徐秀芝 楊勇 肖玲 付英子 馮濤
患者發(fā)生急性腦梗死的主要原因是腦部血管出現(xiàn)狹窄或堵塞,導(dǎo)致患者腦部血運(yùn)不暢,主要的發(fā)病群體為老年人,其具有高致殘率和高死亡率的特點,對患者的身心健康甚至生命都存在嚴(yán)重的威脅,并且當(dāng)代我國人口老齡化程度嚴(yán)重,同時人口平均壽命延長,所以急性腦卒中的發(fā)生率也在逐漸的上升中[1-3]。為了盡可能地降低急性腦卒中對老年人群健康和生命的威脅,有必要對急性腦卒中進(jìn)行進(jìn)一步的了解。本次研究旨在對βFg-455G/A多態(tài)性對急性腦梗死患者血小板聚集的影響進(jìn)行研究,現(xiàn)將研究結(jié)果報道如下。
本次研究選取2016年12月—2017年12月我院收治的70例急性腦梗死患者和來體檢的70例健康志愿者作為研究對象。急性腦梗死患者均符合相應(yīng)的臨床診斷標(biāo)準(zhǔn),并且患者本人或其家屬已經(jīng)簽署知情同意書。70例急性腦梗死患者中,男37例、女33例,年齡范圍為58~78歲,平均年齡為(71.4±3.5)歲;70例健康志愿者中,男38例、女32例,年齡范圍為57~79歲,平均年齡為(72.3±2.7)歲。本次研究已經(jīng)過我院倫理委員會批準(zhǔn),并且全部研究對象各方面基本資料對比,差異均不具有統(tǒng)計學(xué)意義(P均>0.05),具有可比性。
對兩組研究對象均進(jìn)行βFg-455G/A多態(tài)性和血小板聚集功能進(jìn)行檢測,檢測方法如下:
1.2.1 βFg-455G/A多態(tài)性檢測方法 引物序列:(1)5’-AAGAA TTTGGGAATGCAATCTCTGCTACC-3’;(2)5’-CTCCTCATTGTCGT TGACACCTTGGGAC-3’。
每50 μl的反應(yīng)體系中包含4×dNTP 1 μl以及10×buffer 5 μl,引物(1)和(2)各取1 μl,使用模板DNA 5 μl,TapDNA聚合酶2 U以及雙蒸水32 μl,進(jìn)行PCR熱循環(huán)的溫度條件的94℃。
HaeIII酶切體系:采用10×buffer 2 μl,HaeIII 5 U和PCR產(chǎn)物10 μl,加入雙蒸水使其增加至20 μl,于37℃環(huán)境下進(jìn)行3小時的水浴,之后使用濃度為2%的瓊脂糖凝膠于1×TBE中采用5 V/cm的電壓進(jìn)行電泳40分鐘,之后采用紫外線檢測儀對電泳結(jié)果進(jìn)行分析。
1.2.2 血小板聚集功能檢測方法 取研究對象晨起空腹靜脈血5 ml,使用3.8%的枸緣酸鈉進(jìn)行抗凝,注意進(jìn)行采血時動作應(yīng)迅速和準(zhǔn)確,采血后及時將血與抗凝劑進(jìn)行混勻,同時溶血及乳糜血樣本即可廢棄;采血后應(yīng)于3小時內(nèi)進(jìn)行離心,采用1 000 r/min進(jìn)行連續(xù)5分鐘的離心,使富血小板血清能夠分離;繼續(xù)采用3 000 r/min進(jìn)行連續(xù)10分鐘的離心,使貧血小板血清能夠分離;對富血小板血清采用二磷酸腺苷為誘導(dǎo)劑進(jìn)行比濁法檢測,對貧血小板血清采用花生四烯酸為誘導(dǎo)劑進(jìn)行比濁法檢測[4-5]。
血漿Fg濃度測定方法:采用Fg自動測定功能對血漿Fg水平進(jìn)行測定。
對兩組研究對象的βFg-455G/A多態(tài)性、血漿Fg水平和血小板聚集率進(jìn)行對比。
采用SPSS 19.0軟件對本次研究數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計,βFg-455G/A多態(tài)性和血小板聚集情況均屬于計量資料,應(yīng)通過(均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差)的形式表達(dá),并采用t檢驗,以P<0.05表示差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。
研究結(jié)果顯示,急性腦梗死患者的A等位基因的頻率為(0.56±0.11)%,高于健康志愿者的(0.26±0.04)%;血漿Fg水平為(5.58±1.27)g/L,高于健康志愿者的(3.13±0.53)g/L;并且急性腦梗死患者的血小板聚集率為(56.0±2.6)%,高于健康志愿者的(37.0±1.4)%,組間對比,差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P均<0.05)。
急性腦梗死指的是患者的腦血供突然發(fā)生中斷,導(dǎo)致患者的腦組織出現(xiàn)壞死,主要由患者的腦部血管血栓和粥樣硬化使得管腔狹窄甚至發(fā)生閉塞所致,一般臨床上采用較為廣泛的治療方法即為溶栓治療。所謂溶栓治療,就是使用溶栓藥物將患者血管內(nèi)的血栓進(jìn)行溶解,使患者被堵塞的血管能夠得到疏通。而患者的血管內(nèi)發(fā)生血栓,與血小板聚集具有重要的關(guān)系,一般來說,患者的血小板聚集率升高,患者發(fā)生急性腦梗死的幾率也就會隨之升高[6-8]。
根據(jù)相關(guān)的研究顯示,機(jī)體肝細(xì)胞核中存在三種能夠與βFg-455G/A周圍DNA片段相結(jié)合的蛋白質(zhì),并且其中之一能夠與G-455進(jìn)行穩(wěn)固的結(jié)合,但是與此相反,A-455則能夠求導(dǎo)類似于遏制蛋白質(zhì)的作用,所以攜帶A-455的人群血漿Fg水平相對更高,由此可見,βFg-455G/A多態(tài)性是導(dǎo)致血漿Fg水平發(fā)生變化的主要原因之一。同時,因為患者的血小板聚集率與血漿Fg水平具有重要關(guān)聯(lián),所以βFg-455G/A多態(tài)性的變化能夠?qū)颊叩难“寰奂十a(chǎn)生影響。
根據(jù)本次研究結(jié)果顯示,急性腦梗死患者的A等位基因的頻率高于健康志愿者,血漿Fg水平高于健康志愿者,并且急性腦梗死患者的血小板聚集率高于健康志愿者,組間對比,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P均<0.05)。
綜上所述,βFg-455G/A多態(tài)性頻率升高,能夠?qū)е录毙阅X梗死患者的血小板聚集率升高,可能促進(jìn)患者病情進(jìn)展甚至導(dǎo)致患者死亡,所以有必要對急性腦梗死患者的βFg-455G/A多態(tài)性的穩(wěn)定性進(jìn)行維持,以提高患者的預(yù)后和生活質(zhì)量。
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