卻相反，需要將保留時(shí)間進(jìn)行延長[2]。

1.3 基線噪聲和基線漂移檢定中的注意事項(xiàng)

1.3.1 基線噪聲和基線漂移檢定的步驟

選擇流動(dòng)相為100%的甲醇，色譜柱選用C18色譜柱選，1.0 mL/min的流量，254 nm的紫外檢測器的波長，并將檢測梁敏度調(diào)制到最靈敏處，打開機(jī)器進(jìn)行充分的預(yù)熱，等到儀器穩(wěn)定后對(duì)基線記錄30 min，并對(duì)基線中噪聲最大的峰-峰高對(duì)應(yīng)的信號(hào)值進(jìn)行選取，并對(duì)基線噪聲進(jìn)行計(jì)算，而基線漂移則選擇30min內(nèi)基線偏離起始點(diǎn)最大的信號(hào)值。

1.3.2 基線噪聲和基線漂移檢定中的注意事項(xiàng)

1）在對(duì)漂移和噪聲進(jìn)行檢定時(shí)，避免檢測器中有標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)通過，并保證流動(dòng)相只有100%的甲醇，必須保證儀器中除了甲醇不能有其他物質(zhì)流動(dòng)相。

2）當(dāng)基線有毛刺和波動(dòng)情況產(chǎn)生時(shí)，需要察看是否有空氣進(jìn)入了流動(dòng)相中，形成氣泡，并對(duì)氘燈穩(wěn)定情況進(jìn)行等待，再看儀器接地狀態(tài)是否良好，如果有問題需要對(duì)氘燈進(jìn)行更換。如果流動(dòng)相中有雜質(zhì)，并且發(fā)生大的漂移，需要對(duì)流動(dòng)相、儲(chǔ)液瓶、色譜柱、泵進(jìn)行檢查，看是否存在著污染物。

3）同時(shí)檢定員一定要對(duì)單位換算嚴(yán)格考慮，不要出現(xiàn)單位上的差錯(cuò)而影響檢定結(jié)論。當(dāng)工作站顯示屏縱坐標(biāo)為mV，需要按照J(rèn)JG 705—2014《液相色譜儀檢定規(guī)程》中給出的公式換算出AU，也就是1 mV=1×10-3/AU[3]。

1.4 最小檢測濃度檢定中的注意事項(xiàng)

1）最小檢測濃度檢定中的注意事項(xiàng)。最小檢測濃度的檢定同上面的基線噪聲采用相同的條件，在對(duì)最小檢測濃度進(jìn)行檢定時(shí)，可將10-20μL的質(zhì)量濃度為1.00×10-7g/mL的萘-甲醇溶液注入到進(jìn)樣系統(tǒng)中，并遵循一定的操作步驟對(duì)色譜圖進(jìn)行嚴(yán)格記錄，并按照公式CL=2NdcV/20H計(jì)算出最小檢測濃度。

2）應(yīng)當(dāng)注意，公式分母中的數(shù)字不是按照濃度進(jìn)行的計(jì)算，而是根據(jù)20 μL的注射體積來完成計(jì)算的。

2 結(jié)語

液相色譜儀是理化領(lǐng)域常見的分析類計(jì)量器具，液相色譜儀在更多的理化分析領(lǐng)域被廣泛的應(yīng)用。而液相色譜儀的檢定結(jié)果會(huì)受到很多因素影響，如進(jìn)樣量、檢定人員對(duì)規(guī)程的理解程度、操作人員的熟練程度、標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的不確定度等等，這樣會(huì)在一定程度上增加檢定難度。所以，檢定人員需要充分理解好JJG 705—2014《液相色譜儀檢定規(guī)程》的內(nèi)容，并在實(shí)踐中進(jìn)行充分總結(jié)，防止檢定中出現(xiàn)問題。同時(shí)檢定人員在對(duì)液相色譜儀進(jìn)行檢定和操作時(shí)，需要加倍重視其檢定方法，若不嚴(yán)格執(zhí)行檢定方法，將最終導(dǎo)致液相色譜儀在使用出現(xiàn)很多不確定性因素，從而使檢定結(jié)果受到影響，進(jìn)而影響檢定結(jié)論。因此保證液相色譜儀檢定結(jié)果的準(zhǔn)確和可靠具有非常重要的意義。