王群葆，劉 濤，李 斌，楊鳳巧，曹 旭，田運(yùn)佳

(邢臺(tái)市食品藥品檢驗(yàn)所，河北 邢臺(tái) 054000)

復(fù)方氨酚葡鋅片[1]于1989年由河北恒利集團(tuán)制藥股份有限公司研制，自1993年上市以來，憑借著其中藥加西藥一起治療感冒的獨(dú)特優(yōu)勢(shì)，深受廣大患者的青睞。質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)收載在國家藥品標(biāo)準(zhǔn)WS1-(X-150)-97Z-2000，其中對(duì)乙酰氨基酚含量測定方法專屬性差；按照現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)控制本品質(zhì)量存在一定安全風(fēng)險(xiǎn)，試驗(yàn)結(jié)果不能真正有效反映藥品質(zhì)量優(yōu)劣，安全性和有效性檢驗(yàn)項(xiàng)目設(shè)置不完善，有必要對(duì)現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行完善和提高。

1 儀器與試藥

儀器：Waters e2695高效液相色譜儀、Waters2489(UV)檢測器，Empower工作站軟件；色譜柱：Waters Sunfire C18(4.6×250mm，5μm NO.:186002560)；BP211D電子天平。

試劑和對(duì)照品：對(duì)乙酰氨基酚對(duì)照品(中國藥品生物制品檢定所，批號(hào)100018-200408，使用前不需干燥)、原輔料(河北恒利集團(tuán)制藥股份有限公司提供)、甲醇(色譜純 北京市通廣精細(xì)化工公司)、冰乙酸(分析純 北京化工廠)、水為純化水。

2 方法與結(jié)果

2.1 測定方法

(1)色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-0.5%冰乙酸(20:80)為流動(dòng)相；檢測波長為249nm；流速為0.8ml/min，柱溫30℃，理論塔板數(shù)按對(duì)乙酰氨基酚峰計(jì)算應(yīng)不低于5000。

(2)對(duì)照品溶液的制備：取對(duì)乙酰氨基酚對(duì)照品16mg，精密稱定，置100ml量瓶中，加流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，搖勻，再精密量取5ml，置100ml量瓶中，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，即得。

(3)供試品溶液的制備：取本品20片，除去包衣，精密稱定，研細(xì)，精密稱取細(xì)粉適量(約相當(dāng)于對(duì)乙酰氨基酚16mg)，置100ml量瓶中，加流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，搖勻，過濾，精密量取續(xù)濾液5ml，置100ml量瓶中，加流動(dòng)相至刻度，搖勻，即得。

(4)陰性對(duì)照溶液的制備：稱取原料藥不加對(duì)乙酰氨基酚，按供試品溶液制備的方法制備陰性對(duì)照溶液。

(5)測定法：分別精密量取對(duì)照品溶液和供試品溶液各20μl，注入色譜儀，記錄色譜圖。

2.2 線性關(guān)系考察

取對(duì)乙酰氨基酚對(duì)照品，精密稱取10.16mg置100ml量瓶中，加流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為對(duì)照品貯備液。分別精密量取2，3，5，8，10，20ml置100ml量瓶中，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻。按上述色譜條件下分別進(jìn)樣20μl進(jìn)行測定。以對(duì)乙酰氨基酚對(duì)照品濃度(μg/ml)為橫坐標(biāo)，以峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程：Y=9.98×104X-7.67×103，r2=0.9994，結(jié)果表明對(duì)乙酰氨基酚在2μg/ml～20μg/ml濃度范圍內(nèi)，線性關(guān)系良好。標(biāo)準(zhǔn)曲線見圖1。

2.3 專屬性試驗(yàn)

分別精密量取對(duì)照品溶液、供試品溶液和陰性對(duì)照溶液各20μl注入液相色譜儀，按含量測定色譜條件測定，結(jié)果供試品溶液主峰的保留時(shí)間與對(duì)照品溶液主峰的保留時(shí)間一致，而陰性對(duì)照溶液在與對(duì)照品溶液相應(yīng)的位置上沒有色譜峰，表明該方法的專屬性較好，無干擾，可用作對(duì)乙酰氨基酚的鑒別。見圖2、圖3、圖4

圖1 對(duì)乙酰氨基酚標(biāo)準(zhǔn)曲線

圖2 陰性對(duì)照溶液色譜圖

圖3 對(duì)照品溶液色譜圖

圖4 供試品溶液色譜圖

2.4 精密度試驗(yàn)

取線性關(guān)系考察項(xiàng)下濃度為8μg/ml的對(duì)照品溶液，在上述色譜條件下重復(fù)進(jìn)樣5次，測定峰面積，結(jié)果見表1。

表1 精密度試驗(yàn)結(jié)果

2.5 穩(wěn)定性試驗(yàn)

取對(duì)照品溶液，按含量測定方法測定，在0，1，2，5，8，12h分別進(jìn)樣20μl，記錄峰面積，結(jié)果RSD=1.0%，表明溶液在12小時(shí)內(nèi)穩(wěn)定。見表2。

表2 穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果

2.6 重現(xiàn)性試驗(yàn)

精密稱取同一批樣品(批號(hào)1211106，平均片重0.5012g)6份約0.08031g，照含量測定方法制成供試品溶液，分別精密量取20μl注入色譜儀，記錄峰面積，結(jié)果含量RSD=0.25%(見表3)。表明該方法的重現(xiàn)性良好。

表3 重現(xiàn)性試驗(yàn)結(jié)果

2.7 回收試驗(yàn)

按處方比例精密稱取原料藥不加對(duì)乙酰氨基酚(約相當(dāng)于10片量)，葡萄糖酸鋅0.7020g、鹽酸二氧丙嗪0.0122g、板藍(lán)根浸膏粉2.5011g、淀粉0.7603g、硬脂酸鎂0.0311g，研磨混勻。稱取混勻原料藥約0.08400g，置100ml量瓶中，平行9份。精密加入對(duì)乙酰氨基酚對(duì)照品14、16、18mg，各平行3份，加流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，搖勻，濾過，再精密量取5ml置100ml量瓶中，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，照含量測定方法測定。結(jié)果見表4。

表4 回收試驗(yàn)結(jié)果

2.8 耐用性試驗(yàn)

取同一批號(hào)樣品照含量測定方法制備供試品溶液，分別用三個(gè)不同牌號(hào)的色譜柱測定，結(jié)果RSD為0.8%，流動(dòng)相組成比例、柱溫、流速等稍有變化和使用不同牌號(hào)液相色譜儀對(duì)測定結(jié)果影響不大，表明該方法耐用性較好。

2.9 批量試驗(yàn)

按含量測定方法，對(duì)10批不同批號(hào)的復(fù)方氨酚葡鋅片進(jìn)行含量測定，結(jié)果見表5。

表5 10批不同批號(hào)測定結(jié)果

3 討論

[2-3]中都對(duì)對(duì)乙酰氨基酚含量測定方法進(jìn)行改進(jìn)，但陰性對(duì)照沒有進(jìn)行測試，原標(biāo)準(zhǔn)[1]采用的紫外分光光度法 雙波長法，在267nm、271nm測定吸收值，以差值計(jì)算對(duì)乙酰氨基酚的含量，影響因素較多，方法專屬性差，測得含量較高。用生產(chǎn)廠家原料藥不加對(duì)乙酰氨基酚作陰性對(duì)照(平行3份)，按原檢測方法，在267nm、271nm測定吸收值，差值平均為0.016(在240nm～290nm波長范圍內(nèi)，掃描圖譜，見圖5)，而按原檢測方法，取樣品檢測含量時(shí)差值平均為0.051，說明陰性對(duì)照溶液對(duì)試驗(yàn)結(jié)果的影響較大。采用高效液相色譜法檢測可以把其它影響因素排除，從而測得更為真實(shí)的結(jié)果。

圖5 陰性對(duì)照紫外掃描色譜圖

參考文獻(xiàn)：

[1] 國家藥品標(biāo)準(zhǔn)WS1-(X-150)-97Z-2000.

[2] 王彬彬,姜靜.復(fù)方氨酚葡鋅片中對(duì)乙酰氨基酚含量測定方法的改進(jìn)[J].中國藥師,2007,(08):830-831.

[3] 張平,俞永梅.復(fù)方氨酚葡鋅片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的提高研究[J].中國藥師,2012,(11):1577-1579.