符啟位+王爽+肖春雷+劉勇+李秋潔+羅豐+韓曉燕+孔祥義
摘 要:通過對(duì)48份不同西瓜品種開展苗期細(xì)菌性果斑病的抗性鑒定,探明不同西瓜品種對(duì)細(xì)菌性果斑病的抗病性差異,通過室內(nèi)人工噴霧接種法,篩選出了黑麗人、領(lǐng)秀一號(hào)等29份為中抗品種,農(nóng)人西瓜5號(hào)、抗裂花紅玉等12個(gè)為中感品種,鄂西瓜、精選華蜜冠龍等7個(gè)為感病品種,沒有高抗和免疫材料。
關(guān)鍵詞:西瓜;細(xì)菌性果斑?。豢剐澡b定
中圖分類號(hào):S651 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A 文章編號(hào):1001-3547(2017)22-0076-04
西瓜[Citrullus lanatus(Thunb.) Matsum. et Nakai],葫蘆科,一年生蔓生藤本植物,全國(guó)各地均有栽培。西瓜是世界農(nóng)業(yè)中的重要水果作物,播種面積和產(chǎn)量在十大水果中居第4位。中國(guó)是世界西瓜生產(chǎn)大國(guó),西瓜種植面積占世界總面積的 60%以上,產(chǎn)量占 70%以上[1]。近年來,隨著西瓜種植面積的不斷擴(kuò)大,以及氣候的變化,病害的發(fā)生日益嚴(yán)重。細(xì)菌性果斑病是西(甜)瓜生產(chǎn)上的一種毀滅性病害,可以侵染多種葫蘆科作物,如西瓜、甜瓜、南瓜、黃瓜等,自報(bào)道以來已在美國(guó)、澳大利亞、巴西、土耳其、日本、泰國(guó)、以色列、伊朗、匈牙利、希臘和我國(guó)多個(gè)省份發(fā)生,給當(dāng)?shù)氐奈魈鸸戏N植業(yè)造成了嚴(yán)重的損失[2]。細(xì)菌性果斑病的病原菌為西瓜嗜酸菌(Acidovorax citrulli)[3],屬國(guó)際檢疫性有害生物之一,其發(fā)生會(huì)導(dǎo)致種植的西瓜生產(chǎn)經(jīng)濟(jì)效益嚴(yán)重下降。為減輕該病害的為害,選育抗病品種是防治瓜類細(xì)菌性果斑病比較理想的方法之一。本試驗(yàn)通過室內(nèi)人工噴霧接種法對(duì) 48 份不同西瓜品種進(jìn)行苗期細(xì)菌性果斑病抗病性評(píng)價(jià),以期為今后選育抗病性品種提供參考依據(jù)。
1 材料與方法
1.1 試驗(yàn)材料
①供試病原菌菌株 果斑病病原菌分離自海南省陵水縣西瓜發(fā)病植株,編號(hào)為L(zhǎng)SGB。
②供試西瓜品種 供試 48 個(gè)西瓜品種主要來自于新疆農(nóng)人種子科技有限公司、武漢慶發(fā)禾盛農(nóng)業(yè)發(fā)展有限公司、湖南博達(dá)隆科技發(fā)展有限公司等15家公司和單位。品種類型為大果有籽,中果有籽和小果有籽3種類型(表1)。
1.2 試驗(yàn)方法
①幼苗栽培 試驗(yàn)開展于2017年3月。選取各個(gè)供試品種飽滿的種子進(jìn)行催芽播種,用福爾馬林100倍液浸種90 min,浸種完成后,用清水沖洗干凈,在培養(yǎng)皿底部墊上濾紙保濕,放入28℃恒溫培養(yǎng)箱下進(jìn)行催芽。選用54孔育苗穴盤和經(jīng)過消毒后的無土育苗基質(zhì)進(jìn)行播種育苗,每個(gè)品種播種 54 粒,播種前澆水浸透,將發(fā)芽好的種子播入育苗穴盤中,每穴播種1粒種子,播種后放入大棚內(nèi)正常管理,待幼苗生長(zhǎng)至第四片真葉時(shí)進(jìn)行接種。
②接種方法 將LSGB病原菌在LB固體培養(yǎng)基上活化,28℃培養(yǎng) 48 h后挑取單菌落接種于LB液體培養(yǎng)基中,28℃,200 r/min 進(jìn)行搖培,將菌液濃度調(diào)至1×108 CFU/mL,待第4片真葉完全展開后,采取室內(nèi)人工噴霧法進(jìn)行接種,每個(gè)品種接種54株,接種后套袋保濕48 h,以不接種作為對(duì)照,7 d 后病情穩(wěn)定調(diào)查葉片的發(fā)病情況,每株調(diào)查上、中、下三片葉,按0級(jí)、1級(jí)、3級(jí)、5級(jí)、7級(jí)、9級(jí)分級(jí)記錄。
葉片發(fā)病情況分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)如下[4],0 級(jí):無?。? 級(jí):葉片病斑較少,病斑面積占整片葉面積的5%以下;3 級(jí):病斑較多,病斑面積占整個(gè)面積的5%~30%;5 級(jí):病斑較多,病斑面積占整個(gè)面積的30%~50%;7 級(jí):病斑很多或融合成大斑,病斑面積占整個(gè)面積的50%以上,葉片未焦枯死亡;9 級(jí):病斑很多或融合成大斑,病斑面積占整個(gè)面積的50%以上,常使葉片焦枯死亡。
按加權(quán)平均法計(jì)算病情指數(shù),具體公式如下: 病情指數(shù)=×100。
抗病性劃分標(biāo)準(zhǔn)如下[5]:采用相對(duì)抗病性方法評(píng)價(jià)其抗病程度,抗病程度分為免疫(I)、高抗(HR)、中抗(MR)、中感(MS)和感?。⊿)5類,相對(duì)抗病指數(shù)分別為1.00、0.80~0.99、0.40~0.79、0.20~0.39和0.20以下。
其中,相對(duì)抗病指數(shù)=1-相對(duì)病情指數(shù)。相對(duì)病情指數(shù)=鑒定品種病情指數(shù)/對(duì)照品種病情指數(shù)(其中,病情指數(shù)最高者為對(duì)照品種)。
2 結(jié)果與分析
2.1 接種后西瓜幼苗的主要表現(xiàn)癥狀
LSGB病原菌菌懸液噴霧接種于不同西瓜品種葉片上,西瓜子葉和真葉均可發(fā)病,子葉發(fā)病時(shí),病斑向四周擴(kuò)散,出現(xiàn)不規(guī)則淡褐斑,邊緣有黃色暈圈,真葉發(fā)病時(shí),由接種點(diǎn)向四周形成不規(guī)則斑、水浸狀病斑,病斑沿葉脈發(fā)展,嚴(yán)重時(shí)可發(fā)展到葉基部,沿葉脈發(fā)展到葉基部并形成褐色壞死斑。病斑周圍有黃色暈圈,略呈多角形,多斑融合使得葉片干枯壞死,病葉不脫落。
2.2 不同西瓜品種苗期對(duì)細(xì)菌性果斑病的抗病性分析
由表 2 可知,供試的 48 個(gè)西瓜品種中沒有對(duì)細(xì)菌性果斑病表現(xiàn)免疫和高抗的品種,表現(xiàn)中抗(平均病情指數(shù)在0.40~0.79)的品種有WM1、WM2、WM4、WM5、WM8、WM10、WM11等 29 份,占總數(shù)的60.4%;表現(xiàn)中感(平均病情指數(shù)在0.20~0.39)的品種有WM3、WM6、WM7、WM9、WM12、WM15等 12 份,占總數(shù)的25.0%;表現(xiàn)感?。ㄆ骄∏橹笖?shù)在0.20以下)的品種有WM16、WM17、WM27、WM32、WM35、WM36、WM40共 7 份,占總數(shù)的14.6%,未篩選到免疫和高抗品種。
3 結(jié)論與討論
本研究對(duì) 48 份西瓜品種鑒定結(jié)果表明不同材料之間抗病性存在差異,篩選出了中抗品種 29 份,中感品種 12 份,感病品種 7 份,未篩選獲得免疫和高抗西瓜品種。鄭喜清等[6]通過苗期室內(nèi)噴霧接種法,對(duì)新疆主要的15個(gè)哈密瓜品種或品系、2個(gè)籽瓜及15個(gè)西瓜品種進(jìn)行苗期抗病性鑒定,待測(cè)的所有哈密瓜、籽瓜和西瓜品種或品系在發(fā)病程度上雖有明顯的差別,但均不抗病,其平均病情指數(shù)都在40以上;西瓜和籽瓜的抗病性較哈密瓜要強(qiáng);品種的染色體的倍型和生育期與抗病性也沒有明顯的相關(guān)性。賈宋楠等[7]通過對(duì) 62 份來源于籽用西瓜、國(guó)外引進(jìn)的粘籽西瓜及普通西瓜雜交后代的自交純系進(jìn)行苗期抗病性鑒定,篩選出了ES84、ES90 等 22 份中抗材料,ES30、ES94 等 22 份中感材料,ES46、ES50 等 18 份高感材料,沒有高抗和免疫材料。劉欣欣等[8]采用室內(nèi)苗期人工接種鑒定方法,對(duì)黑龍江省市售的 16 份西、甜瓜栽培品種和 84 份種質(zhì)資源進(jìn)行了細(xì)菌性果斑病的抗病性鑒定,結(jié)果表明,10 份西瓜栽培品種中新紅寶、京欣 1 號(hào)、雙抗大地雷、特大慶紅寶、超豐F1、慶發(fā) 7 號(hào)等 6 個(gè)品種表現(xiàn)為中抗;景豐寶和齊紅西瓜表現(xiàn)為中感;吉福2 號(hào)和慶農(nóng) 1 號(hào)表現(xiàn)為感病,未發(fā)現(xiàn)高抗和免疫的品種。在生產(chǎn)實(shí)踐中,利用抗性強(qiáng)的品種是最經(jīng)濟(jì)、最有效的控病措施,但是迄今并沒有發(fā)現(xiàn)對(duì)果斑病免疫或高抗的品種。因此,選育對(duì)細(xì)菌性果斑病的抗病品種顯得尤為重要。
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