魏桂云

（福建省產(chǎn)品質(zhì)量檢驗研究院，福建 福州 350002）

間斷化學(xué)分析儀法測定奶粉中硝酸鹽含量

魏桂云

（福建省產(chǎn)品質(zhì)量檢驗研究院，福建 福州 350002）

文章建立了一種快速、批量測定奶粉中硝酸鹽含量的檢測方法。方法首先對奶粉樣品進(jìn)行沉淀蛋白質(zhì)、除去脂肪處理，然后采用間斷化學(xué)分析儀自動進(jìn)樣還原硝酸鹽為亞硝酸鹽，自動加顯色劑進(jìn)行顯色比色測定。文章同時分析了方法的線性、準(zhǔn)確性、精密度、加標(biāo)回收率等參數(shù)，結(jié)果表明硝酸鹽在0～2μg/mL的范圍內(nèi)該方法線性良好，回歸方程：y=0.2252x-0.0009，相關(guān)系數(shù)r=0.9999，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD＜5%，加標(biāo)回收率在89.0%～99.6%。方法簡便快速、靈敏度高、準(zhǔn)確性、重復(fù)性好。

間斷化學(xué)分析儀法；奶粉檢測；硝酸鹽

硝酸鹽廣泛存在于自然界中，在硝酸鹽還原酶作用下轉(zhuǎn)化為亞硝酸鹽，亞硝酸鹽易與仲胺、酰胺反應(yīng)，生成亞硝胺。 亞硝胺是致癌、致畸、致突變的物質(zhì)，可嚴(yán)重危害人體健康[1-2]。

在國內(nèi)，奶粉中硝酸鹽的檢測方法主要是采用分光光度法。硝酸鹽先用鎘柱還原成亞硝酸鹽，然后測得亞硝酸鹽總量，由亞硝酸鹽總量減去樣品亞硝酸鹽含量，從而得到試樣中硝酸鹽含量[3]。人工操作鎘柱還原法不僅需要自主填裝鎘柱，同時需保證不讓空氣進(jìn)入，每次使用前都必須檢查鎘柱的還原效率，并對鎘柱進(jìn)行再生等操作，這些不但復(fù)雜繁瑣，而且結(jié)果重現(xiàn)性差、還原過程還需專門人員監(jiān)視。當(dāng)樣品批量大時需對鎘柱進(jìn)行多次的還原再生，耗時長；同時，鎘不僅對實驗操作人員具有潛在的危害，對環(huán)境也容易造成污染。采用間斷化學(xué)分析儀法測定硝酸鹽，可實現(xiàn)儀器自動進(jìn)樣還原硝酸鹽，無需人工填裝鎘柱及經(jīng)常進(jìn)行鎘柱活化再生，同時儀器自主進(jìn)行樣品還原、顯色比色操作，無需人員看護(hù)[4-5]。且標(biāo)準(zhǔn)溶液選用硝酸鹽，和樣品一樣進(jìn)行鎘柱還原、顯色比色，最終直接得出樣品溶液硝酸鹽含量，這可很好地減少系統(tǒng)誤差，提高檢驗結(jié)果的準(zhǔn)確率。相比于國標(biāo)法測定硝酸鹽，本法檢測所需溶液量少，可進(jìn)行多次還原測定，不會出現(xiàn)樣品過濾量太少現(xiàn)象；還可以進(jìn)行大批量樣品處理檢測，大大提高檢驗效率。

1 材料與方法

1.1 原理

試樣經(jīng)過沉淀蛋白質(zhì)、除去脂肪后，用儀器自動將硝酸鹽還原成亞硝酸鹽后進(jìn)行顯色反應(yīng)。將所得硝酸鹽含量減去樣液中所含亞硝酸鹽換算成硝酸鹽的量，從兩者的差值計算出硝酸鹽含量。

1.2 儀器

間斷化學(xué)分析儀，CLEVERCHEN 380，DECHEM-TECH；BT114S德國DeChem-Tech.GmbH；

電子分析天平（d=0.0001g），賽多利斯科學(xué)儀器（北京）有限公司。

1.3 試劑

亞鐵氰化鉀溶液(106g/L)、乙酸鋅溶液(220g/L)、飽和硼砂溶液（50g/L）、咪唑緩沖溶液（3g咪唑加入50mL蒸餾水溶解，加水至250mL，加入2%硫酸銅溶液0.025mL，調(diào)節(jié)pH值至7.70，最后加水至300mL）、對氨基苯磺酸溶液(4g/L)、鹽酸萘乙二胺溶液(2g/L)、硝酸根標(biāo)準(zhǔn)使用液(2μg/mL)。

1.4 樣品處理

稱取10g樣品，置于150mL具塞錐形瓶中，加12.5mL50g/L飽和硼砂溶液，加入70℃左右的水約150mL，混勻，于沸水浴中加熱15min，取出置冷水浴中冷卻，并放置至室溫。

定量轉(zhuǎn)移上述提取液至200mL容量瓶中，加入5mL106g/L亞鐵氰化鉀溶液，搖勻，再加入5mL220g/L乙酸鋅溶液，以沉淀蛋白質(zhì)。加水至刻度，搖勻，放置30min，除去上層脂肪，上清液用濾紙過濾，棄去初濾液30mL，濾液備用，同時做空白試驗。

1.5 儀器參數(shù)：

濾光片：550nm；

樣液及試劑加入量：樣液232μL；試劑R1（咪唑緩沖溶液）168μL；試劑R2（對氨基苯磺酸溶液）40μL；試劑R3（鹽酸萘乙二胺溶液）20μL。

反應(yīng)時間：試劑R1和樣液混勻36s后加試劑R2，再反應(yīng)36s后加入試劑R3，最后反應(yīng)120s。

2 結(jié)果與討論

2.1 樣品前處理條件的選擇及注意事項

2.1.1 實驗過程使用的水最好是超純水，且使用同一桶水，以避免不同實驗用水本底不同造成實驗結(jié)果偏差。

2.1.2 在入加亞鐵氰化鉀溶液后，要充分搖勻，稍候再加入乙酸鋅溶液，且邊加邊搖，使蛋白質(zhì)沉淀完全，否則濾液可能會出現(xiàn)渾濁。

2.1.3 對于蛋白質(zhì)含量較高的樣品可適當(dāng)加大沉淀劑的用量，以使蛋白質(zhì)沉淀完全，避免沉淀不完全，導(dǎo)致還原時對鎘柱造成堵塞。

2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線及回歸方程

2.3 精密度試驗

取3份不同樣品，每份樣品重復(fù)測定六次，計算精密度，結(jié)果見表2。從表2可以看出，硝酸鹽的變異系數(shù)小于5%，說明本方法的精密度較好。

表1 標(biāo)準(zhǔn)曲線及回歸方程

表2 精密度驗證（n=6）

表3 加標(biāo)回收（n=6）

2.4 回收率試驗

同一樣品作本底，取高中低3個濃度加標(biāo)后測定，測定6次，硝酸鹽本底值為15.6mg/kg，計算回收率，結(jié)果見表3。從表3可以看出，硝酸鹽的回收率為89.0%～99.6%。

3 結(jié)論

本文建立一種快速、批量測定奶粉中硝酸鹽含量的檢測方法，通過使用間斷化學(xué)分析儀自動進(jìn)樣，還原樣液、顯色比色來進(jìn)行樣品硝酸鹽含量分析。方法具有無需人工鎘柱還原、可進(jìn)行批量樣品處理、簡化試驗操作步驟、節(jié)約試劑、節(jié)省分析時間、提高檢驗效率的優(yōu)點，同時實驗精密度、回收率均較為滿意，可很好的應(yīng)用于實際檢測工作中。

[1]杭學(xué)宇,汪怡.鎘柱還原法測定奶粉中硝酸鹽和亞硝酸鹽的含量[J].中國醫(yī)藥指南,2010,8(36)∶43-44.

[2]孫翠霞,張正堯,鹿塵.離子色譜儀法同時測定嬰幼兒奶粉中的硝酸鹽和亞硝酸鹽[J].預(yù)防醫(yī)學(xué)論壇,2010(04)∶0345-03.

[3]中華人民共和國國家衛(wèi)生和計劃生育委員會.食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中亞硝酸鹽與硝酸鹽的測定∶GB 5009.33-2016 [S].北京∶中國標(biāo)準(zhǔn)出版社,2016∶12.

[4]王智聰,馮炫,余笑波,等.離子色譜一電導(dǎo)檢測法測定豆奶粉中的亞硝酸鹽和硝酸鹽含量[J].安徽農(nóng)學(xué)通報,2015,21(22)∶110-112.

[5]周虹,鈕偉民,宗榮芬,等.乳品中硝酸鹽的離子色譜測定法[J].職業(yè)與健康,2003,19(11)∶47-49.

10.3969/j.issn.1007-550X.2017.09.003

TS252.7

A

1007-550X（2017）09-0043-03

2017-06-17

魏桂云（1986-），男，福建南平人，本科，主要從事食品檢驗工作。