劉麗英程延慶

1. 哈爾濱樂泰藥業(yè)有限公司 150000；2.哈爾濱弗曼德生物科技有限公司 150000

歸芪參膠囊功效成分、含量及檢驗方法

劉麗英1程延慶2

1. 哈爾濱樂泰藥業(yè)有限公司 150000；2.哈爾濱弗曼德生物科技有限公司 150000

歸芪參膠囊是一種能夠增強免疫力的保健食品，從中醫(yī)的角度來看，一類人群存在氣血不足，免疫力低下，使用歸芪參膠囊能夠有效的緩解這一癥狀，本產(chǎn)品的配方是以當(dāng)歸、黃芪、枸杞子、黨參為主，在經(jīng)過了一系列的處理之后，制成的制劑，對于改善免疫力低下有著重要的作用。黃芪甲苷在歸芪參膠囊中是標(biāo)志性成分，本文就是對歸芪參膠囊中的標(biāo)志性成分進(jìn)行質(zhì)量研究，用以制定適合控制產(chǎn)品質(zhì)量的標(biāo)準(zhǔn)。

歸芪參膠囊；黃芪甲苷；質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

黃芪甲苷是一種從黃芪中提取出來的一種物質(zhì)，這種物質(zhì)也被稱為超級黃芪多糖。黃芪甲苷有著增強人體免疫力的作用，也能夠不斷的提高機體的抗病能力，這種物質(zhì)是一種結(jié)晶粉末。歸芪參膠囊有著補氣養(yǎng)血的特點，對于免疫力低下的亞健康人群有著重要的作用。本品中的黃芪甲苷是質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中極為重要的。本文就是對歸芪參膠囊中黃芪甲苷質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行分析，為相關(guān)的研究提供借鑒。

一、黃芪甲苷的測定

（一）儀器、試藥及試劑

儀器：島津LC 10ATvp-SPD高效液相色譜儀；蒸發(fā)光檢測器；色譜柱：C18（5μm.4.6mm×150mm）；對照品：黃芪甲苷；批號：0781-9807；賽多利斯CPA225D分析天平。

試劑：乙腈，色譜純，山東禹王，其余的試劑是市售分析純。

（二）黃芪甲苷含量測定：高效液相色譜法

參考中國藥典2015年版的黃芪顆粒含量測定方法[1]來進(jìn)行黃芪甲苷含量的測定的，通過相關(guān)的系統(tǒng)適用性試驗與色譜條件來進(jìn)行試驗。使用的色譜柱的填充劑主要是以十八烷基硅烷鍵合硅膠為主，流動相：乙腈-水（35：65），理論板數(shù)是按照黃芪甲苷峰來進(jìn)行相應(yīng)的計算的，理論板數(shù)不能夠低于 4000。對照品溶液在制備的過程中，需要取相應(yīng)的黃芪甲苷對照品，對照藥品適量，精密稱定，加入甲醇，制成 0.1mg/ml溶液，作為對照品溶液。供試品溶液在制備的過程中，取本品裝量差異下的內(nèi)容物研細(xì)，取2.5g，進(jìn)行精密稱定，精密加水 50ml，稱定重量之后，進(jìn)行超聲處理，在超聲處理的過程中，要注意時間的控制，將時間控制在30min左右，之后再進(jìn)行稱定，使用水來補足所失去的重量，進(jìn)行搖勻和離心處理。精密量取相應(yīng)的續(xù)率液25ml，使用水飽和的正丁醇進(jìn)行振搖處理，提取4次，每一次要稱取25ml，合并正丁醇提取液，使用氨試液洗滌3次，每一次 30ml，將洗液去除，正丁醇液蒸干，殘渣用甲醇溶液進(jìn)行溶解，將其轉(zhuǎn)移到5ml的量瓶中，加甲醇進(jìn)行稀釋到刻度，搖勻即得。

（三）專屬性考察

取歸芪參膠囊陰性樣品（不含黃芪藥材的樣品），照供試品溶液的方法，制備陰性供試品溶液。分別吸取對照品溶液、供試品溶液及陰性樣品溶液 20μl，照液相色譜法，注入液相色譜儀。記錄色譜圖。

結(jié)果表明：黃芪甲苷與供試品溶液中其它組分分離良好，輔料對黃芪甲苷的測定無干擾，方法的專屬性良好。

（四）對照品的線性關(guān)系考察

精密稱10mg的黃芪甲苷對照品，將其放在25ml的量瓶中，使用甲醇進(jìn)行溶解并且定容，制得0.4mg/ml的對照品溶液，再分別精密量取1ml、2ml、3ml、6ml、8ml，將其放置在相應(yīng)的量瓶中，加入甲醇進(jìn)行定容，將其分別制成 0.04mg/ml、0.08mg/ml、0.16mg/ml、0.2mg/ml、0.32mg/ml的溶液，精密吸取各濃度的溶液以及供試品溶液20μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖。按照峰面積進(jìn)行含量的測定，以峰面積為縱坐標(biāo)，進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)，進(jìn)行回歸方程的計算。結(jié)果表明：黃芪甲苷濃度在0.04～0.32mg/ml范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。

（五）精密度

根據(jù)不同分析人員不同時間測定同一批樣品（批號：20151001批），結(jié)果見表1。

表1 含量精密度試驗

結(jié)論：不同分析人員之間的RSD為＜1%，說明本方法的精密度良好。

（六）重復(fù)性

分別精密稱取同一批樣品（批號：20151001批）各五份，按樣品含量測定方法測定，計算含量，結(jié)果見表2。

表2 含量重復(fù)性試驗

結(jié)論：重復(fù)測定，RSD為＜1%，說明本方法的精密度良好。

（七）回收率

供試品溶液制備：取本品裝量差異項下的內(nèi)容物，研細(xì)，精密稱取9份，每份1.3g，再分別加入對照品0.5mg，精密加水50ml，稱定重量，超聲處理30分鐘，再稱定重量，用水補足減失的重量，搖勻，離心，精密量取續(xù)濾液25ml，用水飽和的正丁醇振搖提取4次，每次25ml，合并正丁醇提取液，用氨試液洗滌3次，每次30ml，棄去洗液，分取正丁醇液蒸干，殘渣用甲醇溶解并轉(zhuǎn)移至5ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得。

對照品溶液的制備：取黃芪甲苷對照品適量，精密稱定，加甲醇制成0.1mg/ml的溶液，即得。

分別吸取對照品溶液、供試品溶液 20μl，照液相色譜法，注入液相色譜儀。記錄色譜圖。計算回收率，見表3。

表3 回收率試驗

結(jié)論：回收率均在97%-101%之間，可見準(zhǔn)確度較好。

二、結(jié)論

綜上所述，所確定的含量測定方法線性關(guān)系好，準(zhǔn)確度高，精密度良好，重復(fù)性良好，溶液穩(wěn)定性好，可有效地檢測出本品中黃芪甲苷的含量，因此確定本法為歸芪參膠囊中黃芪甲苷的含量測定方法，此法可供評價產(chǎn)品質(zhì)量的一個重要依據(jù)。

[1] 中國藥典2015年版 一部

R737.25

A

1672-5018（2017）01-201-01