楊麗紅

哈藥集團(tuán)三精制藥四廠(chǎng)有限公司 150000

試析HPLC法測(cè)定復(fù)方鋁酸鉍片中甘草酸含量

楊麗紅

哈藥集團(tuán)三精制藥四廠(chǎng)有限公司 150000

目的：對(duì)于復(fù)方鋁酸鉍片中甘草酸含量上的檢定與方法上的選擇。方法：采用實(shí)驗(yàn)技術(shù)方法對(duì)復(fù)方鋁酸鉍片中甘草酸含量進(jìn)行檢定，方法主要的選擇是HPLC法與C18色譜柱等方法。結(jié)果：在進(jìn)行考察過(guò)程中的線(xiàn)性關(guān)系具有良好的效果，加樣上的回收率結(jié)果也在設(shè)想的結(jié)果范圍內(nèi)。結(jié)論：實(shí)驗(yàn)成果上符合研究上的設(shè)想，并且達(dá)到了靈敏與準(zhǔn)確上的要求，實(shí)驗(yàn)較為成功。

復(fù)方鋁酸鉍片；甘草酸；HPLC

復(fù)方鋁酸鉍片在我國(guó)制定的藥典中的收錄記載為一種用于緩解胃部不適的藥劑，主要的的組成成分為鋁酸鉍、重質(zhì)碳酸鎂等元素，對(duì)于胃酸分泌過(guò)多而引發(fā)的胃痛具有良好的治療效果，對(duì)與慢性胃炎上的治療效果也值得一提。在元素組成的質(zhì)量中所占比例較大的成分是甘草浸膏，這種藥劑上的成分具有鎮(zhèn)痛與消炎的治療效果，并且針對(duì)于胃部上的主要治療作用是可以對(duì)胃液的過(guò)度分泌進(jìn)行抑制。但是在含量上的規(guī)定隨著醫(yī)學(xué)技術(shù)的進(jìn)步發(fā)生了很大的變化，基于對(duì)藥品質(zhì)量上的監(jiān)控與患者的生命安全，現(xiàn)做出以下的實(shí)驗(yàn)進(jìn)行含量上的測(cè)定。

1 儀器與試劑

安捷倫1100型液相色譜儀。甲醇(GR),醋酸銨(AR),冰醋酸(AR)。甘草酸銨對(duì)照品(中國(guó)藥品生物制品檢定所批號(hào):110731-200511);復(fù)方鋁酸鉍片(廠(chǎng)家提供市售包裝,7個(gè)生產(chǎn)廠(chǎng)家,20批次)。

2.色譜條件

色譜柱:DiamonsilC18色譜柱(250mm×416mm,5μm);流動(dòng)相:甲醇-012molΠL 醋酸銨溶液-冰醋酸(67∶33∶1);流速:110mLΠmin;檢測(cè)波長(zhǎng):250nm;進(jìn)樣量:10μL。

3.溶液的配制

3.1 對(duì)照品溶液的配制

精密稱(chēng)取甘草酸銨對(duì)照品10mg,置50mL量瓶中,加流動(dòng)相45mL,超聲處理使溶解,取出,放冷,加流動(dòng)相稀釋至刻度,搖勻,即得(每 1mL含甘草酸銨012mg,折合甘草酸011959mg。)312 供試品溶液的配制取復(fù)方鋁酸鉍 10片,精密稱(chēng)定,研細(xì),精密稱(chēng)取 012g,置 25mL量瓶中,加流動(dòng)相20mL,超聲處理30min,放冷,加流動(dòng)相稀釋至刻度,搖勻,濾過(guò),取續(xù)濾液,就能得到相應(yīng)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

4.方法學(xué)驗(yàn)證

4.1 專(zhuān)屬性試驗(yàn)

根據(jù)處方將除甘草浸膏外的原料和輔料均勻混合,按制成20片的重量稱(chēng)取制備空白,并按312稱(chēng)取相當(dāng)于10片重量的混合均勻的空白樣品進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。在空白樣品的色譜圖中,未見(jiàn)與甘草酸銨對(duì)照品相應(yīng)的色譜峰位置處出現(xiàn)色譜峰,說(shuō)明本方法專(zhuān)屬性較強(qiáng)。

4.2 線(xiàn)性關(guān)系考察

精密稱(chēng)取甘草酸銨對(duì)照品2113,8153,12177,17104,20115,26164mg,分別置50mL容量瓶中,按311方法配制。注入液相色譜儀,以濃度為橫坐標(biāo)、峰面積為縱坐標(biāo)進(jìn)行線(xiàn)性回歸,得回歸方程:A=713E+6C-272917,r=019987。結(jié)果表明:本品在 010426～015328mg·mL-1范圍內(nèi)線(xiàn)性良好。

4.3 重復(fù)性試驗(yàn) 取同一供試品溶液 10μL,重復(fù)進(jìn)樣 6次,RSD=1.3%。

4.4 穩(wěn)定性試驗(yàn)

進(jìn)行試驗(yàn)上的穩(wěn)定效果測(cè)量的過(guò)程中，需要進(jìn)行的步驟是將是試品上的溶液進(jìn)行上述方法的測(cè)定，測(cè)定的間隔時(shí)間需要控制在每隔一個(gè)小時(shí)檢定一次，將測(cè)定過(guò)程中呈現(xiàn)出的數(shù)據(jù)進(jìn)行峰面面積上的記錄，進(jìn)行了 5次檢定實(shí)驗(yàn)以后就可以將檢定的結(jié)果進(jìn)行基本的確定了，如果檢定呈現(xiàn)的結(jié)果數(shù)據(jù)RSD=014%上的話(huà)，可以直接進(jìn)行認(rèn)定，說(shuō)明藥品元素的穩(wěn)定性符合要求。

4.5 回收率試驗(yàn)

進(jìn)行藥品上的回收率實(shí)驗(yàn)時(shí)，需要將已測(cè)定好的供試品進(jìn)行提取，數(shù)量上的選擇最好是5份，在這5份供試品溶液中分別加入甘草酸銨已經(jīng)進(jìn)行溶解好的對(duì)照品，溶液上的含量對(duì)比標(biāo)準(zhǔn)是10mL，接著再取10mL的流動(dòng)相，將需要進(jìn)行提前準(zhǔn)備的試劑都整理好以后就可以按照上述實(shí)驗(yàn)的說(shuō)明進(jìn)行實(shí)驗(yàn)了，測(cè)定的結(jié)果一般情況下是不會(huì)與預(yù)想上的結(jié)果差很多的，將實(shí)驗(yàn)的結(jié)果進(jìn)行數(shù)據(jù)上的對(duì)比，實(shí)驗(yàn)的結(jié)果表明這個(gè)實(shí)驗(yàn)方法的回收具有良好的效果，可以對(duì)定量的上的要求進(jìn)行很好的滿(mǎn)足。

5 樣品測(cè)定

樣品的測(cè)定，需要將多家的藥品進(jìn)行抽樣的方式檢驗(yàn)，本次樣品上的測(cè)定參與廠(chǎng)家共有20個(gè)，所以抽取的樣品一共會(huì)有20批，檢定出的結(jié)果現(xiàn)已制作成一個(gè)可以進(jìn)行直接觀(guān)察的表格，見(jiàn)下表：

表1 回收率試驗(yàn)

表2 樣品測(cè)定結(jié)果

6.討論

上述的實(shí)驗(yàn)結(jié)果中，可以得到的數(shù)據(jù)是本次處方實(shí)驗(yàn)的結(jié)果是每片復(fù)方鋁酸鉍片藥劑中的甘草浸膏粉的含量是 0.3g，最近一版的《中國(guó)藥典》中的含量規(guī)定是含有甘草浸膏干燥品不得超過(guò)8%，如果進(jìn)行折算的處理以后就可以得到的含量是22毫克左右，由此可以看出，20批藥品中的片劑含量與規(guī)定上的標(biāo)準(zhǔn)存在較大的差距，但是如果結(jié)合中藥品種的限度進(jìn)行含量上的對(duì)比的話(huà)，就可以得到大多數(shù)的廠(chǎng)家藥劑上的含量結(jié)果與擬定的限度是不少于15毫克左右。

這種藥劑上的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)是不包括甘草潤(rùn)膏的質(zhì)量的，即使是制藥得廠(chǎng)家在次品的投料的方式上進(jìn)行轉(zhuǎn)變也不能達(dá)到國(guó)家的標(biāo)準(zhǔn)，含量上的控制也不能得到精確的監(jiān)控。所以制造出來(lái)的成品藥劑依然會(huì)出現(xiàn)質(zhì)量上的失控。從20批產(chǎn)品上的成分鑒定結(jié)果中，可以看出來(lái)有超過(guò)三分之一的廠(chǎng)家沒(méi)有達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)上的規(guī)定。所以依據(jù)本次實(shí)驗(yàn)的結(jié)果完全有必要將甘草浸膏的含量進(jìn)行相應(yīng)的控制。這樣的處理是對(duì)國(guó)家藥品的質(zhì)量上的保障，也是患者的生命安全負(fù)責(zé)。

甘草作為一種常用中藥，已被人們接受和使用，其主要成分是：甘草甜素、甘草甙、甘草類(lèi)黃酮、后幕比檀素、刺芒柄花素、槲皮素等。具有解毒，抗炎，鎮(zhèn)咳，抗腫瘤，抗?jié)?，抗菌等作用。同時(shí)，甘草甜素對(duì)艾滋病病毒具有抑制增殖作用；甘草次酸對(duì)骨髓瘤及腹水肝癌均有抑制作用。甘草酸具有明顯的抗利尿作用；甘草素、異甘草素具有抗?jié)兒徒獐d作用；甘草黃酮類(lèi)尚具有抗氧和抑菌作用。中醫(yī)藥認(rèn)為甘草味甘、平，是補(bǔ)脾益氣，止咳祉疾，緩急止痛，調(diào)和諸藥，解毒的良藥。美國(guó)FDA將甘草提取物列為安全無(wú)毒物質(zhì)?？茖W(xué)研究證明，甘草主要含有甘草酸和黃酮類(lèi)甘草甙（甘草甜素）。甘草提取物是一種具有抑菌、消炎、解毒、除臭等多種功能的添加劑。我們文章中提到的甘草酸是甘草中最主要的活性成分。甘草酸及其系列產(chǎn)品，對(duì)肉瘤、乳頭瘤病毒、癌細(xì)胞生長(zhǎng)有抑制作用，對(duì)艾滋病的抑制率更高達(dá)90%，有較強(qiáng)的增加人體免疫功能作用。

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R225.5+3

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1672-5018（2017）01-288-01