665000普洱市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科,云南
分子生物學(xué)是將蛋白質(zhì)、核酸等作為主要探究對象的一種學(xué)科,而分子生物學(xué)相關(guān)技術(shù)則是建立于核酸生化前提下的一類技術(shù)手段,現(xiàn)階段這些技術(shù)已被普遍使用在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)領(lǐng)域之中,探索、研究的內(nèi)容囊括了DNA鑒定、核酸檢驗(yàn)及表達(dá)產(chǎn)物檢驗(yàn)分析[1]。此文以概述分子生物學(xué)技術(shù)在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)領(lǐng)域的實(shí)際運(yùn)用為主,并分析了此類技術(shù)的現(xiàn)存問題及未來發(fā)展趨勢。
生物實(shí)驗(yàn)及評估分析過程中,經(jīng)常接觸到的分子生物技術(shù)種類較多,當(dāng)中,分子生物傳感器屬于依據(jù)分子生物進(jìn)行結(jié)合的固定性技術(shù),該技術(shù)將生物識別原件結(jié)合于換能器上,而待檢驗(yàn)物品(樣品)能和生物傳感器形成特異性反應(yīng),進(jìn)而分子生物傳感器對所檢驗(yàn)的對象實(shí)施內(nèi)部技術(shù)鑒定,并將識別、鑒定的分子以信號方式進(jìn)行傳遞,傳遞方式包括光信號、電信號[2]。殘留的待檢驗(yàn)物質(zhì)將利用下一程序展開定性檢驗(yàn)以及綜合分析。檢驗(yàn)液體物品時(shí),會(huì)檢出微量小分子物質(zhì)、蛋白物質(zhì)及核酸,這些物質(zhì)基本屬于小分子類物質(zhì),但分子生物傳感器均能檢測出來。與此同時(shí),醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中運(yùn)用的現(xiàn)代技術(shù)程序相當(dāng)復(fù)雜,能為臨床疾病判定、病患病情評估等提供有效參考信息,以核酸生化為前提的分子生物學(xué)技術(shù)能為臨床主治醫(yī)生提供一種新式檢驗(yàn)手段,促使臨床診斷和病情分析等工作的效率、質(zhì)量進(jìn)一步提升。
用于檢驗(yàn)病原微生物:分子生物學(xué)相關(guān)技術(shù)用在病原微生物的臨床檢驗(yàn)中,能提升疾病檢測、鑒別的效率。和傳統(tǒng)免疫檢驗(yàn)測定、培養(yǎng)鑒定等相比較,生物芯片、PCR技術(shù)用于病原微生物實(shí)際檢驗(yàn)中的敏感性更高,且耗時(shí)短、適用范圍廣。PCR技術(shù)能用于檢驗(yàn)液體物質(zhì),并能有效檢測出微量的小分子類物質(zhì)(小分子物質(zhì)、蛋白物質(zhì)及核酸等)。生物芯片技術(shù)的醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)運(yùn)用則表現(xiàn)出高效率性、高靈敏性,該技術(shù)可同時(shí)檢驗(yàn)出上百種類型的病原微生物,能為快速查找標(biāo)本耐藥基因作出有效指導(dǎo)。由于病原微生物的自身體積非常微小,這就增加了日常檢驗(yàn)工作的操作難度,通過分子生物學(xué)相關(guān)技術(shù)可在樣本的大量死菌中篩查、識別出活菌,這類技術(shù)的優(yōu)勢之一體現(xiàn)為不會(huì)受到液體內(nèi)其他類型微生物的干擾,能精確查找出致病因素,并予以及時(shí)治療[3]。
用于診斷腫瘤及遺傳疾病:在腫瘤疾病及遺傳疾病的臨床診斷當(dāng)中,如果聯(lián)合分子生物學(xué)技術(shù)開展工作,將能依據(jù)病例的實(shí)際病況,查找到疾病源頭(即機(jī)體中存在的基因缺陷)?;蚱畏治鍪欠肿訉W(xué)的研究范疇,合理使用分子生物學(xué)技術(shù)能快速找到基因的缺陷片段,利用基因芯片鑒定靶基因P53抑癌基因是否出現(xiàn)突變,并以生物傳感器、分子蛋白質(zhì)組學(xué)、流式細(xì)胞術(shù)等技術(shù)手段可有效識別出腫瘤的特異性標(biāo)志物質(zhì)。對于遺傳疾病的鑒定,分子生物技術(shù)可鑒別出患病家族的基因中存在特定多態(tài)性,常見的技術(shù)包括分析單鏈構(gòu)象多態(tài)性、DNA限制性片段長度多態(tài)性、熒光原位雜交染色體及微陣列技術(shù)與酶基因調(diào)控技術(shù)[4]。值得注意的一點(diǎn)是,DNA片段的結(jié)構(gòu)很復(fù)雜,表現(xiàn)為特殊雙螺旋的結(jié)構(gòu),運(yùn)用分子生物技術(shù)實(shí)施檢驗(yàn)時(shí),應(yīng)注重保護(hù)DNA原始分布結(jié)構(gòu),不可對其進(jìn)行破壞。
用于診斷免疫系統(tǒng)疾病:在免疫系統(tǒng)性疾病的鑒別、診斷工作中運(yùn)用分子生物技術(shù),可盡早確定患者基因片段有無異常突變現(xiàn)象,而診斷這類疾病的關(guān)鍵就在于鑒別基因片段的正常狀況。對人體的免疫系統(tǒng)展開研究,需用分子生物技術(shù)完成基因片段的高效檢測。例如,在檢測人類免疫缺陷病毒時(shí),分子生物納米技術(shù)將抗體作為基礎(chǔ),通過免疫分析、磁性修飾等方式檢出免疫物質(zhì),運(yùn)用同位素、熒光劑、酶固定特異性抗體抗原及納米磁性微球,如此可自動(dòng)查找出免疫缺陷病毒1型抗體、2型抗體,繼而為防治病毒性疾病提供了有效信息[5]。免疫系統(tǒng)性疾病的分類繁多,在鑒定這類疾病的具體分型時(shí)需利用精準(zhǔn)的分子生物技術(shù)來展開檢驗(yàn)辨別。
對分子生物技術(shù)的運(yùn)用現(xiàn)狀展開分析得知,當(dāng)前此類技術(shù)面臨的主要問題包括:技術(shù)程序較復(fù)雜、對儀器設(shè)備的要求過高、試劑藥品與反應(yīng)盒的價(jià)格較昂貴等,因此限制了相關(guān)技術(shù)的進(jìn)一步推廣。具體來講,分子生物學(xué)技術(shù)的檢驗(yàn)方法兼具高靈敏性、高特異性,其可為臨床診斷提供較可靠的信息依據(jù),但是,臨床中仍然需要選擇適合經(jīng)濟(jì)條件的檢驗(yàn)項(xiàng)目,譬如,結(jié)核菌培養(yǎng)、涂片鏡檢等都可以達(dá)到鑒定目的,沒有必要舍廉選貴,加重患者經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。還有,疾病診斷不可過度依賴于檢測的結(jié)果,還要綜合考量患者的各項(xiàng)信息、資料,若僅按照分子生物技術(shù)的檢驗(yàn)結(jié)果便妄下定論,很可能會(huì)忽視樣本取樣有限、檢測操作不當(dāng)、病情發(fā)展規(guī)律等客觀因素所造成的假陰性、假陽性問題,進(jìn)而延誤病情。最后,運(yùn)用分子生物技術(shù)的部分檢驗(yàn)人員不具備過硬技能水平,使分子生物檢驗(yàn)的過程受到一定干擾,并降低了檢驗(yàn)所得結(jié)果的精確度、可信度[6]。
即使分子生物技術(shù)的運(yùn)用過程存在一些問題,但其依然表現(xiàn)出迅速發(fā)展、進(jìn)步的趨勢,分子生物技術(shù)的未來發(fā)展將傾向于以下兩大方面:①分子生物技術(shù)的運(yùn)用將從實(shí)驗(yàn)室內(nèi)研究逐步過渡至臨床實(shí)用型分析,以減少實(shí)驗(yàn)物品的成本投入,簡化具體的操作程序,逐步實(shí)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)過程的全面自動(dòng)化,減少人為因素對操作的干擾,持續(xù)增強(qiáng)技術(shù)檢驗(yàn)敏感性、特異性。②加大檢驗(yàn)儀器的投入,推進(jìn)實(shí)驗(yàn)室的優(yōu)化建設(shè),注重加強(qiáng)檢驗(yàn)人員的技能培訓(xùn),以確保分子生物技術(shù)在臨床運(yùn)用中的可信度、準(zhǔn)確度,通過可持續(xù)性、科學(xué)性的檢驗(yàn)手段為臨床提供高效服務(wù)[7]。
綜合以上闡述,當(dāng)前分子生物學(xué)技術(shù)已在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)領(lǐng)域中受到普遍認(rèn)可,醫(yī)學(xué)衛(wèi)生部門對其制定了相應(yīng)管理制度。規(guī)范運(yùn)用分子生物技術(shù)可明顯減少醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)程序里交叉污染的有關(guān)問題,同時(shí)能提升醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)操作的整體效率,使醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)的靈敏度、特異度、精確度得到提高。