寧雪松
(阜新縣畜牧獸醫(yī)局務(wù)歡池動物衛(wèi)生監(jiān)督所,遼寧 阜新 123107)
博卡病毒為細(xì)小病毒亞科的博卡病毒屬,細(xì)小病毒分為濃病毒亞科和細(xì)小病毒科亞科,濃病毒亞科主要感染昆蟲,細(xì)小病毒科亞科主要感染脊椎動物。細(xì)小病毒亞科又分為貂阿留申病毒屬、細(xì)小病毒屬、紅病毒屬、博卡病毒屬和依賴病毒屬等。博卡病毒是無囊膜單股線狀DNA病毒,全基因5.2kb,病毒直徑為25~30納米。博卡病毒包括牛細(xì)小病毒、大猩猩博卡病毒、犬極細(xì)小病毒、豬博卡病毒和人博卡病毒1~4型等。目前,已成功分離的豬博卡病毒有5個基因型——豬博卡病毒1~5型,都含有2個主要的開放式閱讀框,編碼非結(jié)構(gòu)蛋白和衣殼蛋白。博卡病毒最早在2009年在患斷奶仔豬多系統(tǒng)衰竭綜合征病豬的淋巴結(jié)中檢出,同年豬博卡病毒在我國養(yǎng)殖場被檢出。博卡病毒在豬的不同組織中檢出率不同,即使在無臨床癥狀的豬組織中也可檢出,博卡病毒與圓環(huán)病毒?;旌细腥?。豬博卡病毒的致病機(jī)理及致病性尚不清楚,病理變化也不明確,關(guān)于感染后的癥狀表現(xiàn)等臨床報道較少,檢出豬博卡病毒的病豬有明顯的呼吸癥狀及肺損傷。
華中農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院收集2013~2015年間,來自河南、湖北、河北、廣東和福建的屠宰場或養(yǎng)殖場的樣本,用P C R檢測博卡病毒的帶毒情況且分析流行特點(diǎn)。結(jié)果表明,博卡病毒在我國養(yǎng)殖場和屠宰場廣泛分布,總流行率37.92%;在不同樣本類型中,糞便檢出率最髙(59.62%)、血清36.59%、腸系膜淋巴結(jié)36%、淋巴結(jié)最低僅為2.94%。中國動物衛(wèi)生與流行病學(xué)中心等單位從屠宰場采集豬扁桃體、淋巴結(jié)和脾臟等組織,采用套式PCR分別檢測博卡病毒1型和2型,28份樣品中有2份樣品為陽性,且均為豬博卡病毒2型感染。上海市動物疫病預(yù)防控制中心利用實(shí)時熒光定量P C R檢測,采集于上海規(guī)模養(yǎng)殖場的1800份豬血清、豬糞便、豬鼻棉拭及高熱病死豬內(nèi)臟,陽性率分別為24%、30%、0%和67%。6份博卡病毒陽性病料進(jìn)行與豬繁殖呼吸綜合征病毒、豬圓環(huán)病毒2型、豬偽狂犬病毒、豬細(xì)小病毒檢測,陽性率分別為83%、100%、0%和0%,表明博卡病毒感染在上海普遍存在,豬內(nèi)臟中檢出率較高,春秋高發(fā),并與豬繁殖呼吸綜合征病毒、豬圓環(huán)病毒2型混合感染。
目前,豬博卡病毒的檢測方法主要有病毒細(xì)胞培養(yǎng)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)、間接免疫熒光技術(shù)、聚合酶鏈反應(yīng)和反轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)。四川農(nóng)業(yè)大學(xué)動物生物技術(shù)中心根據(jù)GenBank發(fā)布的博卡病毒的不同基因型序列,分別設(shè)計豬博卡病毒1~5型的PCR引物,在分別建立單一PCR基礎(chǔ)上,通過對兩組引物的比例、退火溫度等條件的優(yōu)化,建立同時檢測豬博卡病毒1型/2型和豬博卡病毒3型/4型/5型的雙重PCR法。