楊靖怡 楊守博 康莊 康勛 綜述 李文斌 審校

腦膠質(zhì)瘤是中樞神經(jīng)系統(tǒng)最為常見(jiàn)且預(yù)后較差的原發(fā)性惡性腫瘤，占美國(guó)腦腫瘤注冊(cè)中心統(tǒng)計(jì)所有腦和中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤的31%，占惡性腦腫瘤和中樞神經(jīng)系統(tǒng)惡性腫瘤的81%，每年發(fā)病率為5/100 000例，且呈逐年遞增趨勢(shì)［1］。低級(jí)別膠質(zhì)瘤（WHOⅠ、Ⅱ級(jí)）的中位生存時(shí)間為5～8年；高級(jí)別膠質(zhì)瘤（WHOⅢ、Ⅳ級(jí)）稱(chēng)為惡性膠質(zhì)瘤，其中Ⅲ級(jí)間變型星形細(xì)胞瘤的中位生存時(shí)間為3年左右，Ⅳ級(jí)膠質(zhì)母細(xì)胞瘤（glioblastoma，GBM）的中位生存時(shí)間僅為14.4個(gè)月［2］，年齡＞60歲的患者生存時(shí)間更短。分子病因?qū)W顯示，其發(fā)生和發(fā)展與多種因素有關(guān)［3］，包括原癌基因活化、抑癌基因失活、凋亡相關(guān)基因異常、血管活性因子高表達(dá)、相關(guān)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的激活等。膠質(zhì)瘤作為常見(jiàn)的原發(fā)性顱內(nèi)腫瘤，呈浸潤(rùn)生長(zhǎng)且血管豐富，其組織學(xué)異質(zhì)性使得影像學(xué)及術(shù)中觀察很難明確腫瘤范圍，無(wú)法進(jìn)行徹底切除［4］。目前，國(guó)際上常規(guī)應(yīng)用手術(shù)輔以放療、化療綜合治療方案，以及靶向治療如貝伐單抗等藥物的使用，但患者的生存質(zhì)量及預(yù)后并不理想。因此，尋找新型抗膠質(zhì)瘤藥物成為近年國(guó)內(nèi)外研究的熱點(diǎn)。

綠原酸（chlorogenic acid，CGA）是由反式肉桂酸（trans-cinnamic acids）與奎尼酸（quinic acid）組成的多酚類(lèi)化合物［5］，包括香豆?？崴?、阿魏酰奎尼酸、咖啡?？崴幔╟affeoyl quinic acid，CQA）等分子結(jié)構(gòu)，且存在多種同分異構(gòu)體如新綠原酸（cryptochloro?genic acid，4-CQA）、隱綠原酸（neochlorogenic acid，5-CQA）等，目前仍沿用國(guó)際純粹與應(yīng)用化學(xué)聯(lián)合會(huì)（IUPAC）之前的建議將3-CQA作為綠原酸［6］。綠原酸廣泛存在于杜仲、金銀花等植物中，作為一種中藥提取物，其抗腫瘤作用及分子機(jī)制已得到很多實(shí)驗(yàn)證實(shí)，被認(rèn)為是癌癥的有效化學(xué)防護(hù)劑［7］。本文將重點(diǎn)歸納綠原酸類(lèi)物質(zhì)抗腫瘤作用，尤其是與膠質(zhì)瘤相關(guān)的分子作用機(jī)制，并介紹其在膠質(zhì)瘤治療中的相關(guān)應(yīng)用及前景。

1 抗膠質(zhì)瘤分子機(jī)制

1.1 調(diào)節(jié)免疫功能

腫瘤微環(huán)境中的免疫系統(tǒng)對(duì)腫瘤的形成起到了至關(guān)重要的作用，從免疫監(jiān)視到免疫平衡最終免疫逃逸，腫瘤細(xì)胞和微環(huán)境的免疫能力此消彼長(zhǎng)。Kang等［8］通過(guò)表達(dá)譜芯片研究綠原酸對(duì)于BALB/c EMT-6雌性小鼠的作用，發(fā)現(xiàn)與免疫系統(tǒng)調(diào)節(jié)通路相關(guān)的基因CaN和NFAT基因被激活，CaN/NFAT信號(hào)通路作用廣泛，可以提高Th1型細(xì)胞因子（IFN-γ和IL-2）的表達(dá)，抑制Th2型細(xì)胞因子（IL-4和IL-10）表達(dá)，活化T細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、NK細(xì)胞和B細(xì)胞，從而達(dá)到調(diào)節(jié)免疫作用。

微環(huán)境中細(xì)胞因子的作用可使巨噬細(xì)胞分化成不同狀態(tài)，M2型巨噬細(xì)胞表達(dá)多與高級(jí)別膠質(zhì)瘤的不良預(yù)后相關(guān)，且可能促進(jìn)腫瘤微環(huán)境的形成［9］，而M2型巨噬細(xì)胞向M1型轉(zhuǎn)化能夠促進(jìn)抗腫瘤免疫反應(yīng)，抑制腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移，上述現(xiàn)象在肝癌、前列腺癌、乳腺癌、膠質(zhì)母細(xì)胞瘤中均有發(fā)現(xiàn)［10］，且與非小細(xì)胞肺癌患者生存期延長(zhǎng)相關(guān)［11］。近期研究表明綠原酸可以通過(guò)促進(jìn)STAT1活化，增加LPS/IFN-γ介導(dǎo)的M1型巨噬細(xì)胞相關(guān)標(biāo)記物如iNOS、MHCⅡ和CD11c，同時(shí)通過(guò)抑制STAT6減少I(mǎi)L-4介導(dǎo)的M2型巨噬細(xì)胞標(biāo)記物Arg和CD206的表達(dá)，從而抑制膠質(zhì)瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)。此外，綠原酸處理的G422小鼠體內(nèi)CD11c陽(yáng)性的M1型巨噬細(xì)胞比例增加、M2型巨噬細(xì)胞減少，其程度與荷瘤小鼠的腫瘤減少重量相一致［12］。

1.2 調(diào)節(jié)細(xì)胞周期且促進(jìn)細(xì)胞凋亡

細(xì)胞凋亡的調(diào)控包括腫瘤抑制蛋白p53、視網(wǎng)膜細(xì)胞瘤（retinoblastoma，RB）蛋白以及Bcl-2蛋白家族成員，惡性膠質(zhì)瘤細(xì)胞中存在這些基因表達(dá)的改變，其中以p53的改變最為廣泛［13］。p53蛋白是細(xì)胞凋亡調(diào)控的關(guān)鍵，可使細(xì)胞分裂周期靜止來(lái)促進(jìn)受損DNA修復(fù)，并啟動(dòng)DNA片段化誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡以防止異常增殖［14］，其生物效應(yīng)表現(xiàn)為Bax或Bcl-2目標(biāo)基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控，而B(niǎo)cl-2蛋白家族按其功能分為抑制凋亡和促進(jìn)凋亡兩類(lèi)，其中Bax作為細(xì)胞凋亡的促進(jìn)基因，其過(guò)度表達(dá)可以使細(xì)胞趨于凋亡。Sitarek等［15］分析發(fā)現(xiàn)益母草根莖提取物成分中含有綠原酸，將膠質(zhì)瘤細(xì)胞經(jīng)益母草根莖提取物處理后，流式細(xì)胞計(jì)數(shù)分析發(fā)現(xiàn)膠質(zhì)瘤細(xì)胞凋亡增加且呈劑量依賴(lài)性，進(jìn)一步檢測(cè)凋亡相關(guān)基因表達(dá)可見(jiàn)p53表達(dá)水平上調(diào)，同時(shí)存在Bcl-2蛋白表達(dá)降低以及Bax蛋白水平的顯著提高，而B(niǎo)ax/Bcl-2的比例升高更傾向于促進(jìn)膠質(zhì)瘤細(xì)胞凋亡。由此可見(jiàn)，綠原酸可能增加p53表達(dá)，促進(jìn)損傷DNA的修復(fù)，同時(shí)上調(diào)Bax/Bcl-2比例，介導(dǎo)膠質(zhì)瘤細(xì)胞的凋亡。此外，上述細(xì)胞凋亡過(guò)程可以避免炎癥反應(yīng)發(fā)生及其引起的周?chē)?xì)胞損傷，所以綠原酸抗腫瘤作用的同時(shí)無(wú)明顯不良反應(yīng)。

1.3 調(diào)節(jié)代謝并抑制腫瘤細(xì)胞侵襲和轉(zhuǎn)移能力

侵襲性和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移是惡性腫瘤細(xì)胞的本質(zhì)特性和基本能力，而腫瘤細(xì)胞的侵襲能力主要通過(guò)基質(zhì)金屬蛋白酶（matrix metalloproteinases，MMP）降解、破壞細(xì)胞外基質(zhì)和基底膜得以實(shí)現(xiàn)。MMP-2作為蛋白溶解酶家族成員，被證實(shí)在腫瘤增殖、侵襲過(guò)程中扮演重要角色。惡性腫瘤利用葡萄糖的速率高于正常組織，這與其惡性程度及治療抵抗、不良預(yù)后相關(guān)。

Belkaid等［16］發(fā)現(xiàn)U87膠質(zhì)瘤細(xì)胞高表達(dá)葡萄糖-6-磷酸脫氫酶（G6PT）mRNA，后者在膠質(zhì)瘤細(xì)胞中可以使葡萄糖在非糖異生組織如腦組織中分解代謝，并調(diào)控細(xì)胞內(nèi)信號(hào)通路以及侵襲性腫瘤細(xì)胞的表型。綠原酸可抑制G6PT活性，阻礙細(xì)胞糖酵解途徑，使細(xì)胞內(nèi)ATP水平降低，降低MMP-2分泌，從而抑制腫瘤生長(zhǎng)、侵襲［17］。此外，綠原酸可通過(guò)MT1-MMP/G6PT信號(hào)軸抑制S-1-P介導(dǎo)的ERK途徑磷酸化［18］，而1-磷脂-神經(jīng)鞘氨醇（1-phospholipid-sphin?gosine，S-1-P）可以有效促進(jìn)GBM細(xì)胞分裂，并通過(guò)動(dòng)員細(xì)胞內(nèi)鈣離子誘導(dǎo)細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)蛋白磷酸化，引起細(xì)胞侵襲和轉(zhuǎn)移。綜上，抑制G6PT可以有效地影響腫瘤細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移能力，尤其對(duì)于高表達(dá)G6PT mRNA的惡性腫瘤。作為腫瘤細(xì)胞信號(hào)通路研究中的新角色，G6PT在腫瘤發(fā)生發(fā)展過(guò)程中的地位以及綠原酸抗膠質(zhì)瘤細(xì)胞的具體作用機(jī)制仍值得深入研究。

1.4 抑制腫瘤血管再生

血管生成是腫瘤發(fā)展過(guò)程中的關(guān)鍵，腫瘤缺氧微環(huán)境可經(jīng)促血管生成因子誘導(dǎo)血管再生，其中缺氧誘導(dǎo)因子-1α（hypoxia-inducible factor-1α，HIF-1α）在缺氧細(xì)胞的應(yīng)答中起重要作用［19］，涉及腫瘤血管生成過(guò)程中許多基因的轉(zhuǎn)錄激活。研究表明，綠原酸在低氧條件下可抑制HIF-1α蛋白的表達(dá)和功能活性，并有效抑制下游血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（vascu?lar endothelial growth factor，VEGF）表達(dá)及其介導(dǎo)的蛋白激酶（AKT）磷酸化過(guò)程，從而影響內(nèi)皮細(xì)胞遷移管樣結(jié)構(gòu)形成等，最終抑制血管生成。由此可見(jiàn)，綠原酸可以通過(guò)下調(diào)HIF-1α/AKT途徑抑制低氧環(huán)境誘導(dǎo)的血管生成［20］，抑制腫瘤增殖。

近年來(lái)，綠原酸及其抗腫瘤分子機(jī)制得到了廣泛而深入的研究，除上述在膠質(zhì)瘤細(xì)胞中的作用外，對(duì)于其他腫瘤的相關(guān)作用機(jī)制研究也多有報(bào)道。如綠原酸在白血病細(xì)胞中可以通過(guò)線粒體膜電位改變、氧自由基（ROS）的產(chǎn)生、Caspase誘導(dǎo)活化促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡［21］；近期研究發(fā)現(xiàn)綠原酸可干擾人乳腺癌MCF-7細(xì)胞周期，阻滯G1期腫瘤細(xì)胞并減少S期細(xì)胞數(shù)，其抗腫瘤作用呈劑量依賴(lài)性，IC50值為（52.5±4.72）μg/mL［22］；此外，綠原酸可介導(dǎo)甲基化沉默基因啟動(dòng)子中的CpG島去甲基化，從而恢復(fù)腫瘤細(xì)胞中沉默的抑癌基因，表現(xiàn)出抑制DNA甲基化，影響腫瘤細(xì)胞表觀遺傳學(xué)的作用［23］。

綜上所述，綠原酸抗腫瘤機(jī)制不同于傳統(tǒng)化療或靶向等藥物，包括抗氧化應(yīng)激、影響腫瘤細(xì)胞的侵襲和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移能力、調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)、干擾細(xì)胞周期、抑制血管生成等多重作用，故其交叉耐藥可能性低，且有望在臨床應(yīng)用中實(shí)現(xiàn)逆轉(zhuǎn)現(xiàn)有抗腫瘤藥物的多重耐藥性［24］。

2 與傳統(tǒng)化療協(xié)同作用

由于腫瘤分子病因機(jī)制的復(fù)雜性，新型化療藥物及多種藥物聯(lián)合方案仍無(wú)法有效改善化療過(guò)程中腫瘤對(duì)藥物的耐受性，從而導(dǎo)致治療失敗甚至患者死亡，故如何干預(yù)、改善腫瘤耐藥方式是腫瘤治療領(lǐng)域的熱點(diǎn)及重點(diǎn)。

在宮頸癌A431細(xì)胞系中，一定濃度的綠原酸可增加順鉑及奧沙利鉑的活性，從而實(shí)現(xiàn)協(xié)同抗腫瘤作用，經(jīng)高效液相色譜法分析表明綠原酸在一定濃度時(shí)可與順鉑及奧沙利鉑形成更有活性的化合物［25］；MMTV-PyVT自發(fā)乳腺癌小鼠實(shí)驗(yàn)中，拉帕替尼與綠原酸合用有效抑制了乳腺癌的肺轉(zhuǎn)移，這可能與抑制M2型巨噬細(xì)胞極化相關(guān)［26］。近期研究表明，綠原酸可以增強(qiáng)5-氟尿嘧啶（5-fluorouracil，5-FU）誘導(dǎo)的肝癌細(xì)胞增殖抑制，綠原酸和5-FU的協(xié)同作用可能是由于綠原酸誘導(dǎo)的ROS過(guò)量產(chǎn)生而使ERK失活［27］，表明綠原酸在肝癌細(xì)胞中是5-FU化學(xué)療法的潛在化學(xué)增敏劑。

由此可見(jiàn)，在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中綠原酸對(duì)多種傳統(tǒng)化療藥物均有協(xié)同作用，聯(lián)合用藥可通過(guò)調(diào)節(jié)信號(hào)通路、參與免疫調(diào)節(jié)等多種途徑提高抑瘤率，降低腫瘤耐藥機(jī)制，改善現(xiàn)有藥物的治療效果。此外，綠原酸應(yīng)用于人體或動(dòng)物實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ椭猩形窗l(fā)現(xiàn)嚴(yán)重不良反應(yīng)，安全性較高，這些特點(diǎn)均為目前臨床治療提供了有利條件，值得深入研究其抗腫瘤價(jià)值。

3 綠原酸在人體內(nèi)代謝的相關(guān)研究

藥物在人體內(nèi)代謝及藥效動(dòng)力學(xué)的研究對(duì)于最大限度發(fā)揮藥物效果起著重要作用，已有學(xué)者進(jìn)行了綠原酸以不同給藥方式在人體內(nèi)代謝的相關(guān)探索。

人體實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ捅砻鳎诜G原酸約三分之一在小腸中以原型被吸收，其余進(jìn)入大腸經(jīng)微生物代謝分解后吸收［28］，而腸道微生物群落會(huì)影響其生物利用度［29］。近期，北京世紀(jì)壇醫(yī)院正在進(jìn)行綠原酸肌肉注射劑安全性、耐受性和藥物代謝動(dòng)力學(xué)特征研究的Ⅰ期臨床試驗(yàn)，Ren等［30］分析受試者尿液標(biāo)本中含有6種代謝物，其中以未代謝的綠原酸及3'-甲基-5-CQA（M3）和4'-甲基-5-CQA（M4）為主，通過(guò)反向分子對(duì)接分析M3、M4及綠原酸共同作用于RAC絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶和DNA復(fù)制，且三者均與惡性膠質(zhì)瘤相關(guān)的不同靶點(diǎn)存在相互作用，雖然其具體作用機(jī)制尚待明確，但該研究首次闡明了綠原酸代謝產(chǎn)物在治療惡性膠質(zhì)瘤中可能存在活性，有助于進(jìn)行針對(duì)性研究并促進(jìn)綠原酸在治療惡性膠質(zhì)瘤領(lǐng)域的應(yīng)用。

4 結(jié)語(yǔ)

膠質(zhì)瘤是原發(fā)于中樞神經(jīng)系統(tǒng)的腫瘤，其中膠質(zhì)母細(xì)胞瘤患者的生存期很短，預(yù)后極差，同時(shí)其發(fā)生、發(fā)展機(jī)制十分復(fù)雜，傳統(tǒng)的臨床治療手段局限且效果欠佳，患者的生存期及生存質(zhì)量并不理想。近年來(lái)，植物提取物綠原酸作為新型抗腫瘤藥物受到廣泛關(guān)注，其抗腫瘤分子機(jī)制多樣，可通過(guò)多種通路及途徑實(shí)現(xiàn)，且對(duì)于乳腺癌、結(jié)腸癌等多系統(tǒng)腫瘤有效，作用范圍廣泛。雖然已有文獻(xiàn)報(bào)道綠原酸影響腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞的增殖和轉(zhuǎn)移、調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)、協(xié)同傳統(tǒng)化療改善療效等作用，但是目前對(duì)于綠原酸抗腦膠質(zhì)瘤的具體作用機(jī)制、聯(lián)合用藥方式及劑量、體內(nèi)藥物代謝等方面的研究尚不成熟，難以用于臨床給藥，故深入研究綠原酸對(duì)于膠質(zhì)瘤細(xì)胞作用的分子機(jī)制對(duì)于尋找新的抗腫瘤作用靶點(diǎn)、探索藥物臨床新用途，進(jìn)而開(kāi)發(fā)利用綠原酸具有重要科學(xué)及臨床意義。

[1]Dolecek TA,Propp JM,Stroup NE,et al.CBTRUS statistical report:primary brain and central nervous system tumors diagnosed in the United States in 2005‐2009[J].Neuro Oncol,2013,15(5):646‐647.

[2]Jiang T,Mao Y,Ma W,et al.CGCG clinical practice guidelines for the management of adult diffuse gliomas[J].Cancer Lett,2016,375(2):263‐273.

[3]Strickland M,Stoll EA.Metabolic Reprogramming in Glioma[J].Front Cell Dev Biol,2017,26(5):43.

[4]Lara‐Velazquez M,Al‐Kharboosh R,Jeanneret S,et al.Advances in Brain Tumor Surgery for Glioblastoma in Adults[J].Brain Sci,2017,7(12):166

[5]Wang F,Shang Z,Xu L,et al.Profiling and identification of chloro‐genic acid metabolites in rats by ultra‐high‐performance liquid chromatography coupled with linear ion trap‐Orbitrap mass spec‐trometer[J].Xenobiotica,2017,4:1‐13.

[6]Naveed M,Hejazi V,Abbas M,et al.Chlorogenic acid(CGA):A phar‐macological review and call for further research[J].Biomed Phar‐macother,2018,97:67‐74.

[7]席利莎,木泰華,孫紅男.綠原酸類(lèi)物質(zhì)的國(guó)內(nèi)外研究進(jìn)展[J].核農(nóng)學(xué)報(bào),2014,28(2):292‐301.

[8]Kang TY,Yang HR,Zhang J,et al.Corrigendum to"The Studies of Chlorogenic Acid Antitumor Mechanism by Gene Chip Detection:The Immune Pathway Gene Expression"[J].J Anal Methods Chem,2015,2015:538539.

[9]S?rensen MD,Dahlrot RH,Boldt HB,et al.Tumor‐associated mi‐croglia/macrophages predict poor prognosis in high‐grade gliomas and correlate with an aggressive tumor subtype[J].Neuropathol Appl Neurobiol,2018,44(2):185‐206.

[10]Zhang M,Hutter G,Kahn SA,et al.Anti‐CD47 Treatment Stimulates Phagocytosis of Glioblastoma by M1 and M2 Polarized Macro‐phages and Promotes M1 Polarized Macrophages In Vivo[J].PloS one,2016,11(4):e0153550.

[11]Dai F,Yu N,Che G,et al.The M1 form of tumor‐associated macro‐phages in non‐small cell lung cancer is positively associated with survival time[J].BMC Cancer,2010,10(1):112.

[12]Xue N,Zhou Q,Ji M,et al.Chlorogenic acid inhibits glioblastoma growth through repolarizating macrophage from M2 to M1 pheno‐type[J].Sci Rep,2017,3(7):39011.

[13]Zheng H,Ying H,Yan H,et al.p53 and Pten control neural and glio‐ma stem/progenitor cell renewal and differentiation[J].Nature,2008,455(7216):1129‐1133.

[14]Beyfuss K,Hood DA.A systematic review of p53 regulation of oxida‐tive stress in skeletal muscle[J].Redox Rep,2018,23(1):100‐117.

[15]Sitarek P,Ska?a E,Toma M,et al.A preliminary study of apoptosis in‐duction in glioma cells via alteration of the Bax/Bcl‐2‐p53 axis by transformed and non‐transformed root extracts of Leonurus sibiri‐cus L[J].Tumor Biol,2016,37(7):8753‐8764.

[16]Belkaid A,Copland IB,Massillon D,et al.Silencing of the human mi‐crosomal glucose‐6‐phosphate translocase induces glioma cell death:Potential new anticancer target for curcumin[J].FEBS Lett,2006,580(15):3746‐3752.

[17]Abbadi S,Rodarte JJ,Abutaleb A,et al.Glucose‐6‐phosphatase is a key metabolic regulator of glioblastoma invasion[J].Mol Cancer Res,2014,12(11):1547‐1559.

[18]Fortier S,Labelle D,Sina A,et al.Silencing of the MT1‐MMP/G6PT axis suppresses calcium mobilization by sphingosine‐1‐phosphate in glioblastoma cells.[J].FEBS Lett,2008,582(5):799‐804.

[19]Thirusangu P,Vigneshwaran V,Ranganatha VL,et al.A tumoural an‐giogenic gateway blocker,Benzophenone‐1B represses the HIF‐1α nuclear translocation and its target gene activation against neoplas‐tic progression[J].Biochem Pharmacol,2016,125:26‐40.

[20]Park JJ,Hwang SJ,Park JH,et al.Chlorogenic acid inhibits hypoxia‐induced angiogenesis via down‐regulation of the HIF‐1α/AKT path‐way[J].Cell Oncol,2015,38(2):111‐118.

[21]Yang JS,Liu CW,Ma YS,et al.Chlorogenic acid induces apoptotic cell death in U937 leukemia cells through caspase‐and mitochon‐dria‐dependent pathways[J].In Vivo,2012,26(6):971‐978.

[22]Deka SJ,Gorai S,Manna D,et al.Evidence of PKC Binding and Trans‐location to explain the anticancer mechanism of chlorogenic acid in breast cancer cells[J].Curr Mol Med,2017,17(1):79‐89.

[23]Lewandowska H,Kalinowska M,Lewandowski W,et al.The role of natural polyphenols in cell signaling and cytoprotection against cancer development[J].J Nutr Biochem,2016,32:1‐19.

[24]Sertel S,Eichhorn T,Sieber S,et al.Factors determining sensitivity or resistance of tumor cell lines towards artesunate[J].Chem Biol Interact,2010,185(1):42‐52.

[25]Catanzaro D,Filippini R,Vianello C,et al.Chlorogenic Acid Interac‐tion with Cisplatin and Oxaliplatin:Studies in Cervical Carcinoma Cells[J].Nat Prod Commun,2016,11(4):499‐502.

[26]Zhang JQ,Yao ZT,Liang GK,et al.Combination of lapatinib with chlorogenic acid inhibits breast cancer metastasis by suppressing macrophage M2 polarization[J].Zhejiang Da Xue Xue Bao Yi Xue Ban,2015,44(5):493‐499.

[27]Yan Y,Li J,Han J,et al.Chlorogenic acid enhances the effects of 5‐fluorouracil in human hepatocellular carcinoma cells through the inhibition of extracellular signal‐regulated kinases[J].Anticancer Drugs,2015,26(5):540‐546.

[28]Stalmach A,Mullen W,Barron D,et al.Metabolite profiling of hy‐droxycinnamate derivatives in plasma and urine after the ingestion of coffee by humans:identification of biomarkers of coffee con‐sumption[J].Drug Metab Dispos,2009,37(8):1749‐1758.

[29]Renouf M,Marmet C,Giuffrida F,et al.Dose‐response plasma ap‐pearance of coffee chlorogenic and phenolic acids in adults[J].Mol Nutr Food Res,2014,58(2):301‐309.

[30]Ren T,Wang Y,Wang C,et al.Isolation and identification of human metabolites from a novel anti‐tumor candidate drug 5‐chlorogenic acid injection by HPLC‐HRMS/MSn and HPLC‐SPE‐NMR[J].Anal Bio‐anal Chem,2017,409(30):7035‐7048.