孫學(xué)亮　季延濱　白東清

摘要：通過(guò)蝦青素與不同載體（磷脂、維生素E）的組合方式，研究蝦青素混合物對(duì)鸚鵡魚(yú)著色和生化指標(biāo)的影響。以540尾1齡健康的鸚鵡魚(yú)[體質(zhì)量為（8.23±0.52）g]為研究對(duì)象，試驗(yàn)時(shí)間為30 d。試驗(yàn)分為3個(gè)組：A組為添加1%蝦青素+0.3%維生素E；B組為添加1%蝦青素+0.3%磷脂；C組為對(duì)照組（未添加任何色素和載體）。結(jié)果表明，與對(duì)照組相比，A、B組均使鸚鵡魚(yú)的體色顯著變紅；蝦青素混合物對(duì)鸚鵡魚(yú)具有一定的抗氧化能力，A、B、C組SOD活性均存在顯著差異，其中A組的SOD活性顯著高于C組的SOD活性，C組的SOD活性又顯著高于B組的SOD活性；A、B、C組CAT活性由高到低依次為A組﹥B組﹥C組；A、C組的MDA含量顯著低于B組的MDA含量，A、C組間差異不顯著。由此可見(jiàn)，A組的抗氧化效果最好。蝦青素混合物對(duì)血清中ALT、AST活性也存在差異：A、B組血清中的ALT、AST活性均顯著低于C組的ALT、AST活性，A、B 2組差異不顯著。總之，飼料中添加蝦青素與維生素E、磷脂這2種載體的組合方式對(duì)鸚鵡魚(yú)著色與生長(zhǎng)效果較好。

關(guān)鍵詞：鸚鵡魚(yú)；著色；生化指標(biāo)；蝦青素；磷脂；抗氧化；血清

中圖分類(lèi)號(hào)： S963.73+5文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A

文章編號(hào)：1002-1302（2017）14-0143-03

鸚鵡魚(yú)別稱(chēng)鸚嘴魚(yú)，屬動(dòng)物界脊椎動(dòng)物門(mén)脊椎動(dòng)物亞門(mén)鱸形目鸚嘴魚(yú)科，是由紅魔鬼父本和紫紅火口母本雜交得到的新品種，體色決定其觀賞價(jià)值和經(jīng)濟(jì)價(jià)值。

近年來(lái)，增色劑在觀賞魚(yú)的養(yǎng)殖中被廣泛應(yīng)用。何培民等把螺旋藻添加到飼料中來(lái)投喂錦鯉，隨著螺旋藻投喂量的增加，錦鯉體色逐漸加深[1]。在基礎(chǔ)飼料中添加類(lèi)胡蘿卜素喂養(yǎng)珍珠瑪麗魚(yú)、紅劍尾魚(yú)，它們的體色明顯艷麗[2]。蝦青素是水產(chǎn)養(yǎng)殖上被廣泛應(yīng)用的一種類(lèi)胡蘿卜素著色劑[3]。蝦青素具有抗氧化、預(yù)防腫瘤、提高免疫力、提高肌肉性能等許多重要的生理功能。金征宇等將蝦青素應(yīng)用于羅氏沼蝦中，效果十分明顯，改善了羅氏沼蝦的體色、提高了蝦殼中類(lèi)胡蘿卜素的含量[4]；謝劍華等研究發(fā)現(xiàn)，蝦青素可顯著提高日本沼蝦的免疫力[5]。蝦青素在金魚(yú)等觀賞魚(yú)類(lèi)[6]及真鯛[7]、金頭鯛[8]、北極紅點(diǎn)鮭[9]、虹鱒[10]、大西洋鮭[11]等食用魚(yú)類(lèi)均有著色作用。

本試驗(yàn)將蝦青素與磷脂、維生素E組合形成蝦青素混合物，揭示其對(duì)鸚鵡魚(yú)著色和生化指標(biāo)的影響規(guī)律，旨在探索蝦青素的最適添加量以及合理搭配，并以此指導(dǎo)生產(chǎn)，為以后的研究奠定理論基礎(chǔ)。

1材料與方法

1.1試驗(yàn)材料

1.1.1試驗(yàn)用魚(yú)

鸚鵡魚(yú)，體質(zhì)量為（8.23±0.52）g，外觀正常，體質(zhì)健壯，共540尾。分別放在藍(lán)色長(zhǎng)方形塑料箱（70 cm×50 cm×50 cm）中，每箱60尾。暫養(yǎng)3 d，使其適應(yīng)試驗(yàn)環(huán)境，減少應(yīng)激反應(yīng)。暫養(yǎng)期間水溫為28～32 ℃。

1.1.2試驗(yàn)藥物

蝦青素（添加含量為1%，鄭州華仁醫(yī)藥有限公司）、磷脂（添加含量為0.3%，北京源華美磷脂科技有限公司）、維生素E（添加含量為0.3%，鄭州四陽(yáng)化工產(chǎn)品有限公司）。

1.2試驗(yàn)方法

1.2.1試驗(yàn)方法

按照飼料中所添加的載體不同，試驗(yàn)設(shè)3組，分別為A、B、C，每組設(shè)3個(gè)重復(fù)，分別放在藍(lán)色塑料箱中，每箱60尾，實(shí)際水體積為120 L。其中，A組表示添加1%蝦青素+0.3%維生素E；B組表示添加1%蝦青素+03%磷脂；C組表示對(duì)照（基礎(chǔ)飼料，未添加任何色素和載體）。水溫保持在（30±2）℃，每日投喂3次，日投餌量為體質(zhì)量的4%～7%，試驗(yàn)時(shí)間為30 d。

1.2.2血清和組織勻漿的制備

試驗(yàn)結(jié)束后，每箱隨機(jī)抽取10尾采血，采取尾部抽血，于4 500 r/min、4 ℃下離心30 min，取血清備用。

取200 mg左右的肝胰臟在冰冷的生理鹽水中漂洗，除去血液，濾紙?jiān)嚫桑靡埔浩骷尤?倍于組織塊質(zhì)量的預(yù)冷勻漿介質(zhì)（0.86%的生理鹽水），在勻漿器中進(jìn)行勻漿，用勻漿管在冰水中勻漿15 min，于4 500 r/min、4 ℃下離心15 min，取上清液備用。

1.2.3測(cè)定的指標(biāo)

超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，簡(jiǎn)稱(chēng)SOD）活性、丙二醛（malondialdehyde，簡(jiǎn)稱(chēng)MDA）含量、過(guò)氧化氫酶（catalase，簡(jiǎn)稱(chēng)CAT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（aspartate aminotransferase，簡(jiǎn)稱(chēng)AST/GOT）、丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶（alanine aminotransferase，簡(jiǎn)稱(chēng)ALT/GPT）活性、類(lèi)胡蘿卜素含量的測(cè)定試劑盒，均由南京建成生物工程研究所生產(chǎn)；總蛋白含量的測(cè)定試劑盒由中生北控生物科技有限公司生產(chǎn)。

用便攜式色差儀HP-2132分別測(cè)量試驗(yàn)前后的血鸚鵡的亮度（L*）、紅色（a*）、黃色（b*），每箱隨機(jī)抽取10尾。測(cè)量前擦干魚(yú)體表面附著的水，根據(jù)儀器測(cè)量魚(yú)體的背部得出數(shù)據(jù)。

1.3數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)

采用Excel常規(guī)處理數(shù)據(jù)后，利用SPSS 13.0軟件進(jìn)行方差分析。本試驗(yàn)所有數(shù)據(jù)均以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”（x[TX-*5]±s）表示。

2結(jié)果與分析

2.1蝦青素混合物對(duì)鸚鵡魚(yú)抗氧化能力的影響

由表1可知，A組（1%蝦青素+0.3%維生素E）的SOD活性顯著高于B（1%蝦青素+0.3%磷脂）、C（對(duì)照）組的SOD活性，C組SOD活性顯著高于B組的SOD活性，A、B、C組的SOD活性均存在顯著差異，A組的SOD活性最高；A、B、C組的CAT活性均存在顯著差異，A組的CAT活性最高，顯著高于B、C組的CAT活性，B組的CAT活性顯著高于C組的CAT活性；A、C組的MDA含量顯著低于B組的MDA含量，A、C組的MDA含量差異不顯著。

2.2蝦青素混合物對(duì)血清中ALT、AST活性的影響

由表2可知，A、B、C組血清中ALT活性由低到高的順序?yàn)锳組﹤B組﹤C組，其中C組血清中ALT活性顯著高于A、B組的ALT活性，A、B組間ALT活性差異不顯著；A、B、C組血清中AST活性由高到低的順序C組﹥B組﹥A組，其中C組血清中AST活性顯著高于A、B組的AST活性，A、B組間血清中AST活性差異不顯著。

2.3蝦青素混合物對(duì)鸚鵡魚(yú)類(lèi)胡蘿卜素含量的影響

由表3可知，在肝胰臟中，C組的類(lèi)胡蘿卜素含量顯著低于A、B組的類(lèi)胡蘿卜素含量，A、B組間類(lèi)胡蘿卜素含量差異不顯著；在肌肉中，C組的類(lèi)胡蘿卜素含量最低，顯著低于A、B組的類(lèi)胡蘿卜素含量，A、B組間類(lèi)胡蘿卜素含量差異不顯著；在皮膚中，3組的類(lèi)胡蘿卜素的含量由高到低依次為A組﹥B組﹥C組，其中A、B組的類(lèi)胡蘿卜素含量分別顯著高于C組的類(lèi)胡蘿卜素含量，A、B組間類(lèi)胡蘿卜素含量差異不顯著。由此可以看出，3種組織中A、B組的類(lèi)胡蘿卜素含量均顯著高于對(duì)照組。3種組織中著色效果比較，由易到難的順序?yàn)楦我扰K﹥皮膚﹥肌肉，說(shuō)明肌肉相比其他2種組織更不易著色，肝胰臟最容易著色。

2.4蝦青素混合物對(duì)鸚鵡魚(yú)體表色素的影響

由表4可知，A、B、C組間鸚鵡魚(yú)體表的L*值均存在顯著差異，其中A組的L*值顯著高于B、C組的L*值，C組的L*值顯著高于B組的L*值；鸚鵡魚(yú)體表的a*最大值出現(xiàn)在A組，C組的a*值顯著低于A、B組的a*值，A、B組差異不顯著；A、B、C組間鸚鵡魚(yú)體表的b*值均存在顯著差異，其中B組的b*值顯著高于A、C組的b*值，A組的b*值顯著高于C組的b*值。由此可知，蝦青素與維生素E組合形成的蝦青素混合物能夠使鸚鵡魚(yú)顯著變紅，著色效果較好。

3討論

3.1蝦青素混合物對(duì)鸚鵡魚(yú)抗氧化能力的影響

SOD、CAT是生物體內(nèi)2種相互關(guān)聯(lián)的抗氧化酶，可使生物機(jī)體免受氧化傷害[12]。同時(shí)測(cè)定MDA的含量常?？梢苑从硻C(jī)體內(nèi)脂質(zhì)過(guò)氧化的程度，間接反映出細(xì)胞損傷的程度[13]。本試驗(yàn)中A組SOD、CAT活性最高，MDA含量最低，說(shuō)明蝦青素具有很好的抗氧化能力。裴素蕊等分別在凡納濱對(duì)蝦、斑節(jié)對(duì)蝦的飼料中添加蝦青素，均證實(shí)蝦青素具有很強(qiáng)的抗氧化能力[14-15]。維生素E是動(dòng)物體內(nèi)阻斷自由基鏈反應(yīng)的脂溶性抗氧化劑之一，能使組織器官免受自由基損傷，具有很強(qiáng)的抗氧化效果[16-17]。周立斌等研究結(jié)果表明，在美國(guó)紅魚(yú)飼料中維生素E的適宜添加量為1 028 mg/kg，具有一定的抗氧化效果[18]。關(guān)于黃顙魚(yú)的研究中，在維生素E的添加量為125、175 mg/kg時(shí)，血漿中丙二醛（MDA）含量顯著降低（P<005），SOD活性比不添加組略高[19]。蔡中華等研究結(jié)果表明，維生素E不僅本身具有抗氧化功能，還可誘導(dǎo)機(jī)體顯著增加SOD產(chǎn)生的能力，并顯著降低氧化代謝產(chǎn)物MDA含量[20]。

綜上所述，由于蝦青素和維生素E均能提高SOD、CAT的活性并且同時(shí)抑制MDA含量的增加，因此蝦青素與維生素E組合形成的蝦青素混合物（A組）對(duì)鸚鵡魚(yú)的抗氧化性能力較強(qiáng)，效果較好。

3.2蝦青素混合物對(duì)鸚鵡魚(yú)血清中生化指標(biāo)的影響

ALT、AST被廣泛用作肝臟損害的標(biāo)志物。AST、ALT是反映肝臟健康狀態(tài)最敏感的酶學(xué)指標(biāo)，對(duì)肝病的診斷治療具有重要價(jià)值。本試驗(yàn)結(jié)果表明，A、B組血清中的的ALT、AST活性均顯著低于C組的ALT、AST活性，A、B組間的ALT、AST活性無(wú)顯著差異。飼料中添加蝦青素和維生素E對(duì)血清中ALT、AST活性的影響十分明顯，說(shuō)明蝦青素和維生素E對(duì)肝臟有一定的保護(hù)作用。裴俊鵬等將蝦青素加入到小鼠的飼料中發(fā)現(xiàn)，蝦青素可以降低小鼠血清中ALT、AST活性，從而改善乙醇性肝損傷[21]。Nakano等用添加了10.87 g/kg蝦青素的飼料飼喂虹鱒后，顯著降低了血清ALT、AST的活性，從而起到保護(hù)虹鱒肝臟的作用[22]。

3.3蝦青素混合物對(duì)鸚鵡魚(yú)著色指標(biāo)的影響

魚(yú)類(lèi)的體色主要由類(lèi)胡蘿卜素決定，與其生理狀態(tài)和環(huán)境因素也有關(guān)系。魚(yú)類(lèi)自身不能合成類(lèi)胡蘿卜素，只能從食物中吸收、沉淀和轉(zhuǎn)化。影響?hù)~(yú)類(lèi)著色的原因有很多，包括魚(yú)類(lèi)遺傳特性、所處的環(huán)境、喂食的飼料以及魚(yú)類(lèi)自身的生理狀態(tài)等。

結(jié)果表明，鸚鵡魚(yú)在肝臟、肌肉以及皮膚中A、B組的類(lèi)胡蘿卜素含量均顯著高于C組的類(lèi)胡蘿卜素含量，A、B組間無(wú)顯著差異，說(shuō)明飼料中添加蝦青素和載體對(duì)鸚鵡魚(yú)類(lèi)胡蘿卜素含量的影響十分明顯，蝦青素與維生素E、磷脂分別組合形成的蝦青素混合物使鸚鵡魚(yú)類(lèi)胡蘿卜素含量較高。綜上所述，用蝦青素混合物喂養(yǎng)的鸚鵡魚(yú)中類(lèi)胡蘿卜素含量均高于基礎(chǔ)飼料，同時(shí)鸚鵡魚(yú)中類(lèi)胡蘿卜素含量由高到低依次為肝胰臟﹥皮膚﹥肌肉，說(shuō)明肝臟和皮膚更容易著色。王海英等研究表明，添加蝦青素可顯著提升鸚鵡魚(yú)的體色，而添加螺旋藻對(duì)其體色影響不大[23]。張曉紅等研究表明，隨著在飼料中蝦青素添加量的增加，鸚鵡魚(yú)皮膚類(lèi)胡蘿卜素含量逐漸升高[24]。劉金海報(bào)道，維生素E對(duì)鸚鵡魚(yú)著色也具有一定的幫助[25]。結(jié)果說(shuō)明，蝦青素對(duì)鸚鵡魚(yú)的著色效果更好。

鸚鵡魚(yú)體表的L*值由大到小依次為A組﹥C組﹥B組，說(shuō)明使用添加蝦青素和維生素E的飼料喂養(yǎng)的鸚鵡魚(yú)體表亮度明顯高于其他2組，蝦青素和維生素E混合的飼料喂養(yǎng)的鸚鵡魚(yú)亮度更高。A、B組鸚鵡魚(yú)體表的a*值均顯著高于C組的a*值，說(shuō)明使用A、B組的飼料喂養(yǎng)的鸚鵡魚(yú)顏色更紅，添加了蝦青素的飼料著色效果更好；B組鸚鵡魚(yú)體表的b*值顯著高于A、C組的b*值，說(shuō)明添加蝦青素和磷脂載體的飼料效果更顯著，相比其他2組顏色更偏黃一些。

4結(jié)論

蝦青素與維生素E載體組合形成的混合物對(duì)鸚鵡魚(yú)有較強(qiáng)的抗氧化能力，蝦青素對(duì)鸚鵡魚(yú)具有一定的抗氧化作用，對(duì)鸚鵡魚(yú)的著色效果較好。蝦青素與維生素E、磷脂這2種載體組成的混合物對(duì)鸚鵡魚(yú)的肝臟具有一定的保護(hù)作用。

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