董錦蕾，張閃閃，王曉琴，張波*

（石河子大學(xué)藥學(xué)院/省部共建新疆特種資源植物藥重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，新疆 石河子，832002）

霜霉菌誘導(dǎo)葡萄葉中白藜蘆醇積累的氧化還原調(diào)控規(guī)律研究

董錦蕾，張閃閃，王曉琴，張波*

（石河子大學(xué)藥學(xué)院/省部共建新疆特種資源植物藥重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，新疆 石河子，832002）

本文針對(duì)霜霉菌侵染葡萄葉過(guò)程中植保素積累與活性氧調(diào)控規(guī)律開展研究。選取7月齡的紅地球葡萄葉片，鑒定并分離霜霉病菌對(duì)離體的葡萄葉片在20℃黑暗條件下進(jìn)行侵染處理。HPLC法分析侵染時(shí)間與白藜蘆醇的含量的時(shí)效關(guān)系，檢測(cè)侵染后細(xì)胞活性氧積累時(shí)效關(guān)系，分析茋類物質(zhì)合成途徑限速酶基因的表達(dá)時(shí)效關(guān)系，最后通過(guò)助氧化劑及抗氧化劑的正反驗(yàn)證來(lái)確定霜霉菌對(duì)葡萄白藜蘆醇的誘導(dǎo)規(guī)律。結(jié)果表明，霜霉菌侵染離體葡萄葉片活性氧與白藜蘆醇積累呈現(xiàn)時(shí)效關(guān)系的順序性，活性氧水平24 h時(shí)達(dá)到最高，白藜蘆醇葉鮮重含量72 h達(dá)到最高（59.46 μg/g）；侵染過(guò)程中白藜蘆醇合成途徑下相關(guān)酶STS基因表達(dá)明顯上調(diào)，而PAL、C4H和4CL的酶基因表達(dá)量在24 h或48 h最高；助氧化劑H2O2和FeCl3前處理組葉片白藜蘆醇含量增加，抗氧化劑NAC和GSH-EE前處理組白藜蘆醇含量減少，提示霜霉菌誘導(dǎo)白藜蘆醇積累與活性氧調(diào)控密切相關(guān)。

白藜蘆醇；霜霉菌；茋類合成途徑；ROS積累；美國(guó)紅地球葡萄

在植物與病原菌互作過(guò)程中，病原菌通過(guò)分泌酶或毒素類物質(zhì)實(shí)現(xiàn)侵染，植物則通過(guò)表達(dá)抗病基因，進(jìn)而產(chǎn)生抗菌物質(zhì)，從而來(lái)抵抗病原菌的侵染。正常生理?xiàng)l件下，植物機(jī)體內(nèi)ROS的產(chǎn)生與清除處于動(dòng)態(tài)平衡狀態(tài)，其內(nèi)環(huán)境氧化還原狀態(tài)是相對(duì)穩(wěn)定的，來(lái)維持機(jī)體的相對(duì)平衡。

但植物受外界刺激（如生物因素和非生物因素）時(shí)，這個(gè)平衡就會(huì)被打破，植物會(huì)應(yīng)激產(chǎn)生大量的ROS從而導(dǎo)致ROS水平迅速上升，這種 ROS的大量增加稱為氧化爆發(fā)。氧爆發(fā)是植物防衛(wèi)系統(tǒng)開啟的標(biāo)志之一，在逆境脅迫時(shí)其中以H2O2的含量為氧爆發(fā)最普遍特征[1]。如李欣龍等人[2]發(fā)現(xiàn)當(dāng)用霜霉菌侵染葡萄葉片時(shí)，白藜蘆醇的含量明顯增加且內(nèi)源性H2O2的含量也顯著升高。

白藜蘆醇（Resveratrol，簡(jiǎn)稱 Res），主要存在于虎杖、花生、葡萄等植物中。白藜蘆醇與植物抗病性具有密切的關(guān)系，在動(dòng)物體上又具有良好的抗炎、抗氧化等作用。

課題組前期研究白藜蘆醇運(yùn)用的誘導(dǎo)因子有UV[3]、AlCl3[4]、H2O2[5]和 FeCl3[6]等，在葡萄葉片及其愈傷組織中誘導(dǎo)白藜蘆醇的積累具有顯著效果，但各自都具有一些局限性，不能很好的被廣泛應(yīng)用。即使是作為植物中的基本元素且低毒所出現(xiàn)的FeCl3溶液，也不能夠?qū)邹继J醇完全從提取液中分離出來(lái)，主要原因是由于植物體內(nèi)本身含有大量的糖分。針對(duì)這一點(diǎn)，本文利用微生物發(fā)酵過(guò)程中需要大量的糖來(lái)維持發(fā)酵，從而誘導(dǎo)葡萄葉片中的茋類物質(zhì)。

在植物的生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中，茋類物質(zhì)不僅受到一些自然環(huán)境因素（氣候和環(huán)境）的影響，也會(huì)因?yàn)橐恍┥镆蜃佣苡绊懀绮≡那秩镜?。?dāng)植物受到病原菌侵染時(shí)，植物往往會(huì)表達(dá)其體內(nèi)的抗病基因使抗菌物質(zhì)積累從而抵御病原菌的侵染。

馬勉娣等[7]研究發(fā)現(xiàn)從不同品種不同地區(qū)分離大量的內(nèi)生真菌，外施內(nèi)生真菌也證明可以有效改變葡萄葉片的內(nèi)生菌群結(jié)構(gòu)和提高葡萄果實(shí)中一些次生代謝產(chǎn)物含量。Kretschmer等[8]通過(guò)研究葡萄果皮感染葡萄灰霉病后PAL和STS基因表達(dá)變化再次證實(shí)了葡萄果實(shí)Res合成能力與感染葡萄灰霉病的相關(guān)關(guān)系。Pezet R等[9]比較研究了不同葡萄品種對(duì)霜霉菌（Plasmopara viticola）的抗性，發(fā)現(xiàn)敏感品種感染病菌后產(chǎn)生的大量Res迅速糖基化為較小毒性的白藜蘆醇苷（piceid，PD），而抗性品種感染病菌后產(chǎn)生的大量Res則迅速氧化為更高毒性的白藜蘆醇聚合體（viniferins）。

作為葡萄的第一產(chǎn)區(qū)，找到一種合理有效的方法誘導(dǎo)葡萄中白藜蘆醇的積累，并提取出來(lái)在實(shí)際應(yīng)用中具有重要意義。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 同齡孢子囊的獲取

實(shí)驗(yàn)前1 d的20:00-21:00在石河子大學(xué)試驗(yàn)站葡萄園感病品種紅地球葡萄（Vitis vinifera L.cv.Red Globe）上采集典型新鮮的霜霉病(Plasmopara viticola(Berk.et Curtis)Berl.et de Toni)葉片，用流水沖洗10 min，直至霉層完全沖凈，室溫下放置10 min，使葉片表面無(wú)明顯水分，然后在保濕缸中20℃黑暗條件下保濕培養(yǎng)12 h，待病部生長(zhǎng)出新的孢子囊，即視為同齡孢子囊[10]。

1.1.2 供試品種

供試品種為感病品種紅地球葡萄。3年生紅地球葡萄苗（Vitis vinifera L.cv.Red Globe）購(gòu)自新疆石河子葡萄研究所，于石河子大學(xué)北區(qū)農(nóng)學(xué)實(shí)驗(yàn)站培育（25℃）；實(shí)驗(yàn)選取7月齡葡萄莖上距頂尖第4或第5葉（大小相近）摘取后（含葉柄）避光保存[11]。

1.2 試劑

白藜蘆醇標(biāo)準(zhǔn)品（色譜純，美國(guó)Sigma-Aldrich公司）；甲醇（AR，天津市富宇精細(xì)化工有限公司）、乙腈（色譜純，美國(guó) Fisher公司）；FeCl3（AR，天津盛奧化學(xué)試劑有限公司）；谷胱甘肽乙酯（GSH-EE，美國(guó)Sigma公司）、N-乙酰-L-半胱氨酸（美國(guó)Sigma公司）；其余試劑均為分析純，稀釋及空白處理中的水為實(shí)驗(yàn)室制備雙蒸水。

1.3 方法

1.3.1 霜霉菌對(duì)葡萄葉片的侵染

將制備的新鮮同齡孢子囊用小排筆刷到滅菌的平皿中加無(wú)菌水混勻制成懸液，將懸液倒入噴壺中備用。將滅菌的培養(yǎng)皿底部放置同底大小濾紙，并用無(wú)菌水潤(rùn)濕。將孢子囊懸液噴于葡萄葉片背面，置于培養(yǎng)皿中封口培養(yǎng)。培養(yǎng)條件：溫度20℃，濕度90%，于氣候箱中避光培養(yǎng)3～5 d，侵染過(guò)程如圖1所示。

圖1 感染霜霉菌的葉片（400×）Fig.1 Leaves infected with downy mildew（400×）

1.3.2 霜霉菌發(fā)酵液的制備

將培養(yǎng)好的新鮮同齡孢子囊用小排筆刷到滅菌的平皿中加無(wú)菌水混勻制成懸液，用血球計(jì)數(shù)的方法計(jì)算菌液中霜霉菌孢子數(shù)，調(diào)節(jié)菌液孢子數(shù)至107個(gè)/mL待用。

將孢子囊懸液噴灑于葡萄葉片背面，置于裝有50 mL滅菌水的三角錐形瓶中封口培養(yǎng)。培養(yǎng)條件：溫度20℃恒溫?fù)u床中避光震蕩培養(yǎng)0、24、48和72 h的相同時(shí)間點(diǎn)進(jìn)行取樣，液氮速凍后保存于-80℃冰箱備用。前處理實(shí)驗(yàn)分組與流程參考表1，其中 NAC的濃度為 1 mmol/L[12]，GSH-EE的濃度為 2 mmol/L（表 1）。

表1 抗氧化劑和助氧化劑的處理方式Tab.1 Antioxidants and Auxiliary oxidant treatment

1.3.3 葉片組織中ROS積累測(cè)定

定量檢測(cè)葉片組織中H2O2：提取葉片細(xì)胞間隙液，提取方法參考 Sutherland等人[13]，測(cè)定 560 nm（或595 nm）處吸光度值。具體方法參照上海生工生物工程股份有限公司的過(guò)氧化氫定量分析試劑盒推薦方法。

1.3.4 白藜蘆醇的提取和檢測(cè)

分別于0、24、48、72和96 h采集發(fā)酵后的葡萄葉片，將稱重后的葡萄葉片加適量甲醇，研磨，超聲提取20 min，振蕩離心，提取3次，再將3次提取的上清液收集蒸干，干樣品用甲醇溶解，并用甲醇定容至10 mL容量瓶中。通過(guò)HPLC法對(duì)葡萄葉片發(fā)酵液中的白藜蘆醇進(jìn)行定量分析，參照田春芳等[14]的方法。上述操作均在避光條件下進(jìn)行。用HPLC檢測(cè)：將制備的樣品（10000×g）離心10 min，取上清液過(guò)有機(jī)膜 （0.45 μm），0.2%磷酸水過(guò)水膜（0.45 μm）。色譜條件：采用二元梯度洗脫，流動(dòng)相B為雙蒸水（0.2%磷酸），A為乙腈，柱溫25℃，進(jìn)樣量20 μL，流速 1 mL/min，檢測(cè)波長(zhǎng) 306 nm。色譜柱Atlantis C18 （250 mm×4.6 mm，5 μm，Waters公司）。洗脫程序：0-4 min，80%～76%B；4-20 min，76%～69%B；20-25 min，69%～60%B。每個(gè)樣品重復(fù)3次。白藜蘆醇含量采用（μg/g鮮重）表示。

1.3.5 白藜蘆醇茋合酶基因的RT-PCR檢測(cè)

選取 0、24、48、72和 96 h發(fā)酵后的葡萄葉片，用RNAprep Pure多糖多酚植物總RNA提取試劑盒提取RNA（天根生化科技有限公司，北京），參考方法[15]；cDNA第一條鏈合成根據(jù)（PrimeScript R RT reagent Kit Perfect Real Time，TaKaRa）推薦方法進(jìn)行；根據(jù)參考文獻(xiàn)設(shè)計(jì)葡萄白藜蘆醇合成途徑關(guān)鍵酶的引物：苯丙氨酸解氨酶（PAL）、肉桂酸 -4-羥化酶（C4H）和4-肉桂酸輔酶A連接酶（4CL）及白藜蘆醇合成酶 （STS）[16]；內(nèi)參 18S rRNA[17]。RT-PCR反應(yīng)及電泳相關(guān)步驟參考文獻(xiàn)[17]，引物序列見(jiàn)表2。

表2 引物序列Tab.2 Primer sequences table

1.3.6 數(shù)據(jù)分析

所有實(shí)驗(yàn)測(cè)定均重復(fù)3次。結(jié)果統(tǒng)計(jì)和方差分析采用SPSS軟件進(jìn)行，結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)偏差（Mean values±S）表示。

實(shí)驗(yàn)組之間統(tǒng)計(jì)學(xué)差異利用t檢驗(yàn)，P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P＜0.01表示差異具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果與分析

2.1 霜霉菌處理時(shí)間與白藜蘆醇積累水平呈現(xiàn)正相關(guān)

結(jié)果表明，隨著處理時(shí)間的增加葡萄葉片中白藜蘆醇的含量呈現(xiàn)先升高再降低的趨勢(shì)（圖3），并且在處理72 h時(shí)白藜蘆醇積累量最高，其含量達(dá)到59.46 μg/g，是空白組的2.12倍；并呈時(shí)效依賴關(guān)系。

圖2 霜霉菌處理葡萄葉片后HPLC分析Fig.2 The HPLC analysis of grape leaves treated with downy mildew

圖3 霜霉菌對(duì)葡萄葉片中白藜蘆醇誘導(dǎo)的時(shí)效關(guān)系Fig.3 The time-effect of resveratrol induced by downy mildew in grape leaves

2.2 霜霉菌上調(diào)了葡萄茋類物質(zhì)合成途徑相關(guān)基因表達(dá)

圖4為茋類物質(zhì)合成途徑RT-PCR凝膠電泳圖。由圖4可知RT-PCR凝膠電泳圖表明隨著處理時(shí)間的增加，苯丙氨酸代謝公共途徑相關(guān)分子表達(dá)有明顯的變化。公共途徑中茋合酶（STS）基因隨著處理時(shí)間的增加而增加，在72 h時(shí)表達(dá)量最高，這與白藜蘆醇的積累時(shí)間一致，具有明顯的時(shí)效關(guān)系；而苯丙氨酸解氨酶（PAL）、肉桂酸 -4-羥化酶（C4H）和 4-肉桂酸輔酶 A連接酶（4CL）基因表達(dá)則隨著處理的增加在24 h或48 h時(shí)表達(dá)量最高。

圖4 霜霉菌對(duì)紅地球葡萄葉片中茋類物質(zhì)合成限速酶基因表達(dá)的影響Fig.4 The effect of downy mildew treatment on stilbene material synthesis rate-limiting enzymes gene expression in grape leaf

2.3 霜霉菌發(fā)酵后引起細(xì)胞ROS水平的升高

過(guò)氧化氫（最主要的ROS種類）被認(rèn)為是生物和非生物脅迫的過(guò)程中重要的信號(hào)分子，它從協(xié)調(diào)生理過(guò)程到應(yīng)激反應(yīng)起著多方面的作用。細(xì)胞內(nèi)源性H2O2在較低的濃度，它可以啟動(dòng)細(xì)胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)活動(dòng)，而在較高的濃度可能導(dǎo)致植物細(xì)胞的代謝功能障礙，同時(shí)誘導(dǎo)核酸，蛋白質(zhì)和脂質(zhì)損傷[18]。檢測(cè)葉片中H2O2含量可以看出霜霉菌侵染葉片24 h時(shí)葡萄葉片產(chǎn)生的內(nèi)源性的H2O2含量最高，達(dá)到2.77 μmol/g Fw，是空白處理組的2.7倍。隨著處理時(shí)間的增加，H2O2含量也逐漸減少，但整體水平高于空白處理組。

圖5 霜霉菌發(fā)酵葡萄葉片后細(xì)胞間隙液H2O2的含量Fig.5 Changes of H2O2contents in intercellular fluid of grape leaves after fermentation with downy mildew

2.4 氧化還原調(diào)控正反驗(yàn)證

由圖我們可以看出在霜霉菌處理時(shí)間72 h時(shí)，加預(yù)處理助氧化劑H2O2和FeCl3處理組的白藜蘆醇含量有所增加，而加了預(yù)處理抗氧化劑NAC和GSH-EE的處理組白藜蘆醇的含量則有所減少（圖6）。

圖6 霜霉菌在不同前處理?xiàng)l件下對(duì)葡萄葉片白藜蘆醇誘導(dǎo)的量效關(guān)系（72 h）Fig.6 The dose-effect of downy mildew on resveratrol content in grape leaves under different pretreatment conditions for 72 hours treatment

3 討論

本文采用紅地球葡萄葉片為研究材料進(jìn)行研究，通過(guò)定量霜霉菌檢測(cè)白藜蘆醇的含量來(lái)探究葡萄葉片中茋類物質(zhì)的積累與霜霉菌之間的關(guān)系。

在植物與病原真菌互作中，無(wú)論是抗病反應(yīng)還是感病反應(yīng)，雙方都會(huì)發(fā)生一系列形態(tài)上的變化。植物與病原真菌的互作分為親和互作（特異性侵染）與非親和互作（非特異性侵染）。在親和互作中，一些真菌利用植物表面的氣孔或創(chuàng)傷入侵，許多毒性較強(qiáng)的真菌還具有主動(dòng)入侵的機(jī)制，如以附著孢形式入侵植物，造成植物感染[19]。在非親和互作中，在侵染處形成與周圍健康組織差異明顯的局部細(xì)胞壞死－過(guò)敏反應(yīng)（hypersensitive reaction，HR），并伴隨有高水平的H2O2[20]。在葡萄中，Liswidowati等人認(rèn)為：在真菌誘導(dǎo)前，植物細(xì)胞內(nèi)基本上沒(méi)有茋類化合物這種物質(zhì)，就算有含量也很少。這一觀點(diǎn)與Pezet R等人[9]的研究結(jié)果類似，用Plasmopara viticola（霜霉?。┨幚砥咸讶~片后分離并檢測(cè)相關(guān)的芪類物質(zhì)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)經(jīng)處理后的葡萄葉片可以產(chǎn)生更多的芪類物質(zhì)，正常的對(duì)照組葡萄葉片檢測(cè)出的芪類物質(zhì)相對(duì)較少。

實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)霜霉菌對(duì)葡萄葉片中的茋類物質(zhì)具有顯著的誘導(dǎo)作用，且白藜蘆醇的積累呈現(xiàn)一定的時(shí)效依賴關(guān)系。在72 h時(shí)白藜蘆醇的積累量達(dá)到最高，鮮重為59.46 μg/g，是空白組的2.12倍。隨著時(shí)間的增加，ROS水平呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢(shì)，在24 h時(shí)達(dá)到最大值。檢測(cè)苯丙氨酸代謝途徑（白藜蘆醇合成途徑）相關(guān)酶基因[14]苯丙氨酸解氨酶（PAL）、肉桂酸-4-羥化酶（C4H）和4-肉桂酸輔酶A連接酶（4CL）以及茋合酶（STS）的表達(dá)，發(fā)現(xiàn)STS基因隨著處理時(shí)間的增加而增加，在72 h時(shí)表達(dá)量最高，這與白藜蘆醇的積累時(shí)間一致，具有明顯的時(shí)效關(guān)系；而PAL、C4H和4CL基因表達(dá)量則隨著處理時(shí)間的增加在24 h或48 h時(shí)表達(dá)量最高，這與葉片內(nèi)源性H2O2含量檢測(cè)結(jié)果一致。已有報(bào)道表明：茋類化合物通過(guò)合成植保素來(lái)參與植物的防御反應(yīng)，而ROS在植物防御過(guò)程中可能起著信號(hào)傳遞作用和直接刺激植物體發(fā)揮植保素的功能[21]。在霜霉菌侵染葡萄葉片的前期ROS大量積累，當(dāng)超過(guò)植物體內(nèi)ROS動(dòng)態(tài)平衡后，刺激機(jī)體開啟茋類物質(zhì)合成途徑，并在72 h時(shí)達(dá)到最高。另一方面，造成白藜蘆醇積累的原因可能是由于霜霉菌侵染正常葡萄葉片時(shí)，在侵染處形成與周圍健康組織差異明顯的局部細(xì)胞壞死區(qū)域，它能阻斷病原菌的營(yíng)養(yǎng)來(lái)源，限制其進(jìn)一步擴(kuò)散。然而，一些研究表明，細(xì)胞過(guò)敏性壞死并不足以阻止所有的病原真菌的擴(kuò)散，某些植物的抗病反應(yīng)過(guò)程也并不一定伴隨有HR產(chǎn)生[22]。Konate等在煙草花葉病毒感染的煙草葉片的緊鄰壞死斑周圍區(qū)域里發(fā)現(xiàn)一些病毒顆粒的存在[23]。因此，當(dāng)病原真菌突破壞死斑的界限后，周圍細(xì)胞中被強(qiáng)烈誘導(dǎo)的防御反應(yīng)就成為限制病原菌擴(kuò)散的主要屏障。然而，這種具有防御作用的物質(zhì)通常被稱之為植保素，白藜蘆醇是葡萄中最主要的植保素。

最后，根據(jù)課題組前期研究成果在實(shí)驗(yàn)中加入了抗氧化劑NAC、GSH-EE和助氧化劑H2O2來(lái)驗(yàn)證霜霉菌與白藜蘆醇的積累在氧化損傷角度的關(guān)系。結(jié)果表明，加了助氧化劑H2O2和FeCl3處理組的白藜蘆醇含量增加，而加了抗氧化劑NAC和GSH-EE的處理組白藜蘆醇的含量則減少。說(shuō)明霜霉菌同樣能夠造成植物氧化損傷，進(jìn)而刺激機(jī)體產(chǎn)生能夠保護(hù)機(jī)體的芪類物質(zhì)。

4 結(jié)論

白藜蘆醇被認(rèn)為是茋類物質(zhì)單體中最重要的生物活性物質(zhì)，對(duì)于植物抗病具有重要意義。霜霉菌處理葡萄葉片時(shí)會(huì)誘導(dǎo)白藜蘆醇的積累，在72 h時(shí)其含量達(dá)到59.46 μg/g，是空白組的2.12倍，且植物體內(nèi)ROS水平在24 h達(dá)到最高；加助氧化劑H2O2和FeCl3共處理組的白藜蘆醇含量有所提高；而加了抗氧化劑NAC和GSH-EE的共處理組白藜蘆醇的含量則有所減少。霜霉菌誘導(dǎo)白藜蘆醇積累與植物氧化脅迫有密切關(guān)系。

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Accumulation of resveratrol and redox regulation in grape induced by downy mildew

Dong Jinlei,Zhang Shanshan,Wang Xiaoqin,Zhang Bo*
(School of Pharmacy,Shihezi University/Key Laboratory of Xinjiang Endemic Phytomedicine Resources,Shihezi,Xinjiang 832002,China)

Downy mildew is the most common grape disease.This study carried out a research on the patterns of phytoalexin accumulation and reactive oxygen regulation during the infection of downy mildew on grape leaves.7-month-old grapevine(Red globe)leaves and fresh downy mildew were selected for innoculation in 20℃under dark conditions.The time-effect relationships between infection and resveratrol content were analyzed by HPLC method.Similarly,the accumulation of reactive oxygen species(ROS)after infection was determined by spectrophotometric method.The gene-expression level of key enzymes in stilbene pathway was semi-quantified by RT-PCR assay.The relationship between the resveratrol-elicitied potency by downy mildew and ROS accumulation was identified by positive and negative validation via additional both pro-oxidative or anti-oxidative approaches.The results showed that downy mildew induced the accumulation of ROS in grape leaves which reached the highest level at 24 h.Resveratrol accumulated with time and at 72 h it reached 59.46 μg/g.The expression of STS gene was significantly up-regulated,while the expression of PAL,C4H and 4CL reached the highest at 24 h or 48 h in the resveratrol synthesis pathway.The content of resveratrol in grape leaves increased in H2O2and FeCl3treated groups,while the content of resveratrol decreased in the treatment group treated with antioxidant NAC and GSH-EE.It suggests that the accumulation of resveratrol induced by downy mildew is related to redox mechanism.

resveratrol;downy mildew;stilbene biosynthesis;ROS accumulation;Vitis viniferaL.cv.Red Globe

R363

A

10.13880/j.cnki.65-1174/n.2017.04.016

1007-7383(2017)04-0486-07

2017-01-25

國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目（31160058），新疆兵團(tuán)重點(diǎn)領(lǐng)域科技攻關(guān)項(xiàng)目（2014BA029）

董錦蕾（1990-），女，碩士研究生，專業(yè)方向?yàn)樯锛夹g(shù)制藥。

*通信作者：張波（1978-），男，教授，從事腫瘤藥理及生物技術(shù)制藥研究，e-mail:Bozhang_lzu@126.com。