郭秋霞 楊俊歌

分析PCR檢驗法和細菌培養(yǎng)法用于陰道細菌檢驗的效果

郭秋霞 楊俊歌

目的 探討聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)檢驗法和細菌培養(yǎng)法用于陰道細菌檢驗的臨床效果。方法 選擇某院2015-07—2016-12診治的行陰道細菌檢驗的病例中抽取94例作研究對象，并在細菌檢驗中分別采用PCR檢驗法、細菌培養(yǎng)法，對比兩種方法對陰道細菌的檢出率以及對陰道細菌分布情況的檢驗準確性。結(jié)果 ①PCR檢驗法在本次陰道細菌檢驗中的陽性率是88.3%，細菌培養(yǎng)法在本次陰道細菌檢驗中的陽性率是75.5%，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。②PCR檢驗法對棒狀桿菌、加特納菌檢驗準確性分別是93.1%、91.2%，與細菌培養(yǎng)法的72.4%、70.6%相比，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(均P＜0.05)，而PCR檢驗法和細菌培養(yǎng)法在腸球菌檢驗準確性中比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。結(jié)論 和細菌培養(yǎng)法相比較，PCR檢驗法用于陰道細菌檢驗中的臨床效果更佳。

PCR檢驗法；細菌培養(yǎng)法；陰道細菌檢驗；檢出率；陰道細菌分布

陰道炎作為婦科中發(fā)病率相當高的炎癥性疾病，早期確診、治療是應(yīng)對陰道炎的主要手段，而采取何種診斷方式，成為了現(xiàn)階段關(guān)于本病的研究熱點。細菌培養(yǎng)法作為常規(guī)診斷陰道炎的方式，伴隨研究日益深入，大量臨床研究證實，細菌培養(yǎng)法用于陰道炎早期診斷中的檢出率較低，且耗費時間較長，患者通常需要多次進行細菌培養(yǎng)才能確診[1-3]。聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)檢驗法作為近年來用于陰道細菌檢驗的新型手段之一，優(yōu)勢明顯。本研究為明確PCR檢驗法和細菌培養(yǎng)法用于陰道細菌檢驗的臨床效果，對94例行陰道細菌檢驗的患者應(yīng)用PCR檢驗法、細菌培養(yǎng)法，現(xiàn)將2種陰道細菌的檢出率以及陰道細菌分布情況報告如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 本組接受陰道細菌檢驗的患者共94例，均在2015-07—2016-12就診，均為育齡期女性。本組患者年齡為30～45歲，平均年齡(33.7±4.6)歲；入院時均主訴不同程度的陰道瘙癢、白帶分泌增多、異味等臨床表現(xiàn)，符合陰道炎臨床診斷標準[4]；經(jīng)陰道分泌物的細菌學(xué)檢驗、免疫學(xué)試驗、線索細胞檢查和細菌代謝產(chǎn)物測定等多項檢查證實：棒狀桿菌29株，加特納菌34株，腸球菌31例；本研究已經(jīng)醫(yī)院倫理學(xué)委員會審批通過。

作者單位：450000 鄭州中醫(yī)骨傷病醫(yī)院檢驗科(郭秋霞)；462300 河南漯河市召陵區(qū)人民醫(yī)院(楊俊歌)

1.2 研究方法

1.2.1 陰道分泌物采集方法 使用無菌棉簽，在患者陰道后穹窿部位蘸取陰道分泌物，隨后將陰道分泌物置入無菌鹽水內(nèi)貯存，留待陰道細菌檢驗。

1.2.2 PCR檢驗法 取1 000 μL陰道分泌物與生理鹽水混合液，予以15 min的離心處理，離心速度為12 000轉(zhuǎn)/min，棄掉上層清液后，將剩余組織裂解液置入60℃水中10 min，取出后再次實施15 min的離心處理，12 000轉(zhuǎn)/min，并將所獲取的上清液用于DNA模板制作中。檢驗人員應(yīng)注意，選用陰性作參考研究，其中不加模板DNA，并在擴增模板DNA時，應(yīng)在其中置入引物、緩沖對等，置入PCR儀中予以循環(huán)處理。

1.2.3 細菌培養(yǎng)法 取出陰道分泌物與生理鹽水的混合液置入培養(yǎng)基內(nèi)，并在CO2孵箱內(nèi)堅持培養(yǎng)3 d。培養(yǎng)基內(nèi)長成了菌落后，挑選露滴狀、灰色、光滑、半透明樣的細菌予以生化鑒定。

1.3 觀察指標 統(tǒng)計PCR檢驗法、細菌培養(yǎng)法在本次陰道細菌檢驗中的陽性率；統(tǒng)計PCR檢驗法、細菌培養(yǎng)法在本次陰道細菌分布檢驗中的準確性。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS 19.0統(tǒng)計學(xué)軟件輸入本組研究所得數(shù)據(jù)：對計數(shù)資料使用例數(shù)(n)表示，組間率(%)對比使用χ2檢驗；P＜0.05即對比差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 PCR檢驗法、細菌培養(yǎng)法在本次陰道細菌檢驗中的陽性率比較 PCR檢驗法在本次陰道細菌檢驗中的陽性率是88.3%，細菌培養(yǎng)法在本次陰道細菌檢驗中的陽性率是75.5%，對比差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05，表1)。

表1 PCR檢驗法、細菌培養(yǎng)法在本次陰道細菌檢驗中的陽性率比較(n)

2.2 PCR檢驗法、細菌培養(yǎng)法在本次陰道細菌分布檢驗中的準確性比較 PCR檢驗法對棒狀桿菌、加特納菌檢驗準確性分別是93.1%、91.2%，與細菌培養(yǎng)法的72.4%、70.6%相比均差異有統(tǒng)計學(xué)意義(均P＜0.05)，而PCR檢驗法和細菌培養(yǎng)法在腸球菌檢驗準確性中比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05，表2)。

表2 PCR檢驗法、細菌培養(yǎng)法在本次陰道細菌分布檢驗中的準確性比較[n(%)]

3 討論

現(xiàn)階段，多項研究證實，白帶檢查結(jié)果能夠在很大程度上反映女性健康狀態(tài)，因而女性一旦出現(xiàn)白帶分泌物增多癥狀，應(yīng)立即就醫(yī)，并予以高度重視，為早期診斷、準確治療婦科病提供相應(yīng)依據(jù)[5-6]。近幾年來，伴隨國內(nèi)女性工作壓力加大、生活節(jié)奏加快、飲食生活習(xí)慣改變，女性陰道病發(fā)生率呈現(xiàn)出逐年升高的趨勢，其中以陰道炎發(fā)生率最高[7]。據(jù)報道，陰道炎作為女性多發(fā)病，與患者陰道中寄生菌群失衡相關(guān)[8]。一般而言，女性陰道中的寄生菌群互相平衡，細菌分泌各種物質(zhì)可維持陰道中環(huán)境穩(wěn)定。一旦陰道菌群失衡，陰道桿菌、陰道上皮細胞等維持菌群平衡的最重要細菌可大量死亡，致病菌可快速增殖，并在繁殖期間消耗大量營養(yǎng)物質(zhì)，致使陰道上皮細胞失去其應(yīng)有代謝功能，并引發(fā)陰道內(nèi)酸堿水平紊亂。陰道上皮細胞喪失了屏障保護功能，可引發(fā)炎癥，表現(xiàn)為白帶增多、外陰瘙癢等。

陰道炎的產(chǎn)生、進展均較遲緩，許多陰道炎患者在發(fā)病初期無明顯癥狀，而一旦出現(xiàn)明顯臨床表現(xiàn)時，已經(jīng)進展成盆腔、腹部疾病。據(jù)報道[9]，若陰道炎長期反復(fù)發(fā)作，可導(dǎo)致患者不孕。鑒于此，探尋一種可早期判斷女性是否存在感染、確定致病菌種的方法，成為陰道細菌檢驗的研究熱點。細菌培養(yǎng)法在女性陰道菌群檢測中應(yīng)用效果良好，然而該檢驗方法中檢驗時間長、設(shè)備要求高、檢出率低等弊端日益暴露。PCR檢驗法作為近年來廣泛應(yīng)用于陰道細菌檢驗的新型檢測技術(shù)，可歸納為熒光定量檢測方法，是一種融合了DNA雜交特異性、RCP敏感性優(yōu)勢的檢驗技術(shù)，具有精度準、檢出率高等優(yōu)勢。經(jīng)分析，PCR檢驗法的操作過程簡單，對設(shè)備要求不高，并能在檢驗中做到“無菌操作”要求，避免了細菌感染，從而防止檢驗結(jié)果異常。同時，PCR檢驗法的檢驗時間較短，能夠快速獲得檢驗結(jié)果，避免患者多次、重復(fù)檢驗，減少了其在陰道細菌檢驗過程中花費的時間與精力。據(jù)報道[10]，PCR檢驗法具有操作簡單、耗時短、特異性良好、靈敏度高等優(yōu)點，是最適宜用于陰道細菌檢驗中的分子生物學(xué)檢驗技術(shù)。而相較于PCR檢驗法，細菌培養(yǎng)法雖然理論知識簡單，但耗時長，且容易在檢驗過程中出現(xiàn)細菌污染，影響檢驗結(jié)果。

本研究結(jié)果提示，PCR檢驗法在本次陰道細菌檢驗中的陽性率是88.3%，高于細菌培養(yǎng)法，且其對棒狀桿菌、加特納菌檢驗準確性也高于細菌培養(yǎng)法，可見PCR檢驗法用于陰道細菌檢驗中的臨床效果優(yōu)于細菌培養(yǎng)法。

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2017-05-11)

1005-619X(2017)10-1087-02

10.13517/j.cnki.ccm.2017.10.034