馬冬菁

（遼寧省林業(yè)科學(xué)研究院，遼寧沈陽(yáng) 110032）

黑果腺肋花楸的組織培養(yǎng)快繁技術(shù)

馬冬菁

（遼寧省林業(yè)科學(xué)研究院，遼寧沈陽(yáng) 110032）

為建立黑果腺肋花楸高效的離體再生體系，對(duì)其組織培養(yǎng)快繁技術(shù)進(jìn)行系統(tǒng)研究。結(jié)果表明：以莖尖和幼嫩莖段為外植體，最佳誘導(dǎo)培養(yǎng)基為MS+6-BA1 mg·L-1+NAA0.5 mg·L-1，誘導(dǎo)率均在90%以上；最佳增殖培養(yǎng)基MS+6-BA1 mg·L-1+NAA0.2 mg·L-1，增殖系數(shù)達(dá)9.0；最佳生根培養(yǎng)基為1/2MS+ABT 6.0 mg·L-1，生根率達(dá)100%。

黑果腺肋花楸；組織培養(yǎng)；快速繁殖

黑果腺肋花楸Aronia melanocarpa系薔薇科腺肋花楸屬落葉灌木，漿果，果實(shí)甜酸略微澀，富含黃酮、花青素和多酚等物質(zhì)，其提取物對(duì)治療心臟病、高血壓等心腦血管疾病有特效。在歐美和東亞地區(qū)，該樹(shù)種在園林綠化方面的應(yīng)用非常廣泛；由果實(shí)加工的藥品、保健飲料和食品在市場(chǎng)上非常普及和流行。該樹(shù)種適應(yīng)性強(qiáng)、結(jié)果早、經(jīng)濟(jì)價(jià)值高，無(wú)論作為特種經(jīng)濟(jì)林栽培，還是用于園林綠化，都具有廣闊的市場(chǎng)前景。因此，開(kāi)展該樹(shù)種的組織培養(yǎng)快繁技術(shù)研究，為該樹(shù)種的快速開(kāi)發(fā)推廣奠定了技術(shù)基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

遼寧省林業(yè)科學(xué)研究院鳳城苗圃引進(jìn)栽植的2～3年生黑果腺肋花楸扦插苗，剪取幼嫩枝條作為外植體。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 外植體的消毒處理

將外植體去掉葉片，用清水沖洗2～3 h；剪取黑果腺肋花楸的莖尖和帶腋芽的莖段部位，切割成長(zhǎng)3～5 cm的材料；先用稀釋15倍的潔爾滅溶液浸泡3 min，再用流水沖洗30 min左右；置于超凈工作臺(tái)上用70%的酒精加兩滴土溫20消毒40 s，用無(wú)菌水沖洗3次后，再用濃度0.1%HgCl2浸泡5～7 min，無(wú)菌水沖洗5次后放在培養(yǎng)皿中，切成1.0～2.0 cm的單芽備用。

1.2.2 培養(yǎng)基的篩選

誘導(dǎo)培養(yǎng)基為MS+6-BA 1.0 mg·L-1+NAA 0.5 mg·L-1；繼代培養(yǎng)以MS為基礎(chǔ)培養(yǎng)基，分別添加 6-BA(0.5、1.0 mg·L-1)和 NAA(0.1、0.2、0.3、0.5 mg·L-1)共8個(gè)處理，各接種15個(gè)單芽莖段，培養(yǎng)30 d后統(tǒng)計(jì)不同激素濃度對(duì)增殖效果的影響；壯苗培養(yǎng)基為6-BA0.15 mg·L-1+NAA0.1 mg·L-1；生根培養(yǎng)基以1/2 MS為基礎(chǔ)，添加生根粉ABT（2、4、6 mg·L-1）、IBA(0.1、0.2、0.5 mg·L-1)和NAA(0.1、0.2、0.5 mg·L-1)共12個(gè)處理，20 d后觀察生根情況，統(tǒng)計(jì)生根率和生長(zhǎng)狀況等指標(biāo)。上述培養(yǎng)基均添加蔗糖30 g·L-1，瓊脂粉6 g·L-1，pH值5.8。培養(yǎng)溫度(25±2)℃，每日光照16 h，黑暗8 h，光照強(qiáng)度為2 000～2 500 lx。

1.2.3 生根苗的馴化移栽

當(dāng)試管苗長(zhǎng)至5 cm左右、苗根長(zhǎng)1.5 cm時(shí)，把生根瓶苗放在室內(nèi)自然光下煉苗2～3 d，打開(kāi)封口膜，控制溫度在15～26℃、濕度≥60%，向瓶?jī)?nèi)噴少量水，瓶苗葉片濕潤(rùn)即可，使瓶苗接觸有菌環(huán)境；2 d后將生根苗從瓶中取出，用自來(lái)水沖洗凈根部培養(yǎng)基，以避免移栽后爛根；然后將組培苗移栽到用0.1%高錳酸鉀消毒過(guò)的裝有細(xì)河沙和珍珠巖（2∶1）的育苗穴盤(pán)中，噴施10%(體積濃度)的蒸騰抑制劑[1]，遮蔭、澆水，保持濕度70%以上，光照1 500～2 000lx，20 d后揭開(kāi)覆蓋物，成活率達(dá)90%以上。

2 結(jié)果與分析

2.1 芽的誘導(dǎo)分化

黑果腺肋花楸不同的取材部位在誘導(dǎo)培養(yǎng)基上接種10 d后，芽開(kāi)始萌發(fā)，莖尖生長(zhǎng)較快，20 d后芽可伸長(zhǎng)至2～3 cm。對(duì)不同取材部位的芽誘導(dǎo)情況進(jìn)行了統(tǒng)計(jì)（表1），莖尖和幼嫩莖段的芽誘導(dǎo)率均在90%以上[2]。

表1 不同取材部位對(duì)黑果腺肋花楸芽誘導(dǎo)分化的影響

2.2 不同激素濃度配比對(duì)黑果腺肋花楸芽繼代增殖的影響

不同的激素濃度對(duì)黑果腺肋花楸芽的生長(zhǎng)有一定的影響。隨著激素水平的提高，芽的長(zhǎng)勢(shì)和增殖都在逐漸提高，當(dāng)6-BA濃度1.0 mg·L-1、NAA濃度0.3 mg·L-1時(shí)，逐漸出現(xiàn)玻璃化現(xiàn)象，莖芽的生長(zhǎng)質(zhì)量下降（表2）。而當(dāng)6-BA濃度為1.0 mg·L-1，NAA濃度為0.2 mg·L-1時(shí)增殖效果最好，增殖系數(shù)達(dá)到9.0。

表2 不同激素濃度對(duì)黑果腺肋花楸芽繼代增殖的影響

2.3 不同激素濃度對(duì)黑果腺肋花楸生根的影響

將組培苗壯苗培養(yǎng)后，接種到生根培養(yǎng)基上，10 d左右莖段基部產(chǎn)生根原基，20 d后長(zhǎng)出4～6條白色嫩根，平均根長(zhǎng)約3.5 cm，生根率達(dá)100%。由表3和表4可以看出，培養(yǎng)基1/2MS+ABT 6.0 mg·L-1的生根效果最好，根系發(fā)達(dá)，且苗長(zhǎng)勢(shì)好。

表3 IBA和NAA配比對(duì)黑果腺肋花楸苗生根的影響

表4 ABT濃度對(duì)黑果腺肋花楸苗生根的影響

3 結(jié) 論

以黑果腺肋花楸莖尖和幼嫩莖段作為外植體，70%的酒精加兩滴土溫20消毒40 s、0.1%HgCl2消毒5～7 min，接種在培養(yǎng)基MS+6-BA 1 mg·L-1+NAA 0.5 mg·L-1中的誘導(dǎo)率均在90%以上。最佳增殖培養(yǎng)基為MS+6-BA 1 mg·L-1+NAA 0.2 mg·L-1，增殖系數(shù)達(dá)9.0，苗木生長(zhǎng)旺盛，基部產(chǎn)生大量叢生芽。最佳生根培養(yǎng)基為1/2MS+ABT 6.0 mg·L-1，生根效果顯著，生根率達(dá)100%，根系發(fā)達(dá)，苗木粗壯。生根苗馴化后移栽到裝有基質(zhì)細(xì)河沙和珍珠巖（2∶1）的育苗穴盤(pán)中，成活率在90%以上。

［1］葉景豐.美國(guó)白蠟組培快繁技術(shù)研究[J].林業(yè)實(shí)用技術(shù)，2010，（11）：30-31.

［2］陳罡.貼梗海棠組培快繁技術(shù)研究[J].北方園藝，2008，（8）：186-187.

（責(zé)任編輯：張素清）

S793.9

A

1001-1714（2017）05-0034-02

2017-03-30

馬冬菁（1979-），女，高級(jí)工程師，主要從事林木組培技術(shù)研究。E-mail：413577543@qq.com。