賈睿琳

（四川省南充市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，南充 637000）

0 引言

豬流行性腹瀉是由豬流行性腹瀉病毒引起的腸道傳染疾病。豬會(huì)產(chǎn)生食欲不振、脫水、腹瀉以及嘔吐等癥狀。此病情經(jīng)常發(fā)作于仔豬上，母豬的發(fā)病率相對(duì)較低。但是一旦染上該病，就會(huì)產(chǎn)生腹瀉、嘔吐、食欲不振等現(xiàn)象，從而導(dǎo)致體重降低直至死亡，并且這一疾病的死亡率較高。盡管有一部分的仔豬經(jīng)過(guò)救治，存活下來(lái)，但是疫情帶來(lái)的后遺癥也非常嚴(yán)重。豬流行性腹瀉疫情的產(chǎn)生，給全球的養(yǎng)豬專業(yè)戶造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。因此針對(duì)該疫病的預(yù)防不僅要定期對(duì)豬舍進(jìn)行打掃與檢查，還要采用科學(xué)合理的飼養(yǎng)方法。此外，給仔豬進(jìn)行疫苗免疫才是根本。隨著國(guó)家科技的快速發(fā)展，相關(guān)科研人員也對(duì)該病情進(jìn)行了深入研究，并研制出了相應(yīng)疫苗。

1 組織滅活疫苗

組織滅活疫苗是分裂所獲得的毒株，感染生命體征正常并且健康的小動(dòng)物。小動(dòng)物發(fā)病之后，取出體內(nèi)病毒含量最高的組織進(jìn)行滅活等處理，然后再加入佐劑制作而成的疫苗。因?yàn)椴扇〉氖且呀?jīng)滅活的病毒，或者是病毒感染含量最高的組織[1]，所以相對(duì)安全，并且容易保存，給運(yùn)輸過(guò)程中帶來(lái)極大便利。國(guó)內(nèi)針對(duì)感染流行性腹瀉仔豬最初的救治方式，采取的是組織滅活疫苗注射。

有專家采用毒株對(duì)剛剛出生不久的仔豬進(jìn)行感染，然后獲取仔豬身上的組織，再添加佐劑研制出的中國(guó)首例豬流行性腹瀉疫苗，就是組織滅活疫苗。通過(guò)對(duì)新生仔豬的組織滅活疫苗注射試驗(yàn)可以看出，在疫苗注射后的2個(gè)星期，新生仔豬體內(nèi)產(chǎn)生的中和抗體較強(qiáng)，免疫效果非常可觀，可保障豬群在半年之內(nèi)免受野毒的進(jìn)攻。

2 細(xì)胞滅活疫苗

將通過(guò)分裂獲得的毒株接種在適合病毒生長(zhǎng)的細(xì)胞內(nèi)，通過(guò)細(xì)胞傳代后將其滅活，所制作成的疫苗就是細(xì)胞滅活疫苗。

馬思奇[2]等相關(guān)專家研制出免疫期與組織滅活疫苗一樣長(zhǎng)達(dá)半年之久的豬流行性腹瀉病毒和豬傳染性腸胃炎病毒二聯(lián)疫苗，并且其對(duì)新生仔豬的免疫保護(hù)率幾乎達(dá)到90%。之后幾年，鄒勇等又研制出比二聯(lián)疫苗更為先進(jìn)的三聯(lián)疫苗。三聯(lián)疫苗包括豬流行性腹瀉、豬傳染性腸胃炎、豬輪狀病毒。此疫苗的研制，對(duì)新生仔豬的保護(hù)率比二聯(lián)疫苗還要高出許多。細(xì)胞滅活疫苗的研制過(guò)程比組織滅活疫苗更為簡(jiǎn)單，而且成本相對(duì)較低，對(duì)豬流行性腹瀉的防控能起到更好的效果。

3 弱毒疫苗

致病力弱化后的毒株研制成的，對(duì)病毒自身的感染力不變，但是減弱其致病力的疫苗就是弱毒疫苗[3]。弱毒疫苗的制作采用正常繁殖的弱毒株，所以在一定程度上它能刺激機(jī)體形成較長(zhǎng)時(shí)間的免疫。

佟有恩等運(yùn)用豬流行性腹瀉的毒株，進(jìn)行弱毒株的克隆培育，通過(guò)此弱毒株研制出豬傳染性胃腸炎病毒的二聯(lián)活疫苗。在此之后，隨著國(guó)家技術(shù)的不斷發(fā)展，馮力等研制出三聯(lián)活疫苗，而三聯(lián)活疫苗的主動(dòng)免疫時(shí)間能達(dá)到半年之久。弱毒疫苗可以在不增加任何佐劑狀況下，對(duì)較強(qiáng)的細(xì)胞免疫進(jìn)行反應(yīng)引導(dǎo)，所以它的免疫原性效果較好。因?yàn)槿醵疽呙缇哂幸欢ǖ幕钚?，所以活性的?qiáng)弱會(huì)直接影響到免疫效果，這就需要對(duì)弱毒疫苗的保存與運(yùn)輸提出更高的要求，避免在運(yùn)輸或是保存中活性降低，導(dǎo)致免疫效果減弱，從而對(duì)疫苗的注射造成影響。

4 亞單位疫苗

將病原體的抗原基因和擁有較強(qiáng)表達(dá)能力的質(zhì)粒連接進(jìn)行重組后，轉(zhuǎn)染到合適的載體中。然后經(jīng)過(guò)載體表達(dá)蛋白并對(duì)蛋白進(jìn)行純化，再選擇合適的佐劑與蛋白相混合所研制成的就是亞單位疫苗[4]。亞單位疫苗的安全性能高并且免疫原性較為突出，注射過(guò)亞單位疫苗的動(dòng)物，已經(jīng)不會(huì)再向環(huán)境進(jìn)行排毒，從而減小風(fēng)險(xiǎn)。

焦茂興[5]等人通過(guò)一系列的重組方法，成功將Vero進(jìn)行感染。利用已經(jīng)被感染細(xì)胞的上清液對(duì)小白鼠進(jìn)行注射，可以發(fā)現(xiàn)Vero細(xì)胞可以引誘小白鼠免疫回應(yīng)。以亞單位疫苗與滅活疫苗為參考，小白鼠在注射疫苗半個(gè)月后，注射亞單位疫苗的小白鼠比注射滅活疫苗的小白鼠所產(chǎn)生的抗體濃度高，但是在大約20 d后，注射亞單位疫苗的小白鼠體內(nèi)的抗體濃度明顯低于注射滅活疫苗的小白鼠。由此可以做出判斷，亞單位疫苗在體內(nèi)的抗體濃度會(huì)隨著代謝相應(yīng)減少，在體內(nèi)不能形成較長(zhǎng)時(shí)間的免疫效果。

5 病毒樣顆粒疫苗

病毒樣顆粒疫苗主要是指結(jié)合基因工程的方法，集中整合目的抗原蛋白基因和其他病毒的結(jié)構(gòu)蛋白基因，進(jìn)行克隆重組，形成結(jié)構(gòu)計(jì)劃蛋白顆粒[6]。因?yàn)椴《緲宇w粒沒(méi)有調(diào)節(jié)蛋白、核酸，所以它不具備復(fù)制能力，但是它具有正常病毒顆粒該有的特性，能進(jìn)到宿主細(xì)胞中，從而激發(fā)其全方位的免疫能力。

王翠玲[7]通過(guò)一系列的細(xì)胞構(gòu)建與重組后，成功感染Sf9細(xì)胞。經(jīng)鑒定，該細(xì)胞可以形成豬流行性腹瀉病毒的病毒樣顆粒。將小白鼠注射純化后的豬流行性腹瀉病毒的病毒樣顆粒進(jìn)行半個(gè)月的觀察檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)小白鼠體內(nèi)能產(chǎn)生較強(qiáng)的免疫能力。因?yàn)椴《緲宇w粒和亞單位疫苗相同，都屬于蛋白質(zhì)，所以它們二者的免疫效果需要再進(jìn)行深入研究。

6 核酸疫苗

核酸疫苗就是使編碼某種抗原的基因重新組成到真核進(jìn)行表達(dá)的載體，然后不通過(guò)任何媒介，直接將其注入到小動(dòng)物身體內(nèi)，使注入在小動(dòng)物身體內(nèi)的外源基因能有效激活其免疫能力，引誘其產(chǎn)生和疫苗注射類似的免疫應(yīng)答，從而達(dá)到疾病預(yù)防的效果。核酸疫苗可以通過(guò)靜脈、肌肉、皮下、表皮等多種方式進(jìn)行注射。但是試驗(yàn)證明，通過(guò)肌肉注射，可以獲得較長(zhǎng)時(shí)間的免疫應(yīng)答，從而能對(duì)小動(dòng)物進(jìn)行更好的保護(hù)。多核細(xì)胞中的骨骼肌細(xì)胞與其它組織不同，它具有充足的肌漿網(wǎng)，并且在其橫貫系統(tǒng)中具有細(xì)胞外液，它能夠深入到肌細(xì)胞中，所以其它組織吸收蛋白質(zhì)與DNA的能力都不如它。

7 結(jié)束語(yǔ)

豬流行性腹瀉給全球的養(yǎng)豬專業(yè)戶帶來(lái)巨大經(jīng)濟(jì)損失，因此豬流行性腹瀉疫苗也在不斷的發(fā)展研究過(guò)程中。隨著國(guó)家的快速發(fā)展以及科學(xué)技術(shù)的提高，豬流行性腹瀉疫苗的研究過(guò)程會(huì)越來(lái)越順利，研發(fā)的疫苗也會(huì)更加安全有效。雖然在目前疫苗的研發(fā)當(dāng)中，仍然存在著諸多問(wèn)題，但是相信隨著科技的進(jìn)步，這些問(wèn)題都會(huì)得到有效解決，進(jìn)而為養(yǎng)豬專業(yè)戶帶來(lái)更多效益，更好的推動(dòng)養(yǎng)豬業(yè)發(fā)展。