自噬活性的降低增加人鼻咽癌CNE-2細(xì)胞的放射敏感性

盧小迪，朱小東，趙偉，等

摘要：目的：鼻咽癌是我國高發(fā)的惡性腫瘤之一，放射治療被公認(rèn)為其最有效的治療手段。然而，研究發(fā)現(xiàn)，鼻咽癌組織中存在一定比例的放射抗拒細(xì)胞，嚴(yán)重制約了鼻咽癌的放射治療療效和預(yù)后。自噬是胞質(zhì)大分子物質(zhì)和細(xì)胞器在裂解腔隙中大量降解的非選擇性動(dòng)力學(xué)過程。自噬被認(rèn)為不僅可以通過清除細(xì)胞內(nèi)的廢物、維持細(xì)胞內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定而影響細(xì)胞的生長發(fā)育，而且參與了多種疾病及腫瘤的發(fā)生、發(fā)展過程。研究表明，在多種人類腫瘤中均存在自噬活性的改變。自噬是近年來國內(nèi)外研究腫瘤細(xì)胞死亡機(jī)制的新熱點(diǎn)。然而，關(guān)于自噬與放療的關(guān)系，特別是自噬在鼻咽癌放射治療中的作用的研究國內(nèi)外卻鮮有報(bào)道。本課題組前期實(shí)驗(yàn)已證實(shí)，射線可以誘導(dǎo)鼻咽癌CNE-2細(xì)胞發(fā)生自噬，并且，自噬的發(fā)生表現(xiàn)為不同程度的劑量和時(shí)間依賴關(guān)系。基于以上理論，本研究選取自噬相關(guān)基因ATG5為切入點(diǎn)，利用慢病毒介導(dǎo)的RNA干擾這一實(shí)驗(yàn)方法，沉默自噬相關(guān)基因ATG5，進(jìn)一步研究自噬與鼻咽癌CNE-2細(xì)胞放射敏感性之間的關(guān)系，以期為鼻咽癌放射抗拒的研究提供理論依據(jù)，為提高鼻咽癌放療療效提供新思路。方法：采用慢病毒介導(dǎo)的RNA干擾技術(shù)建立穩(wěn)定沉默自噬相關(guān)基因ATG5的人鼻咽癌CNE-2細(xì)胞系，實(shí)驗(yàn)分為Control組、NC組及ATG5組，應(yīng)用CCK-8法、流式細(xì)胞術(shù)及克隆形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞增殖、凋亡及放射敏感性的變化。結(jié)果：CCK-8實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，與Control組和NC組相比，各劑量點(diǎn)ATG5組的細(xì)胞存活率均顯著降低（F＝3.755、46.086、8.609、44.160，P＜0.05），繪制細(xì)胞生存曲線可見下調(diào)ATG5的表達(dá)后可以增加CNE-2細(xì)胞的放射敏感性；流式細(xì)胞術(shù)結(jié)果顯示，經(jīng)6 Gy X射線照射后，ATG5組細(xì)胞的凋亡指數(shù)較NC組及Control組明顯升高（F＝394.876，P＜0.01）；克隆形成實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示沉默ATG5基因可增加鼻咽癌CNE-2細(xì)胞的放射敏感性（F＝219.025，P＜0.05）。結(jié)論：降低鼻咽癌CNE-2細(xì)胞的自噬活性可以增強(qiáng)其放射敏感性。

來源出版物：中華放射醫(yī)學(xué)與防護(hù)雜志, 2015, 35(6):423-427

入選年份：2015