益生菌通過刺激特異性或非特異性免疫功能,分泌抗菌類物質(zhì),競爭性抑制其他病原菌的定植或增殖,產(chǎn)生各種消化酶幫助消化吸收,從而參與調(diào)解胃腸道菌群平衡,促進(jìn)動(dòng)物生長和提高飼料轉(zhuǎn)化率。目前,益生菌被認(rèn)為是最具潛力替代抗生素的產(chǎn)品。
不同種屬或同一種屬不同菌株的益生菌,其生理特性(生長快慢、生長環(huán)境、代謝產(chǎn)物等)和功效性等均存在較大差異,因此仍需要進(jìn)行綜合性評(píng)估。芽孢桿菌是一類重要的益生菌,相對(duì)于其他類型益生菌(如乳酸菌),芽孢桿菌一般對(duì)營養(yǎng)要求簡單,代謝速度快,而且易于分離、培養(yǎng)和保藏,對(duì)工業(yè)化生產(chǎn)技術(shù)條件要求不苛刻。此外,芽孢桿菌產(chǎn)生的芽孢對(duì)熱、紫外線、電離輻射和低pH(2~3)等不良環(huán)境有極強(qiáng)的抵抗能力。因此,芽孢桿菌類益生菌劑易于保存,使用方便,活性成分高,有很大的推廣和應(yīng)用價(jià)值。
活菌數(shù)量 有些益生菌產(chǎn)品存在不標(biāo)明菌種和組成成分、任意擴(kuò)大和渲染益生菌的作用和用途、實(shí)際活菌數(shù)值遠(yuǎn)低于標(biāo)示值等問題。
胃腸道耐受性 動(dòng)物攝入益生菌后,菌株抵抗胃酸、膽汁酸鹽和消化酶的能力,確定是否有足夠的活菌抵達(dá)腸道并發(fā)揮作用。
耐溫性 益生菌如需經(jīng)過飼料高溫制粒,則需進(jìn)行耐溫性評(píng)價(jià),確保菌株可以抵抗制粒過程中高溫、高壓、高濕的作用,保證有效活菌數(shù)。
抑菌性 當(dāng)微生物處于穩(wěn)定期時(shí),菌體分泌大量次級(jí)代謝產(chǎn)物,如各種抑菌物質(zhì)、色素、激素等;因此必須先進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)至穩(wěn)定期,才能測(cè)定菌株是否具有抑菌性。
抗生素兼容性 無論是臨床治療使用抗生素,還是飼料中添加功能性抗生素,都需要考慮對(duì)益生菌是否存在抑菌性;如兩者不兼容,則需選擇兼容的抗生素進(jìn)行生產(chǎn)。
產(chǎn)酸產(chǎn)酶 益生菌在生長過程中能代謝出各種有機(jī)酸和水解酶,直接或間接對(duì)動(dòng)物機(jī)體發(fā)揮益生作用;不同菌株特性不同,代謝產(chǎn)物也不同,仍需注意測(cè)試。
1.所有微生物實(shí)驗(yàn)必須進(jìn)行嚴(yán)格的無菌操作和避免操作過程中的交叉污染。
2.不同菌種對(duì)營養(yǎng)成分和培養(yǎng)條件的要求不同,活菌計(jì)數(shù)時(shí)要根據(jù)菌種類別選擇合適的培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件。耐溫性主要針對(duì)飼料制粒過程,試驗(yàn)時(shí)應(yīng)考慮制粒過程中的高溫高壓高濕等抗性因素。由于益生菌只有達(dá)到生長周期中的穩(wěn)定期時(shí),才開始分泌次級(jí)代謝產(chǎn)物,因此,評(píng)估益生菌抑菌性時(shí),一定要根據(jù)菌種特性先進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)(至少培養(yǎng)過夜),待菌種分泌抑菌物質(zhì)后再進(jìn)行測(cè)定(復(fù)合益生菌產(chǎn)品,要根據(jù)不同菌種的特性分別進(jìn)行培養(yǎng),如是否需氧、培養(yǎng)溫度、培養(yǎng)基成分等)。
3.各項(xiàng)指標(biāo)都最好的菌株是不存在的,但可以通過綜合評(píng)估,選出綜合性能最好的產(chǎn)品。