朱齊寧，崔 靜

(嶺南師范學(xué)院 生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院，廣東 湛江 524048)

隨著競(jìng)技運(yùn)動(dòng)的迅猛發(fā)展，對(duì)運(yùn)動(dòng)員的營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充要求不斷提高,特別是具有調(diào)節(jié)生理功能，有針對(duì)性地改善機(jī)體在缺氧環(huán)境下運(yùn)動(dòng)能力的物質(zhì)日益重視.我國(guó)運(yùn)動(dòng)醫(yī)學(xué)工作者進(jìn)行了不少抗疲勞和耐缺氧的實(shí)驗(yàn)研究,研究發(fā)現(xiàn)，泥鰍多糖[1]、久瀉靈[2]、辣椒和人參提取液[3]，北五味子提取液[4]等中藥具有提高機(jī)體抗疲勞和耐缺氧能力的效果.益母草為唇形科、屬植物，夏季開(kāi)花[5-6].其干燥地上部分為常用中藥，中國(guó)大部分地區(qū)產(chǎn)的益母草味辛苦、涼，具有活血、祛淤、調(diào)經(jīng)、消水等功效.近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)益母草還具有抗血小板聚集、凝集，改善冠脈循環(huán)和保護(hù)心臟，增強(qiáng)心臟收縮力[7]等作用.本研究選用小鼠作為研究對(duì)象，探討益母草提取液對(duì)小鼠抗疲勞與耐缺氧能力的影響，為益母草的進(jìn)一步開(kāi)發(fā)和利用提供科學(xué)依據(jù).

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

實(shí)驗(yàn)小鼠40只，雌雄各半，4周齡，體重(25～30)g，購(gòu)于廣東醫(yī)學(xué)院動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心.飼養(yǎng)條件：清潔級(jí)飼養(yǎng)條件(在本學(xué)校動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室飼養(yǎng)).飼養(yǎng)室內(nèi)溫度維持在(25±2)℃，濕度維持在(55±5)%.每天定時(shí)開(kāi)紫外線(xiàn)燈消毒1h，定時(shí)通風(fēng).使用經(jīng)嚴(yán)格消毒的，營(yíng)養(yǎng)豐富的專(zhuān)用飼料和純凈水進(jìn)行喂養(yǎng).所有小鼠分組分籠飼養(yǎng)，確保小鼠有足夠的活動(dòng)空間，可以讓小鼠自由攝食攝水.墊料隔日換一次，確保飼養(yǎng)籠的干燥和衛(wèi)生.

1.1.2 受試樣品

取3 g益母草粉溶于50 mL蒸餾水中，然后置于小燒杯中用酒精燈加熱至沸騰，沸騰后，等混合液蒸發(fā)至剩下20 mL時(shí)停止加熱.待混合液冷卻后先用紗布把益母草粉過(guò)濾出來(lái)，然后再用濾紙過(guò)濾一遍.最后得到為0.15 g/mL益母草粗提液(每一次制取粗提液用于3次注射).

1.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器

1 mL注射器，小型動(dòng)物跑臺(tái)，秒表，電子稱(chēng)，酒精燈，100 mL小燒杯，紗布，濾紙,250 mL廣口瓶，25 L塑料桶,溫度計(jì)等.

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 動(dòng)物分組及給藥方法

按性別、體重隨機(jī)分成4組，分別為對(duì)照不運(yùn)動(dòng)組和運(yùn)動(dòng)組，實(shí)驗(yàn)不運(yùn)動(dòng)組，實(shí)驗(yàn)運(yùn)動(dòng)組,每組10只.

采用臀大肌注射的方式給藥，給藥的劑量是0.2 mL/只，給藥的頻率是隔天一次.對(duì)照組也以同樣的方法注射濃度為0.9%的生理鹽水0.2 mL/只，共給藥28 d.

1.2.2 訓(xùn)練方案

適應(yīng)性喂養(yǎng)5 d后，對(duì)照運(yùn)動(dòng)組和實(shí)驗(yàn)運(yùn)動(dòng)組小鼠在動(dòng)物跑臺(tái)上進(jìn)行跑步訓(xùn)練，1次/d.運(yùn)動(dòng)強(qiáng)度是：第1周頻率為(10±0.2) m/min，距離為100 m ；第2周頻率為(15±0.2)m/min，距離為150 m;第3周頻率為(15±0.2m)/min，距離為200 m；第4周頻率為(20 ±0.2m)/分，距離為400 m，共運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練7周.其余2組不做任何運(yùn)動(dòng).

1.2.3 抗疲勞實(shí)驗(yàn)

實(shí)驗(yàn)組給藥、訓(xùn)練28 d后，讓小鼠休息1 d后進(jìn)行負(fù)重(所負(fù)重量為小鼠體重的5%，固定在小鼠尾部)游泳.從小鼠放入水中開(kāi)始計(jì)時(shí)，以小鼠無(wú)力沖起沉入水底為止，記錄其負(fù)重游泳時(shí)間.

1.2.4 耐缺氧實(shí)驗(yàn)

實(shí)驗(yàn)組給藥訓(xùn)練28d后，讓小鼠休息1d后進(jìn)行耐缺氧實(shí)驗(yàn).將小鼠放進(jìn)250mL的廣口瓶中，用凡士林涂抹瓶塞,密封瓶口立即計(jì)時(shí)，以小鼠停止呼吸為止，記錄小鼠的存活時(shí)間.

1.2.5 統(tǒng)計(jì)方法

2 結(jié)果與分析

2.1 實(shí)驗(yàn)過(guò)程中小鼠的狀態(tài)

在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中各組小鼠精神狀態(tài)，活動(dòng)情況均正常，各組小鼠都較活潑，未出現(xiàn)掉毛，體毛凌亂，無(wú)光澤，大便形態(tài)改變等不良現(xiàn)象，生長(zhǎng)變化也未出現(xiàn)較大差異.說(shuō)明所建立的實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ秃筒捎玫挠?xùn)練方案未造成過(guò)度訓(xùn)練，也未給小鼠帶來(lái)不良的影響.

2.2 益母草對(duì)小鼠抗疲勞能力的影響

疲勞是人腦力或體力到達(dá)一定階段時(shí)必然出現(xiàn)的一種正常的生理現(xiàn)象，是機(jī)體復(fù)雜的變化過(guò)程.可以分生理疲勞與心理疲勞[8-9].在表1中，對(duì)照不運(yùn)動(dòng)組的平均游泳時(shí)間為2.57 min，對(duì)照運(yùn)動(dòng)組的平均游泳時(shí)間為3.15 min，比對(duì)照不運(yùn)動(dòng)組有一定的延長(zhǎng).實(shí)驗(yàn)不運(yùn)動(dòng)組的平均游泳時(shí)間為7.70 min，比對(duì)照組都有明顯的延長(zhǎng).實(shí)驗(yàn)運(yùn)動(dòng)組的平均游泳時(shí)間為13.03 min，比其它3組平均游泳時(shí)間明顯的延長(zhǎng).小鼠負(fù)重游泳時(shí)間的差異，顯示了益母草提取液對(duì)提高抗疲勞能力的有效作用.4組相比，差異顯著 (P<0.05).結(jié)果顯示，益母草提取液可以延長(zhǎng)小鼠負(fù)重游泳的時(shí)間.

表1 益母草對(duì)小鼠抗疲勞能力的影響

注：P<0.05,對(duì)照不運(yùn)動(dòng)組與對(duì)照運(yùn)動(dòng)組、實(shí)驗(yàn)不運(yùn)動(dòng)組、實(shí)驗(yàn)運(yùn)動(dòng)組比較存在差異.

2.3 益母草對(duì)小鼠耐缺氧能力的影響

缺氧可以引起機(jī)體產(chǎn)生各種反應(yīng)，生命活動(dòng)中，心臟和腦缺氧是小鼠死亡的主要原因[10-11].在表2中，對(duì)照不運(yùn)動(dòng)組的平均耐缺氧時(shí)間為12.70 min，對(duì)照運(yùn)動(dòng)組的平均耐缺氧時(shí)間為14.20 min，比對(duì)照不運(yùn)動(dòng)組有一定的延長(zhǎng).實(shí)驗(yàn)不運(yùn)動(dòng)組的平均耐缺氧時(shí)間為15.45 min，比對(duì)照不運(yùn)動(dòng)組、對(duì)照運(yùn)動(dòng)組都有明顯的延長(zhǎng).實(shí)驗(yàn)運(yùn)動(dòng)組的平均耐缺氧時(shí)間為24.73 min，比對(duì)照不運(yùn)動(dòng)組、對(duì)照運(yùn)動(dòng)組、實(shí)驗(yàn)不運(yùn)動(dòng)組都有很明顯的延長(zhǎng).對(duì)照不運(yùn)動(dòng)組與對(duì)照運(yùn)動(dòng)組的差異不顯著(P>0.05)，而對(duì)照不運(yùn)動(dòng)組、實(shí)驗(yàn)不運(yùn)動(dòng)組、對(duì)照運(yùn)動(dòng)組與實(shí)驗(yàn)運(yùn)動(dòng)組相比，有顯著性差異(P<0.05).實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，益母草提取液可以延長(zhǎng)小鼠耐缺氧的時(shí)間.

表2 益母草對(duì)小鼠耐缺氧能力的影響

注：P<0.05,對(duì)照不運(yùn)動(dòng)組與對(duì)照運(yùn)動(dòng)組、實(shí)驗(yàn)不運(yùn)動(dòng)組、實(shí)驗(yàn)運(yùn)動(dòng)組比較存在差異.

3 結(jié) 論

益母草提取液對(duì)小白鼠有耐缺氧、抗疲勞及增強(qiáng)運(yùn)動(dòng)能力的作用，但由于實(shí)驗(yàn)樣品較少，提取方法單一，尚屬于定性和趨勢(shì)界定，只能作為眾多類(lèi)似實(shí)驗(yàn)結(jié)論當(dāng)中有益的嘗試.

[1] 周軍,張晨曉,黃開(kāi)勛.泥鰍多糖對(duì)小鼠耐缺氧作用的研究[J].中國(guó)藥理學(xué)通報(bào), 2003,99(10):1182-1184.

[2] 梁永林,殷銀霞,吳玉泓,等.久瀉靈對(duì)小鼠抗疲勞及耐減壓缺氧作用的影響[J].中醫(yī)藥通報(bào),2005,4(5):55-57.

[3] 王鋒,譚興和,張禮紅,等.辣椒和人參提取液對(duì)小鼠游泳及耐缺氧能力的影響[J].科學(xué)研究，2007,128(2):26-29.

[4]王文燕,王婧婧,韓振坤,等.北五味子提取液對(duì)小鼠耐缺氧和抗疲勞能力的影響[J].蒙古民族大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版)，2008,23(6):668-670.

[5] 范美華,王健鑫,李鵬,等.益母草的研究進(jìn)展[J];中國(guó)藥物與臨床，2006(7)：528-529.

[6] 申利紅,王勝利.益母草的研究進(jìn)展[J];安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2010，28(8)：4414-4416.

[7] 富顯祖,何永俠,鄧?yán)?等.益母草成分鹽酸益母草堿對(duì)小鼠急性毒性實(shí)驗(yàn)研究[J].時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥,2015，26(4)：865-866.

[8]陳亞?wèn)|,曹秀蘭,田長(zhǎng),等.高山紅景天對(duì)小鼠耐缺氧、抗疲勞及耐低溫作用的影響[J].中國(guó)中醫(yī)藥科技,2002,9(3):157-158.

[9]吳新正,何迎春,劉洪平,等.紅景天復(fù)方對(duì)小鼠免疫、耐缺氧、抗疲勞能力的影響[J].湖南中醫(yī)藥大學(xué)報(bào),2008,28(1):29-31.

[10]劉曉波，劉曉正，晏彩芬，等.玉葡萄根耐缺氧作用的研究[J].云南中醫(yī)藥雜志,2007,28(11)：39-40.

[11]張旭，張汝學(xué)，涂宏海，等.中藥復(fù)方提高機(jī)體耐缺氧能力及機(jī)制的研究進(jìn)展[J].中華中醫(yī)藥學(xué)刊,2007,9(25):21-22.