李 青,徐瑞麗,李麗君,梁 軍,袁 曉

(廣電計(jì)量檢測(cè)(湖南)有限公司，湖南 長(zhǎng)沙 410205)

三氯吡氧乙酸，英文通用名稱：Trichlopyr ，CAS號(hào)：55335-06-3，化學(xué)名稱：[(3,5,6-三氯-2-吡啶)氧基]乙酸。屬內(nèi)吸傳導(dǎo)型苗后莖葉處理除草劑，施藥后很快被雜草吸收，并傳導(dǎo)到全株各部位，敏感雜草受藥2～3 d內(nèi)頂端萎蔫，出現(xiàn)典型激素類除草劑反應(yīng)，植物畸形、扭曲，最后死亡。其主要用于防除冬小麥、玉米田間等的一年生闊葉雜草，如豬殃殃、馬齒莧、龍葵、水花生等對(duì)作物有好安全性。近年來(lái)關(guān)于氯氟吡氧乙酸的文獻(xiàn)報(bào)道很少，多為氯氟吡氧乙酸類在病蟲(chóng)害防治方面的使用安全、農(nóng)藥殘留以及環(huán)境中降解等方面的研究[1-6]，未見(jiàn)使用反相高效液相色譜法進(jìn)行含量測(cè)定分析相關(guān)報(bào)道。本文采用C18固相萃取柱對(duì)地表水進(jìn)行凈化，使用C18反相柱和紫外可變波長(zhǎng)檢測(cè)器，對(duì)地表水中三氯吡氧乙酸進(jìn)行定量分析，得到良好結(jié)果。該方法具有操作簡(jiǎn)單、準(zhǔn)確度高、重現(xiàn)性好特點(diǎn)，能為三氟吡氧乙酸的生產(chǎn)質(zhì)量控制和分析方法提供參考。

1 材料與方法

1.1 試劑與儀器

甲醇 ：色譜純；超純水：電阻率：18.25MΩ·cm；冰醋酸：分析純；C18固相萃取柱；三氯吡氧乙酸標(biāo)準(zhǔn)品：99.0%，Dr. Ehrenstorfer Gmbh。

Agilent 1260型高效液相色譜儀，帶二極管陣列檢測(cè)器(DAD)；Agilent色譜工作站；固相萃取儀；電子天平：BD324，準(zhǔn)確至0.1mg。

1.2 色譜條件

色譜柱：ZORBAX SB-C18，4.6×250mm×5μm；流動(dòng)相：V(甲醇): V(水(含0.5%冰乙酸))=80:20；流速：1.0mL/min；檢測(cè)波長(zhǎng)：291nm；柱溫：25℃；進(jìn)樣量：5μL。

1.3 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制

準(zhǔn)確稱取0.0100g三氯吡氧乙酸標(biāo)準(zhǔn)品于10mL容量瓶中，用甲醇溶解定容，得到三氯吡氧乙酸標(biāo)準(zhǔn)品濃度為1000μg/mL的儲(chǔ)備液，搖勻備用。稀釋1000μg/mL的儲(chǔ)備液為以下濃度：10、20、50、100和200μg/mL；搖勻作為標(biāo)準(zhǔn)溶液。

1.4 樣品處理

水樣分別取自郊區(qū)池塘、水渠、小溪。準(zhǔn)確量取20mL水樣，用冰醋酸調(diào)節(jié)pH，渾濁水樣經(jīng)高速離心機(jī)4000轉(zhuǎn)/min離心5min，取澄清水至活化后的C18小柱，真空泵抽干，用5mL甲醇洗脫，收集洗脫液至40℃水浴氮吹儀上氮吹干，用流動(dòng)相溶解殘留物并定容至1mL，過(guò)0.22μm有機(jī)濾膜,按1.2中的色譜條件測(cè)定。

2 結(jié)果與討論

2.1 流動(dòng)相的優(yōu)化

色譜柱及流動(dòng)相的選擇是決定液相色譜分離效果的關(guān)鍵。以體積比為80∶20的甲醇-水為流動(dòng)相，是因?yàn)榉蛛x色譜柱的固定相為ZORBAX SB-C18，在用洗脫能力較強(qiáng)的甲醇比例高于80%作流動(dòng)相時(shí)，三氯吡氧乙酸出峰時(shí)間過(guò)快；而甲醇比例低于80%作流動(dòng)相時(shí)，三氯吡氧乙酸保留時(shí)間延長(zhǎng)且峰型變寬。用體積比為80∶20的甲醇-水且加入0.5%冰乙酸為流動(dòng)相時(shí)，此時(shí)的色譜峰峰型對(duì)稱，基線平穩(wěn)，在最優(yōu)流動(dòng)相條件下測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)品色譜圖如圖1所示。

圖1 三氯吡氧乙酸標(biāo)品圖譜

2.2 檢測(cè)波長(zhǎng)的確定

使用紫外可見(jiàn)分光光度儀對(duì)氯氟吡氧乙酸異辛酯的標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行200～400 nm的全波長(zhǎng)掃描，得到如圖2的紫外圖譜。吸收波長(zhǎng)在201、231、291 nm都出現(xiàn)吸收峰，但是在波長(zhǎng)201、231nm處，線性范圍窄，而且有干擾峰，不適合常量分析。291 nm為三氯吡氧乙酸的第3個(gè)吸收峰，在該波長(zhǎng)下三氯吡氧乙酸吸收值適中，線性范圍寬，可以滿足定量分析的要求。

圖2 紫外圖譜

2.3 提取和凈化條件的優(yōu)化

鑒于三氯吡氧乙酸顯弱酸性及相關(guān)文獻(xiàn)研究[7-9]，故考慮在提取溶劑中添加適量酸，以提高目標(biāo)物的回收率。分別取5、10、15、20、30、50mL水樣進(jìn)行C18柱固相萃取，發(fā)現(xiàn)取樣量過(guò)少時(shí)C18柱富集量不夠而達(dá)不到檢出限，取樣量過(guò)多時(shí)C18柱會(huì)吸附雜質(zhì)而產(chǎn)生干擾，通過(guò)對(duì)各取樣量回收率的比較，取20mL水樣進(jìn)行凈化時(shí)回收率能在80%以上，達(dá)到地表水中三氯吡氧乙酸測(cè)定的實(shí)驗(yàn)要求。

2.4 方法的線性關(guān)系

配制5個(gè)不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液，在最優(yōu)的色譜條件下進(jìn)行色譜分析，峰面積(y)與濃度(x)之間表現(xiàn)出良好的線性，得到線性方程為y=3.6951x+7.8549，相關(guān)系數(shù)為：0.9996。結(jié)果表明三氯吡氧乙酸在2～600μg/mL范圍內(nèi)，最低檢測(cè)限為0.01mg·L-1,質(zhì)量濃度和峰面積呈良好的線性相關(guān)性。具體數(shù)據(jù)見(jiàn)表1。

表1 三氯吡氧乙酸標(biāo)準(zhǔn)品的濃度與峰面積

通過(guò)對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理得到如下圖3所示圖譜：

圖3 校正曲線

2.5 精密度試驗(yàn)

用空白水樣配制5個(gè)同一濃度的樣品。在相同的色譜操作條件下測(cè)定其濃度值，計(jì)算三氯吡氧乙酸的平均值和相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差，結(jié)果見(jiàn)表2。該方法的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.13%，表明本方法可行。

表2 三氯吡氧乙酸精密度測(cè)定結(jié)果

2.6 準(zhǔn)確度試驗(yàn)

評(píng)價(jià)該方法的準(zhǔn)確度，可采用添加回收率試驗(yàn)，即在已知被測(cè)組分含量的樣品中精確加入一定量的被測(cè)組分標(biāo)準(zhǔn)品，再進(jìn)行測(cè)定，計(jì)算回收率。取池塘水、水渠水、小溪水各三份，每一份水樣中加入三個(gè)不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液，按1.4的處理過(guò)程進(jìn)行樣品前處理，對(duì)處理后的每個(gè)樣品重復(fù)測(cè)定3次，測(cè)得的回收率和相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差見(jiàn)表3。從表3中所示數(shù)據(jù)可知，本方法的回收率在82%～105%之間，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差在4.0%～5.3%之間，數(shù)據(jù)表明本方法的回收率能夠滿足地表水中三氯吡氧乙酸殘留量的測(cè)定要求。

表3 三氯吡氧乙酸回收率測(cè)定結(jié)果

3 結(jié)論

本文建立了固相萃取-高效液相色譜測(cè)定地表水中三氯吡氧乙酸殘留量的分析方法。通過(guò)C18固相萃取柱對(duì)地表水進(jìn)行凈化和富集，避免大量使用有機(jī)溶劑的同時(shí)加快了檢測(cè)進(jìn)程。隨著液相色譜儀和色譜柱的發(fā)展，高效液相色譜法已成為當(dāng)今農(nóng)藥產(chǎn)品質(zhì)量檢測(cè)、環(huán)境污染監(jiān)測(cè)以及農(nóng)藥殘留研究的重要手段。本文提出高效液相色譜分析方法簡(jiǎn)單快速、實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確可靠，為地表水中三氯吡氧乙酸殘留量的測(cè)定提供了良好的檢測(cè)手段。

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