郭坤元　張宇　王華　穆森　何美軍

摘要：本研究利用TTC、1-K1和醋酸洋紅染色法對(duì)湖南桃源、江西橫峰、四川阿壩、湖北恩施4個(gè)地區(qū)的野葛花粉活性進(jìn)行了測(cè)定，結(jié)果發(fā)現(xiàn)TTC法和醋酸洋紅染色法比較適合野葛的花粉染色，而I-KI法則不太適合。另外，在4個(gè)地區(qū)中江西橫峰的花粉活性比較高，四川阿壩的花粉活性比較低。

關(guān)鍵詞：野葛；花粉活性；測(cè)定方法

野葛為豆科葛屬植物，富含淀粉及異黃酮類物質(zhì)，具有降血壓，防癌圈和保護(hù)肝功能等作用。本研究對(duì)野葛花粉活力進(jìn)行了測(cè)定，比較它們?cè)诓煌瑴y(cè)定方法下的活性差異，希望為后期的工作提供研究基礎(chǔ)。

1材料和方法

1.1材料

選用收集到的湖南桃源、江西橫峰、四川阿壩、湖北恩施4個(gè)不同地區(qū)的野葛為實(shí)驗(yàn)材料。選擇盛花期間的藤條帶回實(shí)驗(yàn)室，作為實(shí)驗(yàn)材料備用。

1.2測(cè)定方法

采用TTC法、I-KI法和醋酸洋紅染色法進(jìn)行花粉活性測(cè)定，具體參照《植物生理生化試驗(yàn)原理和技術(shù)》，染色后置于顯微鏡下觀察，試驗(yàn)重復(fù)3次以上。

2結(jié)果和分析

2.1TTC法測(cè)定花粉活性

試驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，4個(gè)不同地區(qū)野葛花的花粉活力均隨著時(shí)間的延長(zhǎng)，經(jīng)歷了從弱變強(qiáng)再變?nèi)踹@么一個(gè)過(guò)程，且花粉活力在0-20d內(nèi)呈現(xiàn)出上升的趨勢(shì)，最高染色率約為35%，在20-35d內(nèi)花粉活力保持在一個(gè)最高水平，在第35d后，花粉活力開(kāi)始下降。在4個(gè)地區(qū)中，江西橫峰的花粉活力最高，其次為湖南桃源和湖北恩施，而四川阿壩的花粉活力最低。在染色的過(guò)程中，花粉細(xì)胞出現(xiàn)了紅色、淡紅色和無(wú)色3種顏色反應(yīng)，且隨著時(shí)間的延長(zhǎng)，細(xì)胞的染色率逐漸下降。

2.2I-KI法測(cè)定花粉活性

I-KI法測(cè)定野葛花花粉活性時(shí)也經(jīng)歷了從弱變強(qiáng)再變?nèi)踹@樣一個(gè)過(guò)程，但是我們發(fā)現(xiàn)，4個(gè)地區(qū)的花粉染色率均不高，活力最高時(shí)的染色率約為8%左右，遠(yuǎn)低于TTC法的染色率，且在染色過(guò)程中，理論上應(yīng)該出現(xiàn)藍(lán)色和褐色2種反應(yīng)顏色，但是在顯微鏡下沒(méi)有觀察到明顯的顏色變化，因此I-KI法不適合測(cè)定野葛花的花粉活力。

2.3醋酸洋紅染色法測(cè)定花粉活性

醋酸洋紅染色法也可以較好地測(cè)定出野葛花的花粉活力，4個(gè)不同地區(qū)的花粉活力同樣呈現(xiàn)出從弱變強(qiáng)再變?nèi)醯倪^(guò)程，且江西橫峰的花粉活力依然最高，約為30%左右，而四川阿壩的花粉活力還是最低。

3討論

測(cè)定花粉活性的方法有很多種，常用的有TTC法、I-KI法和醋酸洋紅染色等方法。本研究利用以上3種方法對(duì)4個(gè)不同地區(qū)野葛花粉活性進(jìn)行了比較，結(jié)果發(fā)現(xiàn)TTC法和醋酸洋紅染色法比較適合野葛的花粉染色，而I-KI法則不太適合野葛的花粉染色。在4個(gè)地區(qū)中，發(fā)現(xiàn)江西橫峰的花粉活性最高，四川阿壩的花粉活性最低，分析可能是因?yàn)樗拇ò挝挥谒拇ㄎ鞅辈浚c青海、甘肅交界，海拔較高，而江西橫峰位于江西省東北部，海拔較低，不同地理?xiàng)l件下采集的品種之間存在著一定的地理差異，這種地理?xiàng)l件差異造成花粉活性之間也存在著差異。