王輝　李略　李海峰

[摘要] 目的 分析舟山海島地區(qū)多重耐藥鮑曼不動桿菌調(diào)查結(jié)果及替加環(huán)素對其藥物敏感性的影響。 方法 收集我院2016年1月～2017年5月150例多耐藥鮑曼不動桿菌感染患者的各類標(biāo)本。采用調(diào)查表形式調(diào)查多重耐藥鮑曼不動桿菌感染患者的臨床情況，如年齡、性別、病種、基礎(chǔ)疾病、病程、用藥情況、抗菌藥物使用頻率、免疫狀況、有無侵入性操作、藥敏結(jié)果等，統(tǒng)計(jì)分析患者感染多重耐藥鮑曼不動桿菌的危險因素、好發(fā)人群等。通過常規(guī)培養(yǎng)、分離篩選出多重耐藥鮑曼不動桿菌菌株150例，予Kirby-Bauer紙片擴(kuò)散法置入培養(yǎng)基（MH）中進(jìn)行藥敏試驗(yàn)。研究本地區(qū)多重耐藥鮑曼不動桿菌對替加環(huán)素、頭孢哌酮舒巴坦鈉的耐藥及抑菌率。采用空白組、替加環(huán)素組、舒普深組及替加環(huán)素+舒普深組對150例多重耐藥鮑曼不動桿菌進(jìn)行耐藥及抑菌效果的觀察及分析。 結(jié)果 通過分析發(fā)現(xiàn)，年齡大、合并多種疾病、惡性腫瘤、病程長、用藥種類單一、抗菌藥物使用時間長是患者感染多重耐藥鮑曼不動桿菌的危險因素。替加環(huán)素組的耐藥率和抑菌率為10.0%和90.0%、舒普深組的耐藥率和抑菌率為20.0%和80.0%，替加環(huán)素+舒普深組的耐藥率和抑菌率為4.6%和95.4%。 結(jié)論 替加環(huán)素對多重耐藥鮑曼不動桿菌具有較高的敏感度，并且通過與舒普深的聯(lián)合應(yīng)用，能夠減少其耐藥性，從而有效治療多重耐藥鮑曼不動桿菌引起的疾病。

[關(guān)鍵詞] 海島地區(qū)；多重耐藥鮑曼不動桿菌；替加環(huán)素；藥物敏感性

[中圖分類號] R446.5 [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] B [文章編號] 1673-9701（2017）23-0109-03

[Abstract] Objective To analyze the investigation results of multi-drug resistant Acinetobacter baumannii in Zhoushan Island and the sensitivity of tigecycline to Acinetobacter baumannii. Methods Various types of specimens of 150 patients with multi-drug resistant Acinetobacter baumannii infection in our hospital from January 2016 to May 2017 were collected. The clinical status of patients with multiple drug-resistant Acinetobacter baumannii infection， such as age， sex， disease， underlying disease， course of disease， medication status， frequency of antimicrobial use， immune status， invasive operation， medication sensitive results was investigated by using the form of the questionnaire. The risk factors for multiple drug resistance of Acinetobacter baumannii infection in patients and good people were statistically analyzed.150 cases of multi-drug resistant Acinetobacter baumannii strains were screened by conventional culture and isolated. And the drug susceptibility test was carried out by Kirby-Bauer paper diffusion placed into culture medium（MH）. The resistance and inhibitory rate of Acinetobacter baumannii to ticyclotaxel and cefoperazone sulbactam sodium in the region were studied. The antibiotic resistance and antibacterial effect of 150 cases of multi-drug resistant Acinetobacter baumannii were observed and analyzed by blank group， tigecycline group， sulperazon group and tigecycline+sulperazon group. Results The analysis revealed that older age， combination with multiple diseases， cancer， longer duration， a single type of medication， long time of antibiotics use ere the risk factors for patients to be infected with multiple drug resistant Acinetobacter baumannii infection.The resistant rate and antimicrobial rate of the tigecycline group were 10.0% and 90.0%， respectively. The resistant rate and antibacterial rate of the sulperazon group were 20.0% and 80.0%， respectively. The resistant rate and antibacterial rate were 4.6% and 95.4% in the tigecycline+sulperazon group. Conclusion Tigecycline has a high sensitivity to multidrug-resistant Acinetobacter baumannii and its drug resistance can be reduced by co-administration with sulperazon， so as to effectively treat the diseases caused by multidrug-resistant Acinetobacter baumannii.

[Key words] Island region； Multiple drug-resistant Acinetobacter baumannii； Tigecycline； Drug sensitivity

隨著臨床抗菌藥物以及免疫制劑的廣泛應(yīng)用，致病菌耐藥成為一種普遍現(xiàn)象，給臨床治療帶來了較大的問題[1]。鮑曼不動桿菌是一種常見的致病菌，且近些年來發(fā)現(xiàn)其耐藥率不斷提升，成為一種難治性細(xì)菌[2]。替加環(huán)素是一種新型廣譜抗生素，對于耐藥病菌有較好的應(yīng)用效果。因此，文章主要針對舟山海島地區(qū)多重耐藥鮑曼不動桿菌調(diào)查結(jié)果及替加環(huán)素對其藥物敏感性的影響展開分析，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料

收集我院2016年1月～2017年5月150例多耐藥鮑曼不動桿菌感染患者的各類標(biāo)本。入選標(biāo)準(zhǔn)：（1）在我院留取各類樣本的患者；（2）入院住院時間超過48 h或在近30 d內(nèi)有住院史的患者；（3）年齡30～90歲；（4）符合醫(yī)院獲得性肺炎診斷（依據(jù)中華醫(yī)學(xué)會呼吸病學(xué)分會制定的HAP標(biāo)準(zhǔn)）[3]。排除標(biāo)準(zhǔn)：排除同一患者相同部位分離到的重復(fù)菌株[4]。

1.2 方法

1.2.1 分組方法 將分離得到的多耐藥鮑曼不動桿菌菌株，擴(kuò)增后分為空白組、替加環(huán)素組、舒普深組（頭孢哌酮舒巴坦鈉）及替加環(huán)素+舒普深組四組，空白組不添加任何藥物，替加環(huán)素組單純使用替加環(huán)素、舒普深組單純使用頭孢哌酮舒巴坦鈉，替加環(huán)素+舒普深組聯(lián)合應(yīng)用替加環(huán)素和頭孢哌酮舒巴坦鈉，均在培養(yǎng)24 h后對其進(jìn)行藥敏檢測。

1.2.2 藥敏檢測操作方法 無菌操作下采集、運(yùn)送用于細(xì)菌培養(yǎng)的標(biāo)本，實(shí)驗(yàn)室接收標(biāo)本后依據(jù)《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行處理[5]。將分離后的標(biāo)本常規(guī)接種于9 cm血平板中培養(yǎng)，24～48 h后觀察是否有菌落生長。如發(fā)現(xiàn)菌落生長予進(jìn)行分純培養(yǎng)18～24 h，然后在分純過夜新鮮培養(yǎng)的細(xì)菌平板上挑選4～5個形態(tài)相同的菌落，用3～5 mL無菌生理鹽水中經(jīng)比濁儀調(diào)整濃度至0.5麥?zhǔn)蠁挝唬s1×108 CFU/mL）上細(xì)菌儀鑒定。經(jīng)過18～24 h細(xì)菌儀檢測后獲得鮑曼不動桿菌，并將獲得菌株再次進(jìn)行分純培養(yǎng)18～24 h（得到對數(shù)生長期）獲得多重耐藥鮑曼不動桿菌。然后挑選4～5個形態(tài)相同的菌落，用3～5 mL無菌生理鹽水中經(jīng)比濁儀調(diào)整濃度至0.5麥?zhǔn)蠁挝?，用K-B紙片接種法置入藥敏培養(yǎng)基（MH），并貼入藥敏試片測試。

1.3 材料與設(shè)備

所需材料由鄭州安圖生物有限公司提供。使用設(shè)備：美國BD公司生產(chǎn)PHOENIX-100型全自動細(xì)菌鑒定和藥敏測試儀。藥敏培養(yǎng)基（MH）材料由法國梅里埃公司生產(chǎn)。藥敏試片由英國Oxoid公司生產(chǎn)。

1.5 判斷標(biāo)準(zhǔn)

參照美國FDA 制定的測量抑菌圈直徑標(biāo)準(zhǔn)，經(jīng)過18～24 h培養(yǎng)后用游標(biāo)卡尺測量藥物抑菌環(huán)的直徑。

1.6統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)量資料用（x±s）表示，組間差異、組內(nèi)差異比較采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料比較采用χ2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 舟山地區(qū)多重耐藥鮑曼不動桿菌調(diào)查分析

通過分析發(fā)現(xiàn)，年齡大、合并多種疾病、惡性腫瘤、病程長、用藥種類單一、抗菌藥物使用時間長是患者感染多重耐藥鮑曼不動桿菌的危險因素，見表1、2。

2.2四組的耐藥率和抑菌率比較

替加環(huán)素組的耐藥率和抑菌率為10.0%和90.0%、舒普深組的耐藥率和抑菌率為20.0%和80.0%，替加環(huán)素+舒普深組的耐藥率和抑菌率為4.6%和95.4%，見表3。

3 討論

鮑曼不動桿菌（Ab）為非發(fā)酵革蘭陰性桿菌，廣泛存在于自然界，為條件致病菌，是醫(yī)院感染的重要病原菌，通過污染的環(huán)境、醫(yī)療器械以及帶菌醫(yī)護(hù)人員的手等環(huán)節(jié)在醫(yī)院內(nèi)傳播及流行[6]。現(xiàn)階段國內(nèi)對多重鮑曼不動桿菌感染的危險因素調(diào)查研究成果較少，難以為臨床預(yù)防鮑曼不動桿菌導(dǎo)致的院內(nèi)感染提供科學(xué)依據(jù)[7]。本次研究經(jīng)分析發(fā)現(xiàn)，年齡大、合并多種疾病、惡性腫瘤、病程長、用藥種類單一、抗菌藥物使用時間長是患者感染多重耐藥鮑曼不動桿菌的危險因素，同時與老年患者的身體免疫機(jī)制和抵抗機(jī)制衰弱也有一定的相關(guān)性，加上在多種疾病的作用下，個體免疫功能異常，降低了抵抗致病菌入侵的能力[8，9]。

根據(jù)國內(nèi)資料表明，Ab占臨床分離的不動桿菌的70.0%以上，且對第3代和第4代頭孢菌素的耐藥率達(dá)63.0%～89.9%[10，11]。近年來多重耐藥鮑曼不動桿菌感染在全球重癥患者中日益普遍，且耐藥率和病死率逐漸增高，已被冠名為“21世紀(jì)革蘭陰性桿菌MRSA”[12，13]。全球細(xì)菌耐藥監(jiān)測數(shù)據(jù)庫（SENTRY）的數(shù)據(jù)顯示，不動桿菌位于HAP致病原的第5位，同時其對常用抗菌藥物的耐藥率也逐年增高[14]。美國2004～2005年76個醫(yī)學(xué)中心的耐藥監(jiān)測顯示，多重耐藥鮑曼不動桿菌（MDRAB）占鮑曼不動桿菌臨床分離株29.3%[15，16]。2012年中國 CHINET的監(jiān)測資料顯示，不動桿菌屬（鮑曼不動桿菌占89.6%）對亞胺培南和美羅培南的耐藥率分別為63.5%和68.2%，泛耐藥株數(shù)量高達(dá)45.0%[17，18]。

本次研究中，替加環(huán)素組的耐藥率和抑菌率為10.0%和90.0%、舒普深組的耐藥率和抑菌率為20.0%和80.0%，替加環(huán)素+舒普深組的耐藥率和抑菌率為4.6%和95.4%，這說明替加環(huán)素對多重耐藥鮑曼不動桿菌具有較高的敏感度，并且通過與舒普深的聯(lián)合應(yīng)用，能夠減少其耐藥性發(fā)生，從而有效治療多重耐藥鮑曼不動桿菌引起的疾病。替加環(huán)素（tigecycline）為甘氨酰環(huán)素類抗菌藥物的第一個品種，甘氨酰環(huán)素類為四環(huán)素類抗菌藥物米諾環(huán)素的衍生物[19，20]。其兩種主要耐藥機(jī)制為外排泵和核糖體保護(hù)。對腸球菌、葡萄球菌、鏈球菌以及絕大部分革蘭陰性桿菌都有較強(qiáng)的抗菌活性，由于其抗菌譜廣、抗菌作用強(qiáng)，已經(jīng)成為治療多重耐藥菌株的重要選擇。

通過對多重耐藥鮑曼不動桿菌的臨床分布、易感因素、耐藥特征及藥敏情況等調(diào)查，了解替加環(huán)素對多重耐藥鮑曼不動桿菌的體外敏感率，并與常規(guī)經(jīng)典用藥的耐藥及微生物清除率對照，觀察相關(guān)藥物之間是否存在協(xié)同作用，為臨床診治提供參考。通過對多重耐藥鮑曼不動桿菌耐藥性監(jiān)測，及時準(zhǔn)確地掌握本地區(qū)菌株耐藥及敏感性，并為臨床合理使用抗菌藥物、防止濫用抗菌藥物提供參考依據(jù)。通過對多重耐藥鮑曼不動桿菌感染的危險因素分析，為早期經(jīng)驗(yàn)性應(yīng)用抗菌藥物及預(yù)防院內(nèi)感染提供科學(xué)依據(jù)。

[參考文獻(xiàn)]

[1] 周洋，黃河，張家洪，等.替加環(huán)素聯(lián)合頭孢哌酮舒巴坦治療多重耐藥鮑曼不動桿菌肺炎的療效觀察[J].實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志，2015，34（5）：816-818.

[2] 趙智慧，王曉莉，馬志強(qiáng)，等.超說明書使用替加環(huán)素聯(lián)合頭孢哌酮舒巴坦治療多重耐藥鮑曼不動桿菌肺炎的臨床研究[J].中國藥房，2017，28（2）：201-204.

[3] 余琳，蘇丹虹，江鳳茹，等.多重耐藥鮑曼不動桿菌耐藥基因分析與同源性分析[J].實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志，2015，29（12）：2018-2021.

[4] 佘鵬飛，王央霞，陳麗華，等.D-酪氨酸與3，3'-二氨基二丙基胺對多重耐藥鮑曼不動桿菌生物膜形成與分散的影響[J].臨床檢驗(yàn)雜志，2015，33（6）：460-463.

[5] 孫靜娜，劉澤世，王國欣，等.多重耐藥鮑曼不動桿菌的臨床分布及其外排泵基因型分析[J].山東醫(yī)藥，2014， 34（43）：22-24.

[6] 張立然，劉原，柯蕊，等.鮑曼不動桿菌adeB基因檢測及外排泵抑制劑逆轉(zhuǎn)亞胺培南耐藥性的研究[J].中國抗生素雜志，2017，42（1）：62-66.

[7] 池細(xì)俤，高世華，陳家龍，等.多重耐藥鮑曼不動桿菌隨機(jī)多態(tài)性DNA分型與院內(nèi)感染相關(guān)性研究[J].中國人獸共患病學(xué)報(bào)，2015，29（6）：609-613.

[8] 楊杰，蔡蕓，王睿，等.多重耐藥鮑曼不動桿菌耐藥分型的相關(guān)性及聯(lián)合用藥探討[J].中國臨床藥理學(xué)雜志，2015，28（2）：139-141.

[9] 劉沖，蘇建榮，閆東輝，等.重癥監(jiān)護(hù)病房多重耐藥鮑曼不動桿菌感染及耐藥性分析[J].中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2015，38（1）：55-58.

[10] 朱善軍，倪曉艷，吳巧珍，等.吳江地區(qū)多重耐藥鮑曼不動桿菌碳青霉烯酶基因攜帶情況及同源性[J].中國感染控制雜志，2016，15（12）：913-916.

[11] 巫培連，趙子文，陳惠玲，等.多重耐藥鮑曼不動桿菌對戊二醛消毒劑的敏感性[J].廣東醫(yī)學(xué)，2015，34（12）：1810-1813.

[12] 黃麗菊，張桂芳.替加環(huán)素對多重耐藥鮑曼不動桿菌adeB基因表達(dá)水平的影響[J].中國生化藥物雜志，2015， 34（5）：47-49.

[13] 王鐵山，蘇建榮.不同抗菌藥物組合對多重耐藥鮑曼不動桿菌的作用研究[J].中華微生物學(xué)和免疫學(xué)雜志，2015，31（10）：898-902.

[14] 吳倩，蔣敏，趙清，等.多重耐藥鮑曼不動桿菌的耐藥機(jī)制研究[J].重慶醫(yī)學(xué)，2015，44（21）：2961-2965.

[15] Chusri，Sasitorn，Na-Phatthalung，et al.Holarrhena antid-ysenterica as a resistance modifying agent against Acinetobacter baumannii：Its effects on bacterial outer membrane permeability and efflux pumps[J].Microbiological Research，2014，169（5/6）：417-424.

[16] Sof'ya N，Senchenkova，Alexander S.Shashkov，Mikhail M. Shneider，et al.Structure of the capsular polysaccharide of Acinetobacter baumannii ACICU containing di-N-acetylpseudaminic acid[J].Carbohydrate research，2014， 391：89-92.

[17] MJ Morrison，B Imperiali.Biosynthesis of UDP-N，N0-diacetylbacillosamine in Acinetobacter baumannii：Biochemical characterization and correlation to existing pathways[J].Archives of Biochemistry and Biophysics，2013， 536（1）：72-80.

[18] Eleonora Fregolino，Valentina Gargiulo，Rosa Lanzetta，et al.Identification and structural determination of the capsular polysaccharides from two Acinetobacter baumannii clinical isolates，MG1 and SMAL[J].Carbohydrate research，2015，346（7）：973-977.

[19] Smani Y，Docobopérez F，Lópezrojas R，et al.Platelet-activating factor receptor initiates contact of Acinetobacter baumannii expressing phosphorylcholine with host cells[J].The Journal of biological chemistry，2015，287（32）：26901-26910.

[20] Jasna Hrenovic，Jelena Milenkovic，Ivana Goic-Barisic，et al.Antibacterial activity of modified natural clinoptilolite against clinical isolates of Acinetobacter baumannii[J].Microporous and Mesoporous Materials：The offical Journal of the International Zeolite Association，2015，169（45）：148-152.

（收稿日期：2017-06-22）