王廣來，張海蘭，魏德軍，尹洪俊，張克著，曹德賓*

（1.濱州市和德農(nóng)業(yè)科技有限公司，山東 濱州 256600；2.山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院，山東 濟(jì)南 250100）

超短時(shí)滅菌制作平菇和雞腿菇三級(jí)種零污染試驗(yàn)報(bào)告

王廣來1，張海蘭2，魏德軍1，尹洪俊1，張克著1，曹德賓2*

（1.濱州市和德農(nóng)業(yè)科技有限公司，山東 濱州 256600；2.山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院，山東 濟(jì)南 250100）

平菇、雞腿菇等大宗品種的三級(jí)種，體積大，數(shù)量多，污染率居高不下，若干年來采取多種解決措施，效果均不佳。按照逆向思維方式進(jìn)行超短時(shí)滅菌試驗(yàn)，實(shí)現(xiàn)了零污染的理想結(jié)果。

超短時(shí)滅菌；零污染；逆向思維；賽百09；百病傻；三維精素

食用菌三級(jí)固體菌種體積大，數(shù)量多，是其生物特性所定，在生料或發(fā)酵料栽培中，暫時(shí)尚無有效解決辦法。三級(jí)種的污染率高，卻是十分令人頭疼但又難以解決的問題，長(zhǎng)期以來一直困擾著廣大制種者，尤其是一線制種企業(yè)和大量的散戶菌種生產(chǎn)者；據(jù)不完全統(tǒng)計(jì)，縣級(jí)及其以下制種企業(yè)和制種戶，大多采用常壓滅菌方法，污染率一般保持在20%左右，高者可達(dá)50%以上，嚴(yán)重者可致絕收，情勢(shì)相當(dāng)嚴(yán)峻，既耽誤了栽培生產(chǎn)，又浪費(fèi)了大量原材料，更重要的是耽誤的時(shí)間無法彌補(bǔ)，污染料隨處拋棄形成新的污染源，一定程度上制約了我國(guó)食用菌產(chǎn)業(yè)的順利發(fā)展。

多年來，廣大科技工作者一直致力于尋求解決之道，采取了諸如提高滅菌壓力、延遲滅菌時(shí)間、培養(yǎng)基中添加多菌靈藥物以及加大藥物用量等若干措施，收效甚微，或者說，沒有從根本上解決問題。在“綠色和有機(jī)”原則指導(dǎo)下，按照簡(jiǎn)便操作、高效生產(chǎn)、最低成本、最高成功率的目標(biāo)要求，運(yùn)用逆向思維進(jìn)行分析并試驗(yàn)，找到1個(gè)超短時(shí)滅菌制作三級(jí)菌種零污染的方法，實(shí)現(xiàn)了綠色和環(huán)保的愿望，符合可持續(xù)發(fā)展以及現(xiàn)代農(nóng)業(yè)發(fā)展理念和國(guó)家相關(guān)政策。

1 材料和方法

1.1 試驗(yàn)材料

1.1.1 培養(yǎng)基材料

棉籽殼，山東當(dāng)?shù)禺a(chǎn)，屬于常規(guī)的中殼短絨產(chǎn)品；麥麩，市售產(chǎn)品；石灰粉、石膏粉，普通市售（建筑用） 產(chǎn)品；復(fù)合肥，氮、P2O5、K2O三元素含量各15%的國(guó)產(chǎn)復(fù)合肥。

1.1.2 藥物材料

賽百09（堿性殺菌藥物），百病傻（酸性抑菌藥物），濟(jì)南農(nóng)科院食用菌研究所中試產(chǎn)品；多菌靈，含量50%，江蘇省某企業(yè)產(chǎn)品。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 培養(yǎng)基基本配方

棉籽殼450 kg、麥麩50 kg、復(fù)合肥2 kg、石灰粉10 kg、石膏粉5 kg。

1.2.2 試驗(yàn)因素和水平

試驗(yàn)采用L4（23）正交試驗(yàn)，試驗(yàn)結(jié)果見表1。

表1 正交試驗(yàn)表

發(fā)酵期間，每天翻堆1次，翻堆前后根據(jù)季節(jié)、料溫等具體情況酌量補(bǔ)水，根據(jù)經(jīng)驗(yàn)，保持基料的含水率在（63±2）%；接種、培養(yǎng)等操作環(huán)節(jié)均按常規(guī)進(jìn)行。

采用低壓聚乙烯塑袋做菌種塑袋，將料袋裝入常壓滅菌室后大火圓汽，滅菌室內(nèi)溫度達(dá)到95℃以上，繼續(xù)保持2 h即滅菌結(jié)束。

滅菌結(jié)束停止加熱后，使滅菌室自然降溫，根據(jù)氣溫，保持8 h～24 h，然后將料袋移入接種室。接種、培養(yǎng)均常規(guī)操作。

根據(jù)氣溫以及環(huán)境病蟲害基數(shù)狀況，接種室、培養(yǎng)室采用200倍賽百09溶液和300倍百病傻溶液各噴1遍，13℃以上條件時(shí)次日加噴1遍，并隔2 d后增噴1 000倍氯氰菊酯溶液1遍以殺蟲，而后啟用。

試驗(yàn)分別在濟(jì)南、濰坊、濱州等多地分頭進(jìn)行，在統(tǒng)一試驗(yàn)方法的前提下，不區(qū)別季節(jié)，亦不指定平菇、雞腿菇的品種和菌株。

剔除個(gè)別因事、因病等特殊情況記錄不完整的原始資料，將試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行加權(quán)平均，得出試驗(yàn)結(jié)果。

2 結(jié)果與討論

正交試驗(yàn)結(jié)果見表2。

表2 正交試驗(yàn)結(jié)果表

從表2可以直接看出，因素1的R（極差） 值達(dá)9.5，為顯著水平。結(jié)果證明，滅菌時(shí)間是數(shù)次試驗(yàn)和分析后確定的第一位因素，該綜合性試驗(yàn)驗(yàn)證了此前的多次試驗(yàn)結(jié)論，效果很明顯。

因素B、因素C的R值相同，說明在該試驗(yàn)中，除第一因素外，其它常規(guī)因素的影響力度不大。

試驗(yàn)1、試驗(yàn)2的試驗(yàn)結(jié)果并排第一，據(jù)分析原因，超短時(shí)滅菌是主要影響因素，常規(guī)因素雖各有不同，但對(duì)試驗(yàn)結(jié)果幾乎沒有影響，由此可以分析，延長(zhǎng)發(fā)菌時(shí)間和添加殺菌、抑菌藥物，對(duì)污染率沒有慣性思維想象中的控制作用。

據(jù)分析，超短時(shí)滅菌可以節(jié)省燃料、人工費(fèi)等生產(chǎn)成本的60%以上，減少（常規(guī)） 污染率10%左右，綜合生產(chǎn)效益可穩(wěn)定提高20%左右；其它與之相關(guān)的優(yōu)勢(shì)，如無藥物污染和殘留、無污染菌種降低了環(huán)境污染、節(jié)約制種時(shí)間、確保栽培生產(chǎn)計(jì)劃的執(zhí)行以及維護(hù)制種單位信譽(yù)等社會(huì)效益無法精確計(jì)算。

采用本試驗(yàn)的方法進(jìn)行平菇、雞腿菇等生料或發(fā)酵料栽培品種的三級(jí)種的制種，技術(shù)成熟，操作簡(jiǎn)單，提高效率，發(fā)菌成功率100%，在降低生產(chǎn)成本的基礎(chǔ)上，菌種成品率得到了保證，符合食用菌產(chǎn)業(yè)發(fā)展的要求，也符合食用菌綠色發(fā)展的要求。

本試驗(yàn)提供了最佳配方組合為A1B2C1。

3 小結(jié)與討論

自上世紀(jì)80年代以來，無論制種還是栽培中，基料中添加0.2%～0.3%的多菌靈或甲基托布津已成常態(tài)，本試驗(yàn)結(jié)果表明，添加多菌靈或其它相關(guān)殺菌、抑菌藥物等做法屬于誤入歧途，建議此后的該類生產(chǎn)中將該項(xiàng)藥物從生產(chǎn)計(jì)劃中刪除，最大限度地降低生產(chǎn)成本。

此前的2次試驗(yàn)中，發(fā)酵操作時(shí)沒有對(duì)料堆進(jìn)行打孔，雖然污染率大大低于傳統(tǒng)操作，但卻沒有達(dá)到零污染，是否說明基料發(fā)酵必須打孔，以避免厭氧微生物的滋生或干擾，尚待進(jìn)一步做驗(yàn)證試驗(yàn)。

2010年前后，全國(guó)范圍內(nèi)棉籽殼大幅度漲價(jià)，一些企業(yè)和制種業(yè)戶改用玉米芯作為主要原料，導(dǎo)致產(chǎn)生很多問題，尤其污染率更是居高不下，山東地區(qū)就曾經(jīng)不止一次發(fā)生過因制種大面積污染而無法如期交貨的事件，使得散戶的栽培無法按計(jì)劃進(jìn)行，企業(yè)受損，菇農(nóng)怨聲不絕。在制作三級(jí)種生產(chǎn)中使用玉米芯等秸稈原料替代棉籽殼，是否可以獲得與本試驗(yàn)相同的結(jié)果，尚待進(jìn)行深入試驗(yàn)。

通過將本試驗(yàn)的結(jié)果應(yīng)用于平菇、雞腿菇、草菇、姬菇等傳統(tǒng)生料和發(fā)酵料栽培品種，獲得了相同的生產(chǎn)效果。本試驗(yàn)的結(jié)果是否可以應(yīng)用到上述品種以外其它的食用菌品種的三級(jí)種生產(chǎn)，有待與業(yè)內(nèi)外同仁一起進(jìn)行深入試驗(yàn)。

[1]曹德賓，王廣來，涂改臨.食用菌基礎(chǔ)及制種技術(shù)問答[M].北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2015.

[2]曹德賓.平菇生產(chǎn)技術(shù)咨詢精選[M].北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2015.

S646.1

A

1003-8310（2017）05-0083-02

10.13629/j.cnki.53-1054.2017.05.021

王廣來（1971-），男，中專，農(nóng)技師，長(zhǎng)期從事食用菌教學(xué)、生產(chǎn)與經(jīng)營(yíng)。E-mail:dgwgl@163.com

*通信作者：曹德賓（1956-），男，高中，農(nóng)藝師，主要從事富硒食用菌、功能食用菌、林下栽培食用菌等技術(shù)研究。E-mail:cdb761227@163.com

2017-06-24